Efeitos de diferentes métodos de processamento na qualidade intrínseca e nas características do Cistanche
Sep 22, 2022
Objetivo: Otimizar os métodos de processamento do Cistanche Cistanche e estudar os efeitos de diferentes métodos de processamento na qualidade intrínseca e nas características do Cistanche Cistanche.
Métodos: Diferentes tratamentos de pré-secagem (sem fatias e não cozidas no vapor, não fatiadas e cozidas no vapor por 20 min, fatiadas frescas, cozidas no vapor por 5 min após fatias frescas) e métodos de secagem (secagem a 80, 70, 60, 50 graus, natural O conteúdo deechinacoside, verbascoside, cistanosídeo A, isoverbasin, 2'-acetilverbasosídeo, tuberosídeo Aepolissacarideono Cistanche foram determinadas amostras que foram secas ao sol, secas à sombra e liofilizadas, e a pontuação abrangente foi usada. O método de processamento deCistanchefoi otimizado pelo método, o sabor das amostras foi determinado pela tecnologia de língua eletrônica, a textura das amostras foi avaliada indiretamente pela taxa de reidratação e índice de dureza, e a correlação entre elas e o conteúdo dos principais componentes químicos foi estudada.
RESULTADOS: O método de pontuação abrangente foi usado para selecionar o melhor método de processamento de Cistanche fresco, vapor por 20 min e depois secagem a 60 graus. O estudo de correlação descobriu que o sabor, a textura e outras características estavam correlacionadas com o conteúdo de alguns componentes em graus variados. .
Conclusão: Para garantir efetivamente a qualidade deCistanche, é necessário selecionar métodos de processamento apropriados para processamento na origem, e as informações de caráter, como sabor e textura, podem refletir o teor de ingrediente ativo do material medicinal até certo ponto, o que é conveniente para a identificação rápida da qualidade do material medicinal.
Palavras-chaveCistanche; processamento de origem; glicosídeos de feniletanol（Phg）; polissacarídeos; língua eletrônica; personagens
LivreAmostra de pó de extrato de Cistanche
Cistancheé o caule escamoso seco deCistanche DeserticolaYC Ma ouCistanche Tubulosa(Schenk) Wight, que tem as funções de revigorar o yang do rim,essência nutritiva e sangue, umidificação do intestino e laxante [1].
O processamento deCistanchetem sido praticado desde os tempos antigos. Na "Zhenglei Materia Medica", há registro de "colheita no dia 5 de maio e secagem à sombra". Os métodos de processamento atuais incluem secagem, salga e armazenamento em adega. Devido ao grande volume deCistanche, alto teor de açúcar e dificuldade de secagem, o método acima não é apenas demorado, trabalhoso e facilmente afetado pelas condições naturais, mas também com o passar do tempo e a hidratação secundária, os ingredientes ativos são facilmente perdidos, afetando a qualidade do produto. materiais medicinais [2].
A fim de garantir a alta qualidade e uniformidade dos materiais medicinais deCistanche, é necessário otimizar os métodos de processamento de sua origem, de modo a padronizá-lo e padronizá-lo. Com base na experiência de agricultores medicinais na área de produção e nos relatos de pesquisas de estudiosos relacionados sobre os métodos de processamento deCistanchena área de produção nos últimos anos [3-6], este experimento tomou o caule carnoso do Cistanche fresco como objeto de pesquisa para investigar o tratamento de pré-secagem e métodos de secagem do Cistanche, utilizando múltiplos indicadores. Para avaliar a qualidade deCistanchee otimizar o melhor método de processamento na área de produção, visa fornecer uma base para a padronização do processamento na área de produção deCistanche, e fornecer um novo método de referência para a avaliação abrangente e controle geral da qualidade do material medicinal deCistanche.
