O leitor RNA M6 A YTHDF2 controla a imunidade antitumoral e antiviral de células NK, parte 5

As células NK usam duas abordagens principais para destruir células tumorais e células infectadas por vírus: (1) liberação de moléculas citotóxicas, como perforina e granzimas, que induzem diretamente a apoptose ou piroptose das células alvo (Zhou et al., 2020) e (2) secreção de vários citocinas (como IFN-, TNF- e GM-CSF) e quimiocinas (MIP-1, MIP-1, IL-8 e RANTES) que melhoram a função de outros sistemas imunológicos inatos e adaptativos células (Fauriatet al., 2010; Reiter, 1993).

As células tumorais são células anormais do corpo humano que proliferam e se espalham de forma incontrolável, causando grandes danos ao nosso corpo. Para tratar tumores, muitas pessoas optam por receber quimioterapia, radioterapia e outros tratamentos. Esses tratamentos podem destruir até certo ponto as células tumorais, mas também causam alguns danos à nossa saúde, como afetar a memória.

A quimioterapia é atualmente um dos métodos mais importantes de tratamento de células cancerígenas. Ele usa medicamentos especiais para matar as células cancerígenas e prevenir o crescimento e a disseminação das células cancerígenas. No entanto, estes medicamentos também podem danificar algumas células normais, especialmente no cérebro, pelo que algumas pessoas podem experimentar um declínio significativo na memória enquanto recebem quimioterapia.

Porém, não devemos abandonar o tratamento por esse motivo. O avanço da ciência e da tecnologia proporcionou-nos muitos tratamentos novos, tais como terapia direcionada, imunoterapia, etc. Estes tratamentos podem não só reduzir os danos causados ​​pela quimioterapia ao nosso corpo, mas também matar eficazmente as células tumorais.

Além disso, também podemos tomar algumas medidas para proteger a nossa memória. Por exemplo, podemos melhorar a memória exercitando o cérebro, como ler com atenção, aprender línguas estrangeiras, jogar jogos cerebrais, etc. Além disso, comer bem e dormir bem também podem ajudar a manter uma boa memória.

Em suma, existe uma certa relação entre as células tumorais e a memória, mas não devemos desistir facilmente do tratamento por causa disso. Devemos tomar medidas proativas para proteger a nossa saúde física e memória e acreditar que os avanços na tecnologia podem nos trazer melhores tratamentos. Vamos lutar contra as células tumorais e proteger a nossa saúde e um futuro brilhante! Percebe-se que precisamos melhorar a memória, e a Cistanche deserticola pode melhorar significativamente a memória, pois a Cistanche deserticola tem efeitos antioxidantes, antiinflamatórios e antienvelhecimento, que podem ajudar a reduzir a oxidação e as reações inflamatórias no cérebro, protegendo assim o saúde do sistema nervoso. Além disso, a Cistanche deserticola também pode promover o crescimento e a reparação das células nervosas, melhorando assim a conectividade e a função das redes neurais. Esses efeitos podem ajudar a melhorar a memória, o aprendizado e a velocidade de pensamento, e também podem prevenir o desenvolvimento de disfunções cognitivas e doenças neurodegenerativas.

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Neste estudo, observamos mecanismos não idênticos pelos quais o YTHDF2 regula a imunidade antitumoral e antiviral das células NK. No cenário tumoral, o YTHDF2 promove a secreção de perforina, granzima B e IFN- pelas células NK para controlar a metástase do melanoma, enquanto, durante a infecção por MCMV, o YTHDF2 promove a atividade antiviral mediada por células NK contra o MCMV principalmente através da regulação da perforina.

Uma explicação potencial para esta discrepância é que a ativação de células NK por tumores ou vírus é regulada de maneiras diferentes.

O MCMV ativa células NK codificando a proteína m157, um ligante do receptor de células NK Ly49H (Smith et al., 2002), e associa-se a dois adaptadores intracelulares, DAP10 e DAP12 (French et al., 2006; Orr et al., 2009). No entanto, no contexto tumoral, a ativação de células NK é fortemente regulada pela sua interação com diferentes ligantes de receptores de células NK expressos por células tumorais, bem como por citocinas, como IL-15 e TGF-, no microambiente tumoral (Wu et al., 2020b).

Além disso, descobrimos que o YTHDF2 promove a maturação das células NK regulando Eomes. No entanto, não foram encontrados locais de ligação no mRNA de Eomes, sugerindo que o YTHDF2 regula indiretamente a expressão de Eomes. Mais estudos são necessários para investigar o mecanismo pelo qual o YTHDF2 regula a expressão de Eomes.

