Permeabilidade intestinal e depressão em pacientes com doença inflamatória intestinalⅠ
Dec 20, 2023
Resumo: A depressão é um problema de saúde global que requer diagnóstico precoce e preciso para garantir acesso rápido ao tratamento adequado. A atenção recente concentrou-se na análise do eixo cérebro-intestino-microbiota entre vários caminhos psicopatológicos. A barreira intestinal desempenha um papel fundamental e as disfunções que ocorrem a este nível têm implicações para a saúde mental. O presente estudo teve como objetivo investigar o papel dos biomarcadores de permeabilidade intestinal, ou seja, calprotectina, zonulina, proteína de ligação a lipopolissacarídeos (LBP) e proteína de ligação a ácidos graxos intestinais (I-FAB), na depressão em pacientes com doença inflamatória intestinal (DII). ).
Este é o primeiro estudo deste tipo realizado na Roménia, Europa Oriental, com ênfase em pacientes com doença de Crohn e colite ulcerosa. As correlações identificadas entre depressão e calprotectina e depressão e lombalgia têm o potencial de esclarecer o processo de diagnóstico rápido da depressão com a ajuda de biomarcadores. Uma vez que a depressão está correlacionada com a diminuição da qualidade de vida dos pacientes internados com DII, a necessidade de acesso a tratamentos adequados deve ser urgente.
1. Introdução
A depressão é uma incapacidade individual, profissional e social associada a morbidades somáticas [1,2] e a um alto risco de mortalidade por suicídio [3]. No entanto, o acesso a especialistas, um diagnóstico correto e uma cura eficaz são limitados [4]. Um diagnóstico precoce e preciso [5,6], bem como uma seleção personalizada do tratamento [7], são necessários para diminuir o sofrimento e a carga financeira da doença [3]. De acordo com os critérios diagnósticos do Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais (DSM V) [8], a depressão é um transtorno afetivo com um grupo heterogêneo de sintomas. Para ser diagnosticado, é necessária a presença de cinco dos nove sintomas a seguir: humor deprimido, falta de prazer, dificuldade para dormir e apetite, baixos níveis de energia, alterações cognitivas, sentimentos de culpa e culpa e ideias suicidas. os mecanismos fisiopatológicos para se beneficiar de um tratamento eficaz não são conhecidos. Vários mecanismos foram questionados, mas as teorias ainda estão em desenvolvimento.
Assim, disfunções no eixo hipotálamo-hipófise, neurotransmissores, nervo vago, metabólitos de ácidos graxos de cadeia curta, triptofano, fatores inflamatórios e eixo cérebro-intestino-microbiota foram investigadas [9–12]. Está provado que não só os distúrbios relacionados com o stress provocam alterações na composição da microbiota intestinal através do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal, mas também o intestino afecta o
sistema nervoso central através da estimulação vagal, permeabilidade intestinal e liberação de compostos inflamatórios e anti-inflamatórios e alterações nos agentes circulantes no sangue [13]. Nas últimas duas décadas, o estudo do envolvimento do eixo cérebro-intestino-microbiota nos transtornos mentais ganhou impulso [9,14]. Neste contexto, o papel da síndrome do intestino permeável tem recebido mais atenção [15,16].
A barreira intestinal tem o papel principal na digestão e absorção de nutrientes; secundário, controla rigorosamente o transporte de antígenos do lúmen para a submucosa e mantém o equilíbrio entre a tolerância e a resposta imune que causa a inflamação. A integridade da barreira intestinal pode ser afetada pela dieta, pela disbiose da microbiota intestinal ou por outros fatores. Estes têm o potencial de causar imunoativação por translocação de antígenos e metabólitos microbianos. Atualmente, a zonulina sérica, a proteína de ligação a ácidos graxos intestinais (IFABP/FABP2) e a LBP, bem como a albumina fecal, a calprotectina e a zonulina, foram analisadas como permeabilidade intestinal. marcadores [17].A calprotectina é uma proteína que se liga ao cálcio e ao zinco, inicialmente isolada dos leucócitos; é útil na diferenciação da doença inflamatória intestinal da síndrome do intestino irritável. ].
Os valores normais estão entre 10 e 50 ou 60 (ug/g). Valores acima de 200 (ug/g) podem indicar uma doença inflamatória, e valores acima de 500–600 (ug/g) certamente indicam a existência de uma doença intestinal [19]. A proteína de ligação a lipopolissacarídeos (LBP) é um componente lipídico essencial da membrana externa. de bactérias Gram-negativas [20], que causa endotoxemia [21]. A LBP é produzida por hepatócitos, tecido adiposo e células intestinais, funciona como uma proteína de fase I aguda e desempenha um papel importante na resposta imune [22]. A LBP está presente no soro em concentrações de 5–15 mg/mL e aumenta de 10 a 50 vezes durante a reação de fase aguda. A função de barreira é mantida pela zonulina, conhecida como o único modulador fisiológico de junções intracelulares próximas (TJs) [15,23, 24]. A zonulina abre reversivelmente o TJ, agindo no receptor 2 ativado por protease localizado no espaço intracelular do complexo juncional [25]. O valor médio da zonulina é 34 ng/mL [26].