1 Instrumentos e materiais
1.1 Instrumentos
cromatógrafo líquido de alto desempenho Agilent 1260 (Agilent Company, EUA); espectrofotômetro UV UV6100S (Shanghai Meipuda Instrument Co., Ltd.); Língua eletrônica ASTREE II (France Alpha MOS Company); Balança analítica FA2004 (Shanghai Sunny Hengping) Instrumento Científico Co., Ltd.); Balança Analítica DV215CD (Ohaus Instrument Co., Ltd.); GY-4 Testador de Dureza Digital (Yueqing Aidelberg Instrument Co., Ltd.); SB-3200Limpador ultrassônico DTN (Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.).
1.2 Materiais
Echinacea (Lote: Y29M10H84490), Verbasin (Lote: Y21A9H59554), Cistanosídeo A (Lote: P14N9F74960), Isorrascoside (Lote: Y12D8H50507), 2'-Acetil Verbasina (Lote: P27N6F6623), Tubo Anthoside A (número do lote: P26N6F6622) referência as substâncias foram compradas da Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd., fração de massa Maior ou igual a 98 por cento; Substância de referência de glicose D-anidra (número do lote: 110833-201707, Instituto Nacional de Controle de Alimentos e Medicamentos da China); acetonitrila É de grau cromatográfico; os restantes reagentes são de grau analítico. O frescoCistanchepara o experimento foi coletado doCultivo de Cistanchebase da Hongkuisha Industrial Development Co., Ltd. da Mongólia Interior AlxaCistancheGrupo em outubro de 2019. Caules suculentos com folhas escamosas. O fresco colhidoCistanchefoi uniformemente misturado e dividido aleatoriamente em grupos. Cada grupo de amostras foi definido para ter 3 réplicas. Os métodos de tratamento de amostra são mostrados na Tabela 1.
2 Métodos e resultados
2.1 Determinação de glicosídeos de feniletanol
2.1.1 Condições cromatográficas: foi usada a coluna Agilent Eclipse XDB-C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm), a fase móvel foi 0,1 por cento de solução de ácido fórmico (A)-acetonitrila (B), eluição de gradiente (0 ~ 10 min, 9 por cento ~ 15 por cento B; 10 ~ 40 min, 15 por cento ~ 26 por cento B; 40 ~ 45 min, 26 por cento ~ 9 por cento B;
A taxa de fluxo foi de 1,0 mL/min; o comprimento de onda de detecção foi de 330 nm; a temperatura da coluna era de 30 graus; o volume de injeção foi de 10 μL e o cromatograma é mostrado na Figura 1.
2.1.2 Preparação da solução de substância de referência: Pesar com precisão uma quantidade apropriada de echinacoside, verbascoside,cistanosídeo A, isoverbasin, 2'-acetilverbasin e tuberoside A, e colocar em 5 mL Em um balão volumétrico marrom, dissolver com 50 por cento de metanol e diluir até o volume para preparar uma solução de referência com concentrações de {{6} },809, {{10}},932, 0,185, 0,272, 0,582 e 0,068 mg/mL, respectivamente.
2.1.3 Preparação da solução de teste: Tome 0,5 g deCistanche Tubulosaamostra em pó (passada por uma peneira nº 4), pese-a com precisão, coloque-a em um balão volumétrico marrom, adicione com precisão 25 mL de metanol a 50 por cento, feche bem e pese. Após imersão por 30 min, ultrasonicação (150 W, 40 kHz) por 40 min, deixar esfriar e depois completar o peso, agitar bem, deixar repousar, pegar o sobrenadante e filtrar com membrana microporosa de 0,45 μm.
2.2 Determinação de polissacarídeos
2.2.1 Preparação da solução de substância de referência: tomar 10,03 mg de substância de referência de D-anidroglicose, pesar com precisão, dissolver em água e diluir para 100 mL para obter uma solução de substância de referência com concentração de 100,3 ug/mL.
