Isolamento e identificação de glicosídeos de feniletanol de Cistanche Deserticola

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Introdução

Cistanche deserticolacoletado na farmacopeia chinesa é o caule carnoso e seco deCistanche deserticola, planta Orobanchaceae, que é um medicamento comumente usado para tonificar o rim na medicina tradicional chinesa. Existem muitas variedades de Cistanche deserticola, e há muitos relatórios de pesquisa sobre Cistanche salsa eCistanche tubulosana literatura, mas há poucos estudos sobre as variedades coletadas na Farmacopeia. Luo Shangfeng e outros obtiveram manitol, 8-ácido epigástrico e aminoácidos de Cistanche deserticola. Para desenvolver e estudar Cistanche, Departamento de Farmácia, Xinjiang Medical College extraiu e separou seus componentes solúveis em água – fenil etanol glicosídeos. Os resultados mostraram que quatro componentes foram separados e identificados, são elesechinacoside, castanosídeo A,acteósidoe 2'-Acetillacteósido. Os componentes acima têm efeitos farmacológicos, como a promoção de funções renais eanti-envelhecimento.

Parte experimental

Os materiais medicinais experimentais foram adquiridos da empresa de materiais medicinais Urumqi e produzidos no condado de Jinghe. As variedades foram identificadas por Li Jiazheng, pesquisador associado do Instituto de medicina étnica de Xinjiang. O modelo de resina macroporosa foi o AB-B, que é um produto químico da Universidade de Nankai. O gel de sílica usado na camada da coluna era um produto da fábrica química marinha de Qingdao, Stephan-dex LH-20 era o produto da fábrica farmacêutica Shanghai Changzheng. O modelo do espectrofotômetro UV foi Shimadzu UV-360. O espectrofotômetro infravermelho foi Shimadzu IR-440. Os modelos de instrumentos H-NMR e C-NMR foram Bruker MSL-300 (300 megaciclos)

1. Extração e separação

Extraído Cistanche deserticola10kg três vezes pelo refluxo de etanol, combinar o extrato e concentrá-lo para colar sob pressão reduzida, adicionar uma pequena quantidade de água para suspensão, desengordurar com acetato de etila, extrair com n-butanol, combinar o extrato, concentrar para secar sob pressão reduzida, adicionar uma pequena quantidade de água para dissolução, coletar e concentrar sucessivamente a parte de metanol através de coluna de resina macroporosa e coluna de poliamida (lavar primeiro com água e depois com metanol). Os glicosídeos de fenil etanol totais são obtidos pela camada de coluna de sílica gel. Com eluição em gradiente de CHCl3-MeOH (10:3 a 10:5), um total de 78 fluxos (cerca de 300 ml por fluxo) foram coletados, dos quais 16-23 eram compostos brutos IV (2,1 g), 28-42 eram compostos brutos III (5,4 g), 48-61 eram compostos brutos II (3,2 g), 65-78 eram compostos brutos I (5,1 g). Os componentes acima foram purificados por cromatografia em coluna de gel de sílica (as condições de eluição foram as mesmas acima) e depois purificados pela coluna de gel de dextrano LH-20. Eluir com CH3OH:H20 (1:1) e coletar a parte de metanol para obter compostos monômeros IV (1,3 g), III (3,5 g), II (1,8 g) e I (3,5 g)

2. Identificação

Composto I: pó amorfo amarelo claro, reação FeCl3 e - teste de naftol positivo, cromatografia em camada fina de sílica gel valor Rf de 0.3 (CHCl3:MeOH:H2O=6:4:1 expansão, 20 porcentagem de detecção de pulverização de H2SO4), UV λ (MeOH/nm):244, 292, 333. IR (KBr/MAX): cm-1: 3360, 1690, 1625, 1598, 1518. H-NMR (Metanol- d1) δ: 1,08 (3H, D, J=6Hz, CH3), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-) , 4,29, 4,39 (1H, D, J=8Hz, dois prótons terminais de glicose), 5,18 (1H, D, J=1Hz, prótons terminais ramnosil), 6,28 (1H, J{{50) }}Hz, Ar-CH=CH-), 6.5-7.1 (6H, aril H), 7,59 (1H, D, J=16Hz, Ar-CH{ {63}}CH-) Os dados de C-NMR são mostrados na Tabela 1. A reação química acima e os dados espectrais são consistentes com o relatório deechinacosidena literatura. Portanto, o Composto I é identificado como echinacoside.