A proteína de ligação a ácidos graxos intestinais (I-FABP/FABP2) é uma das nove diferentes FABPs identificadas, que pertencem a uma superfamília de proteínas que se ligam a lipídios. O papel principal é o transporte intracelular e a regulação da absorção de ácidos graxos [27]. Quando ocorre dano à barreira epitelial intestinal, o I-FABP é liberado na circulação e sua concentração plasmática aumenta [28]. O valor limite para I-FAPB é considerado 2 ng/mL. Nesse contexto, nosso objetivo foi investigar o papel dos biomarcadores de permeabilidade intestinal na depressão em pacientes com doença inflamatória intestinal (DII) por meio de (i) examinar a relação entre calprotectina, zonulina, lombalgia , IFABP/FABP2 e depressão e (ii) avaliar a influência da depressão na qualidade de vida.
2. Materiais e métodos
2.1. Grupo de Estudos
O grupo inicial incluiu 60 pacientes da Clínica de Gastroenterologia do Hospital Clínico do Condado de Constanta entre abril e junho de 2021. Os critérios de inclusão foram diagnóstico de DII, idade igual ou superior a 18 anos, conhecimento de leitura e escrita e concordância em participar do estudo. Os critérios de exclusão foram negação de consentimento, depressão grave ou outros transtornos mentais graves para os quais foram encaminhados ao serviço psiquiátrico especializado. Após consentimento informado, os pacientes foram contatados por telefone por um pesquisador para aplicação de um questionário sociodemográfico sobre depressão e um questionário sobre qualidade de vida. vida. Foram incluídos no estudo 30 pacientes que passaram por todas as etapas do estudo.
2.2. Questionários usados
O Questionário de Saúde do Paciente-9 (PHQ-9) [29] foi aplicado aos participantes para avaliar o nível de depressão pelo qual eles foram afetados. Este questionário padrão contém nove itens a serem respondidos com base nos sintomas que o paciente apresentou durante os últimos 14 dias. Os escores são classificados da seguinte forma: 1–4 depressão mínima, 5–9 depressão leve, 10–14 depressão moderada, 15–19 depressão moderadamente grave e 20–27 depressão grave. Da mesma forma, aplicamos um questionário de qualidade de vida (EQ{{ 14}}D) [30,31] para coletar dados referentes à qualidade de vida. Os itens incluídos nesta ferramenta são mobilidade do paciente, autocuidado, envolvimento em atividades habituais, dor ou desconforto e ansiedade ou depressão vivenciada. Os itens são respondidos em uma escala de cinco níveis.
2.3. Coleta de Amostras e Análise Laboratorial
Amostras sorológicas para zonulina, IFABP/FABP2, LBP e amostras fecais para calprotectina foram coletadas de acordo com o protocolo de coleta e transporte de amostras biológicas potencialmente infecciosas. As amostras de soro foram coletadas por punção venosa, em jejum e no vacutainer com pano ativador. Amostras fecais foram coletadas de fezes emitidas espontaneamente em recipientes sem meio transportador. O soro foi testado para zonulina com MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, EUA). e IFABP/FABP2 e LBP com kit Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. (Wuhan, China). As amostras foram testadas para calprotectina com o kit EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Todos os testes foram realizados por teste de imunoabsorção enzimática (ELISA) em um analisador ADALTIS GEN-4 e Victor X4 de acordo com as instruções do fabricante do kit.
A faixa de valores normais foi definida pelo fabricante do kit apenas para calprotectina como segue: Menor ou igual a 50.0 mcg/g como normal, 50.1– 120,0 mcg/g como valor limite e Maior ou igual a 120,1 mcg/g como positivo para doença intestinal. Para a zonulina, o fabricante do kit de reação não especificou nenhum limite inferior de detecção. O limite inferior de detecção para o kit IFABP/FABP2 foi de 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL para LBP e 3,125 ng/mL para calprotectina. Para zonulina, I-FABP/FABP2 e LBS/LBP, o fabricante do kit não comunicou uma faixa de valores normais, e foram utilizados valores utilizados por outros autores em seus estudos. O soro foi extraído de cada amostra de sangue por centrifugação a 3000× g por 30 minutos usando uma centrífuga Thermo Scientific SL16R.
Todos os soros obtidos foram mantidos congelados a −200 ◦C até a realização das análises. Para IFABP/FABP2 e LBP, as amostras foram diluídas a 1/2 com um tampão de diluição de amostra antes do teste. As amostras de fezes foram mantidas a -20 ◦C até o dia do teste. A extração da amostra de fezes foi realizada usando um tampão de extração de 980 UI junto com 20 mg de fezes, agitada por 30 segundos e depois centrifugada a 2.000 × g por 10 minutos usando a centrífuga Thermo Scientific SL16R. A diluição das amostras foi então realizada com 980 UI de tampão de amostra e 20 UI de sobrenadante de extração.