2.2.2 Preparação da solução teste: tomar 0,5 g de pó de amostra Cistanche Tubulosa (passado por uma peneira nº 4), pesar com precisão, colocar em frasco cônico tampado, adicionar 25 mL de 80 por cento de etanol e sonicar a 80 graus. (150 W, 40 kHz) por 30 min, filtrado enquanto quente e extração repetida uma vez. Depois que o resíduo do filtro foi evaporado até a secura, 25 mL de água foram adicionados e sonicados por 30 min. , Extraia com precisão 1 mL de solução e dilua para 10 mL.
2.2.3 Condições de detecção: tome 2 mL da solução teste deCistanche, adicione 1 mL de reagente de fenol a 6%, agite bem, adicione rapidamente 5 mL de ácido sulfúrico concentrado, agite por 5 minutos, aqueça em banho-maria fervente por 15 minutos, resfrie e coloque a 482 graus. A absorbância foi medida em nm. Use água em vez da solução de teste como controle em branco.
2.3 Exame da relação linear Diluir a solução de referência de acordo com uma determinada proporção para preparar uma solução de referência mista de uma série de concentrações e medir de acordo com o método acima. Tome a concentração da solução de referência como a abcissa e a área do pico ou absorbância como as ordenadas. Regressão linear, os resultados são mostrados na Tabela 2.
2.4 Investigação metodológica
2.4.1 Teste de precisão:
Desenhe com precisão cada solução de referência e meça-a continuamente por 6 vezes de acordo com os métodos em "2.1.1" e "2.2.3", e calcule para obter echinacoside, verbascoside,cistanosídeo A, isaveraside, 2′ Os RSDs das áreas de pico de -Acetil Verbasosídeo e Tuberosídeo A e a absorbância de glicose foram 0,76 por cento, 0,53 por cento, 0,81 por cento, 0,25 por cento, {{10}},44 por cento, 0,62 por cento, 0. . 49 por cento, indicando que a precisão do instrumento é boa.
2.4.2 Teste de repetibilidade:
Tire 6 cópias do mesmo lote deCistanchepara testar o pó, pese com precisão, prepare a solução de teste de acordo com os métodos em "2.1.3" "2.2.2" e pressione "2.1.1" "2.2". 2,3", os RSDs calculados de echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverbasin, 2'-acetylverbasoside, tuberoside A e polissacarídeo foram 0,82 por cento, respectivamente. , 1,47 por cento, 0,88 por cento , 1,53 por cento , 0,55 por cento , 0,44 por cento , 1,13 por cento , indicando que o método tem boa repetibilidade.
2.4.3 Teste de estabilidade:
Desenhe com precisão a solução de teste deCistancheno item "2.1.3", e injetar amostras em 0, 2, 4, 8, 12 e 24 h de acordo com as condições cromatográficas no item "2.1.1", e calcular as pinhas. Os RSDs das áreas de pico de glicosídeo de crisântemo, verbascoside, cistanoside A, isoverascoside, 2'-acetilverbasoside e tuberoside A foram 0. 47 por cento, 1, 12 por cento, 0. 42 por cento, {{20}}. 65, respectivamente. percent , 0,57 por cento , 0,47 por cento , indicando que a solução de teste tem boa estabilidade em 24 h; absorver com precisão a solução de teste deCistancheem "2.2.2", pressione "2.2.3" As condições de detecção sob o item foram medidas em 0, 15, 30, 60, 120 e 240 min, respectivamente, e o RSD da absorbância do polissacarídeo foi calculado em 1,24 por cento, indicando que a solução de teste era estável em 240 min.
2.4.4 Teste de recuperação de amostra:
Pegue 6 partes deCistanchepara testar pó com conteúdo de componente conhecido, cada parte é 0,25 g, pesada com precisão, adicione
Adicione a solução de referência com o conteúdo de cada componente na amostra, prepare a solução de teste de acordo com os métodos em "2.1.3" "2.2.2" e de acordo com "2.1.1" "2.2. Medido pelo método em o item 3", e calculado para obter Echinacea
24 por cento , 1{{20}}2. 69 por cento , 101. 13%, 101,13%, 101,13%, 101,13%, 101,102,38%, 101,27%, 99,94%, 99,23%, RSD foram 0,98%, 2,18 percent , 0. 86 percent , 1. 26 por cento , 1. 13 por cento , 0. 94 por cento , 2. 34 por cento , indicando que os dois métodos são precisos e confiáveis.