Composto II: pó amorfo amarelo claro, reação FeCl3, e - Naftol teste foi positivo, e cromatografia em camada fina de sílica gel Rf 0.35 (condições de desenvolvimento e detecção foram as mesmas acima). Seus espectros de UV e IR foram muito semelhantes aos deechinacoside, mas H-NMR apareceu sinal δ 3,84 (3H, s), C-NMR aparece sinal δ 56,5, indicando que a estrutura contém 1 metoxi. UV λ (MeOH/nm): 246, 290, 333. IR (KBr/MAX)cm-1: 3350, 1655, 1620, 1596, 1508. H-NMR(metanol-d1) δ: 1,08 (3H, d, J=6Hz, grupo metil em ramnose), 2.86 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-) CH2-), 3,84 (3H, s, OCH3), 4,28, 4,39 (1H, d, J=8Hz, dois prótons do grupo terminal de glicose), 5,18 (1H, s, prótons do grupo terminal de ramnose), 6,27 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-), 6.65-7.1 (6H, aril H), 7,60 (1H, d , J=16Hz, Ar-CH=CH-). Consulte a Tabela 1 para dados de C-NMR, os dados espectrais acima são consistentes com o valor da literatura de castanosídeo A. Portanto, o composto II foi identificado como castanosídeo A Composto III: pó amorfo amarelo claro, cromatografia em camada fina de gel de sílica O valor de Rf é 0,40 (desenvolvimento e as condições de detecção são as mesmas acima). Seus espectros UV e IR também são semelhantes aos do echinacoside. Há um próton terminal de glicose a menos em H-NMR e um sinal de glicose a menos em C-NMR, sugerindo que é um dissacarídeo. UV λ (MeOH/nm): 247, 292, 334. IR (KBr/MAX): 3350, 1690, 1625, 1600, 1515. H-NMR (metanol-d1) δ: 1,10 (3H, d, J{{ 83}}Hz, ramnose metil), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,38 (1H, d, J{{94} }Hz, próton terminal de glicose), 5,19 (1H, d, J=1Hz, próton terminal de ramnose), 6,28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 6.5-7.1 (6H, aril H), 7,59 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). Os dados de C-NMR são mostrados na Tabela 1. Os dados espectrais acima são consistentes com os valores da literatura deacteósido, então o composto LII é determinado como sendoacteósido.

Composto IV: pó amorfo amarelo claro. O valor Rf de cromatografia em camada fina de gel de sílica é 0.42 (as condições de desenvolvimento e detecção são as mesmas acima). Seus dados espectrais são muito semelhantes aosacteósido. Há mais um pico de absorção de 1735cm-1 no espectro infravermelho, e H-NMR mostrou sinais da matriz acetil de δ1.98(3H.S), e C-NMR mostrou sinais de grupos carbono e metil de δ171,5 e 20,9. De acordo com a lei do deslocamento da glicosilação, a acetilação está localizada no grupo hidroxila do açúcar 2'. λ (MeOH/nm): 247, 292, 333. IR (KBr/MAX): 3430, 1725, 1700, 1630, 1605. 1525. H-NMR(metanol-d1) δ: 1,08 (3H, d, J{ {27}}Hz, ramnose metil), 1,98 (3H, s. OAc), 2,70 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,50 (1H, d=8Hz, próton terminal de glicose), 5,19 (1H, d, próton terminal de ramnose), 6,28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 6.5-7.1 (6H, aril H), 7,60 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). Os dados de C-NMR são mostrados na Tabela 1. Os dados espectrais acima são consistentes com o valor da literatura de 2'- Acetillacteoside, então o composto IV é confirmado como sendo 2'- Acetillacteoside.