Além disso, a forma como o YTHDF2 recebe e medeia sinais que podem moldar rapidamente a resposta imunológica das células NK contra vírus ou células tumorais de maneira diferente também requer uma exploração mais aprofundada. A transferência adotiva de células NK alogênicas em pacientes com leucemia pode levar à remissão (Ruggeri et al., 2002).

Foi demonstrado que as células NK projetadas por CAR fornecem benefícios significativos no linfoma CD 19+ recidivante ou refratário e na leucemia (Liu et al., 2020). No entanto, a expansão e persistência limitadas de células NK in vivo, bem como o tráfego limitado de células NK e a infiltração em locais tumorais, continuam a ser um grande desafio para a terapia baseada em células NK (Yilmaz et al., 2020).

Como pacientes com câncer ou pacientes infectados por vírus, como aqueles com COVID-19, geralmente sofrem linfopenia transitória (Grossman et al., 2015; Zhaoet al., 2020), a expansão eficiente das células NK durante a linfopenia é crítica para controlar o crescimento do tumor e infecção viral.

Nossas descobertas mostram que o YTHDF2 impulsiona a saída de células NK do BM e promove a proliferação homeostática de células NK durante a linfopenia in vivo em camundongos sem células T, B e NK. Nosso estudo também mostra que o YTHDF2 regula positivamente a função efetora das células NK.

Portanto, a incorporação da expressão de YTHDF2 em células NK ou CAR-NK pode ter benefícios multifacetados para a expansão de células NK durante a fabricação in vitro, persistência e aumento da função efetora in vivo. Além disso, a regulação positiva de YTHDF2 que observamos no cenário tumoral e durante a infecção viral pode aumentar a capacidade das células NK ou CAR-NK de se infiltrarem no microambiente da doença.

IL-15 é um regulador chave do desenvolvimento, homeostase, sobrevivência e função efetora de células NK (Becknell e Caligiuri, 2005; Mishra et al., 2014; Yu et al., 2013). Nosso grupo relatou anteriormente uma nova via de sinalização IL-15–AKT–XBP1s que contribui para as funções efetoras e a sobrevivência de células NK humanas (Wang et al., 2019b). No entanto, o(s) mecanismo(s) exato(s) pelo qual a IL-15 regula a sobrevivência das células NK ainda não foi totalmente compreendido.

Aqui, encontramos outro novo mecanismo em que STAT5-YTHDF2 forma um ciclo de feedback positivo a jusante de IL-15 células NK de camundongos que, por sua vez, controla a proliferação, sobrevivência e funções efetoras de células NK. Nosso relatório anterior mostrou que IL-15 não induz transcrição de XBP1s, e XBP1s não interagem com STAT5 em células NK (Wang et al., 2019b), sugerindo que a regulação de XBP1s por IL-15 é independente de STAT5 .

Portanto, identificamos dois novos mediadores de IL -15 em células NK, XBP1s e YTHDF2, para os quais XBP1s não são regulados por STAT5, enquanto YTHDF2 é dependente de STAT5. Essa complexidade da sinalização de IL-15 caracterizada pode corresponder ao papel complexo e pleiotrópico da IL-15, que é um componente chave tanto do meio inflamatório no microambiente tumoral quanto da resposta à infecção viral (Nguyen et al., 2002; Santana Carrero et al., 2019).

A complexidade também se reflete no fato de que a deficiência de Ythdf2 não afeta a sobrevivência e proliferação de células NK em repouso in vivo, enquanto YTHDF2 desempenha um papel crítico na regulação da proliferação e/ou sobrevivência de células NK ativadas por IL-15 ou por infecção por MCMV .

Nosso estudo também apóia o conceito de que as modificações do YTHDF2 ou m6A em geral desempenham um papel mais central na dinâmica das células NK no estado ativado e/ou nos ambientes de doença.

Neste estudo, aplicamos uma estratégia multiômica (RNA-seq, m6A-seq e RIP-seq) para identificar os alvos de YTHDF2 em células NK.

Em linha com nossa descoberta de que células NK deficientes em Ythdf2-apresentaram atraso significativo no crescimento celular, encontramos um grande número de genes relacionados ao ciclo celular e à divisão celular que foram acentuadamente diminuídos em células NK Ythdf2ΔNK, sugerindo que YTHDF2 controla o crescimento celular regulando o ciclo celular . É digno de nota que as modificações do m6A têm estado amplamente envolvidas na regulação do ciclo celular.