2.5 Efeitos de diferentes métodos de processamento sobre o conteúdo de componentes ativos em Cistanche A soma dos conteúdos de echinacoside e verbascoside noCistancheamostras foi superior a 0,30 por cento , o que estava de acordo com a edição de 2020 da Farmacopeia Chinesa [1].
O estudo descobriu que a quantidade total dos componentes do índice nos materiais medicinais secos inteiros foi maior do que a das fatias frescas, e a quantidade total dos componentes do índice na amostra RZ3 cozida no vapor antes da secagem foi a maior. por cento , que é mais de 14 vezes o nível especificado na Farmacopeia. Pode-se observar que o teor de ingredientes ativos após o cozimento a vapor e o processamento dos materiais medicinais na origem é maior. Ao comparar os efeitos da secagem ao sol, secagem à sombra, secagem rápida e liofilização no teor de ingredientes ativos em Cistanche Cistanche não fatiado e cozido no vapor, verificou-se que o teor de echinacoside na amostra RZ2 foi o mais alto; Os teores de '-acetilverbasina e tuberosídeo A foram os mais altos, o teor deCistancheA na amostra RZ6 foi o maior, e o teor de polissacarídeo na amostra RZ5 foi o maior, indicando que diferentes métodos de secagem tiveram efeitos diferentes no teor de componentes ativos em CistancheCistanche. É necessário usar vários indicadores para avaliar de forma abrangente a sua qualidade.
O método AHP foi usado para determinar o coeficiente de peso do índice de avaliação da qualidade deCistanche, e os coeficientes de peso dos sete indicadores de echinacoside, verbascoside, cistanoside A, glicosídeo de isoverbasin, glicosídeo 2'-acetilverbásico, piploside A e polissacarídeo foram calculados respectivamente. 0.2668, 0.2668, 0.1626, 0.{{10}}958, 0.0958, 0,0561, 0,0561.
De acordo com a importância dos componentes medidos naCistanche, the 7 indicators were divided into 4 levels, and the priority order of each indicator was determined: echinacoside=verbasicose glycosides>cistanoside A>isoverbasin glycosides=2′-acetyl group Verbasin>tuberosina A{{0}}polissacarídeo, construindo assim o momento de prioridade de julgamento para comparação pareada. A razão de consistência aleatória CR é um índice para medir se o coeficiente de peso obtido é razoável. Neste experimento, CR= 0. 0066 < 0,10,="" indicando="" que="" a="" matriz="" de="" prioridade="" de="" julgamento="" para="" comparação="" pareada="" de="" indicadores="" está="" de="" acordo="" com="" o="" teste="" de="">
O coeficiente é razoável e eficaz e pode ser usado para pontuação abrangente de métodos de processamento na área de produção ideal deCistanche [7].
Para uniformizar os dados, os indicadores de avaliação precisam ser normalizados, a fórmula é yi=xi-xmin*xmax-xmin, onde yi é o valor normalizado do indicador, xi é o valor real do indicador, e xmax e xmin são os indicadores, respectivamente. Os valores máximo e mínimo do grupo e a pontuação abrangente ponderada são calculados de acordo com a fórmula K=y1×l1 mais y2×l2 mais …y6×l6 mais y7×l7, onde K é o valor da pontuação abrangente , y1, y2…y6, y7 respectivamente é o resultado da normalização dos conteúdos de echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverascoside, 2'-acetylverbasic glycoside, tuberoside A e polissacarídeo. Pesos. Os resultados abrangentes de pontuação mostraram que a qualidade geral da amostra RZ3 foi a melhor, ou seja, toda a amostra frescaCistanchefoi cozido no vapor por 20 min e depois seco a 60 graus como o melhor método de processamento na origem. Os resultados são mostrados na Tabela 3.