Para os quatro marcadores foram utilizadas microplacas com 96 poços revestidos com anticorpos de captura: anticorpos anti-calprotectina, anticorpos anti-IFABP/FABP2, anticorpos anti-LBP ou anticorpos antizonulina. Os princípios do teste foram os mesmos, baseados na tecnologia de teste imunológico relacionado a enzimas (ELISA). Amostras padrão, amostras de teste e anticorpos de detecção conjugados com biotina foram posteriormente adicionados aos poços. Substratos TMB (3,30,5,50-tetrametilbenzidina) foram usados para visualizar a reação enzimáticaHRP (peroxidase de rábano). HRP catalisou TMB para produzir um produto azul que mudou para amarelo após a adição de uma solução anti-ácido.
A densidade da mancha amarela foi proporcional à quantidade de amostra capturada na placa. A intensidade da cor foi medida a 450 nm no leitor de microplacas e em seguida calculada a concentração alvo.
2.4. Análise Estatística
A análise estatística foi realizada utilizando o software estatístico IBM SPSS versão 23 (Armonk, NY, EUA: IBM Corp.). Os dados são apresentados como mediana e IQR (interquartilintervalo P75–P25) para variáveis contínuas no caso de distribuições assimétricas ou como porcentagens para variáveis categóricas.
Como o teste de normalidade de Shapiro-Wilk indicou, no caso das variáveis contínuas analisadas, valores estatísticos do teste cuja probabilidade (p)foi inferior ao nível de significância {{0}}.05, a condição de a normalidade não foi atendida, exceto para as variáveis DL e PHQ 9, para as quais p >=0,05. Consideramos que uma abordagem não paramétrica ao estudo da correlação entre as variáveis em questão, com a apresentação do coeficiente de correlação rho de Spearman (ρ) e da probabilidade (p) a ele associada, era mais adequada. O nível de significância foi fixado em 0,05.
Fitoterapia natural para aliviar a constipação-Cistanche
Cistanche é um gênero de plantas parasitas que pertence à família Orobanchaceae. Estas plantas são conhecidas pelas suas propriedades medicinais e têm sido utilizadas na Medicina Tradicional Chinesa (MTC) há séculos. As espécies de Cistanche são encontradas predominantemente em regiões áridas e desérticas da China, Mongólia e outras partes da Ásia Central. As plantas Cistanche são caracterizadas por seus caules carnudos e amarelados e são altamente valorizadas por seus potenciais benefícios à saúde. Na MTC, acredita-se que Cistanche tenha propriedades tônicas e é comumente usado para nutrir os rins, aumentar a vitalidade e apoiar a função sexual. Também é usado para tratar de questões relacionadas ao envelhecimento, fadiga e bem-estar geral. Embora Cistanche tenha uma longa história de utilização na medicina tradicional, a investigação científica sobre a sua eficácia e segurança é contínua e limitada. No entanto, sabe-se que contém vários compostos bioativos, como glicosídeos feniletanóides, iridóides, lignanas e polissacarídeos, que podem contribuir para os seus efeitos medicinais.
Wecistanche'scistanche em pó, comprimidos de cistanche, cápsulas de cistanche, e outros produtos são desenvolvidos usandodesertocistanchecomo matérias-primas, que têm um bom efeito no alívio da constipação. O mecanismo específico é o seguinte: Acredita-se que Cistanche tenha benefícios potenciais no alívio da constipação com base em seu uso tradicional e em certos compostos que contém. Embora a investigação científica específica sobre o efeito do Cistanche na obstipação seja limitada, pensa-se que tem múltiplos mecanismos que podem contribuir para o seu potencial no alívio da obstipação. Efeito laxante:Cistanchetem sido usado há muito tempo na Medicina Tradicional Chinesa como remédio para constipação. Acredita-se que tenha um efeito laxante suave, que pode ajudar a promover os movimentos intestinais e induzir a constipação. Este efeito pode ser atribuído a vários compostos do Cistanche, como glicosídeos feniletanóides e polissacarídeos. Umedecendo os Intestinos: Com base no uso tradicional, considera-se que Cistanche possui propriedades hidratantes, visando especificamente os Intestinos. Promover a hidratação e a lubrificação dos intestinos pode ajudar a suavizar as ferramentas e facilitar a passagem, aliviando assim a constipação. Efeito antiinflamatório: Às vezes, a constipação pode estar associada à inflamação no trato digestivo. Cistanche contém certos compostos, incluindo glicosídeos feniletanóides e lignanas, que se acredita terem propriedades antiinflamatórias. Ao reduzir a inflamação nos intestinos, pode ajudar a melhorar a regularidade dos movimentos intestinais e a aliviar a constipação.