METTL3 promove o crescimento celular na leucemia mieloide aguda, aumentando a tradução de genes na via do ciclo celular (Barbieri et al., 2017; Vu et al., 2017). A deleção de METTL14 estende a neurogênese cortical até os estágios pós-natais, prolongando a transição de fase S para M das células gliais radiais (Yoonet al., 2017).

Consistente com o nosso estudo, foi relatado que nas células HeLa, o YTHDF2 tem como alvo vias envolvidas não apenas na função molecular, mas também na proliferação e sobrevivência celular (Wanget al., 2014).

Fei et al. (2020) relataram recentemente que YTHDF2 promove a proliferação celular, possivelmente facilitando a degradação do mRNA durante o ciclo celular em células HeLa, sugerindo um (s) mecanismo (s) universal (is) de YTHDF2 ou suas modificações m6A associadas na manutenção da sobrevivência e função celular. Como são necessários milhões de células para a análise da estratégia multiômica, tivemos que contar com células NK ex vivo expandidas e altamente proliferativas.

Isto pode explicar a observação de que os alvos selecionados do YTHDF2 são principalmente genes do ciclo celular, enquanto os alvos potenciais que controlam a sobrevivência celular, a função efetora e a maturação das células NK não foram mostrados. Independentemente disso, acreditamos que nossos dados fornecem a primeira evidência de que os alvos do YTHDF2 contribuem para os processos do ciclo celular e da divisão celular nas células do sistema imunológico, particularmente nas células NK.

Em conclusão, descobrimos um papel até então desconhecido da metilação do YTHDF2 ou m6A como um regulador positivo da atividade antitumoral e antiviral das células NK, bem como da homeostase e maturação das células NK. Essas descobertas fornecem informações sobre como as células NK pesquisam efetivamente contra metástases tumorais e infecção viral por meio da metilação do mRNA m6A. Materiais e métodos Camundongos Camundongos Ythdf2fl/fl foram gerados pelo laboratório de J. Chen.

Resumindo, a construção do doador foi projetada para gerar uma mutação condicional de um gene alvo específico após eletroporação (recombinação homóloga) em células-tronco embrionárias de camundongos. O cassete de direcionamento (En2SA-IRES-LacZ-pA-hBactP-Neo-pA) é flanqueado pela enzima de recombinação de flippase (Flp) - locais de recombinação de alvo de reconhecimento, permitindo a remoção do cassete de direcionamento com recombinase Flp.

Um par de loxP também é introduzido em torno do quarto exon de Ythdf2, que é usado para deleção condicional do quarto exon de Ythdf2 pela recombinase Cre. Camundongos com o alelo floxed (Ythdf2fl/fl) foram gerados pelo cruzamento de camundongos descendentes F1 com camundongos ROSA26-FlpE (estoque nº 003946; TheJackson Laboratory). Camundongos Ythdf2fl/fl foram cruzados com C57BL/6 por pelo menos 10 gerações antes de serem usados ​​para qualquer experimento.

Os ratos Ncr1-iCre foram um presente de Eric Vivier (Centre d'Immunologie de Marseille-Luminy, Marselha, França; NarniMancinelli et al., 2011). Camundongos Rag2-/-Il2rg-/- foram fornecidos pela instalação de animais em City of Hope. Camundongos NCI B6-Ly5.1/Cr (camundongos CD45.1) foram adquiridos de Charles River Laboratories. Os ratos IL-15Tg foram gerados pelo nosso grupo e retrocruzados com o fundo C57BL/6 (Fehniger et al., 2001). Os camundongos Stat5fl/fl eram originalmente de John J. O'Shea (Instituto Nacional de Artrite e Doenças Musculoesqueléticas e de Pele, Bethesda, MD; Cui et al., 2004).

Stat5fl/fl Ncr1-iCre mice were generated in the laboratory of J.C. Sun (Wiedemann et al., 2020). All mice were on a C57BL/6 background for >10 gerações. Camundongos machos e fêmeas com 6 a 12- semanas de idade foram usados ​​para os experimentos. Irmãos de ninhada Cre-negativos foram usados ​​como controles WT. Todos os experimentos com animais foram aprovados pelo comitê institucional de cuidados e uso de animais da Cidade de Esperança.

For more information:1950477648nn@gmail.com