Efeito da hipotermia terapêutica contra a lesão renal em um modelo de rato de parada cardíaca asfixia: Α foco na taxa de sobrevivência, fisiopatologia e enzimas antioxidantes
Mar 25, 2022
SO EUN KIM1*, HA-YOUNG SHIN2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2, ET AL
Abstrato.
Embora a disfunção de múltiplos órgãos esteja associada à taxa de sobrevida após parada cardíaca (ca), a maioria dos estudos até o momento se concentrou em corações e cérebros, e poucos estudos consideraram a insuficiência renal. O objetivo do presente estudo, portanto, foi examinar os efeitos da hipotermia terapêutica na taxa de sobrevivência, fisiopatologia e enzimas antioxidantes em rins de ratos após AC asfixia. Os ratos foram sacrificados um dia após a AC. A taxa de sobrevivência, que foi estimada pela análise de Kaplan-Meier, foi de 42,9 por cento um dia após ca. No entanto, a hipotermia, que foi induzida após ca, aumentou significativamente a taxa de sobrevivência (71,4 por cento). em ratos normotermia com ca, o nível sérico de nitrogênio ureico no sangue foi significativamente aumentado um dia pós-ca. além disso, o nível de creatinina sérica aumentou significativamente um dia após a AC. No entanto, em ratos CA expostos à hipotermia, os níveis de nitrogênio ureico e creatinina diminuíram significativamente após ca. A coloração histoquímica revelou um aumento temporal significativo na lesão renal após o grupo normotermia ter sido submetido a ca. No entanto, a lesão renal foi significativamente diminuída no grupo hipotermia. a análise imuno-histoquímica do rim revelou uma diminuição significativa das enzimas antioxidantes (superóxido dismutase de cobre-zinco, superóxido dismutase de manganês, glutationa peroxidase e catalase) com o tempo no grupo normotermia. No entanto, no grupo hipotermia, essas enzimas foram significativamente elevadas após ca. coletivamente, os resultados revelaram que a disfunção renal após asfixia pode estar fortemente associada à taxa de sobrevida precoce, e a hipotermia terapêutica reduziu a lesão renal por meio de mecanismos antioxidantes eficazes.
Palavras-chave: parada cardíaca asfixia, síndrome pós-parada cardíaca, tratamento de hipotermia, rim, histopatologia, enzimas antioxidantes
Contato:joanna.jia@wecistanche.com
ervas do império perdido cistancheimpededoenca renal, clique aqui para obter a amostra
Introdução
A parada cardíaca (ca), também conhecida como parada cardiorrespiratória ou parada circulatória, envolve uma interrupção repentina da circulação sanguínea normal devido à falha do coração em bombear o sangue adequadamente (1). ca induzir isquemia de corpo inteiro, que causa danos a vários órgãos, incluindo o cérebro, coração, rins e fígado. A maioria das pesquisas envolvendo ca ao longo do último meio século se concentrou em melhorar a taxa de retorno bem-sucedido da circulação espontânea (roSc), com progressos significativos (2-4). Embora a ressuscitação imediata possa melhorar a roSc, a taxa de sobrevida com prognóstico ruim é uma preocupação (5-7). A síndrome pós-parada cardíaca (PcaS) refere-se às consequências fisiopatológicas da roSc após ressuscitação cardiopulmonar bem-sucedida (cPr) após ca (8). PcaS é a principal causa de diminuição da sobrevida após roSc (9). A taxa de sobrevivência de PcaS no período inicial em pacientes é de apenas 30 por cento (5). Não há dúvida de que o coração e o cérebro são órgãos importantes na PcaS. Enquanto isso, os estudos raramente investigaram a insuficiência renal após ca (1,10,11). A função renal prejudicada transitória é comum em pacientes que sobrevivem ca (12). A incidência e o impacto da disfunção renal após ca não são bem descritos (13). além disso, nosso estudo anterior sugeriu que a baixa taxa de sobrevida precoce após roSc em estudos experimentais (14) pode estar fortemente relacionada à insuficiência renal, como lesão renal aguda. uma das causas mais comuns de lesão renal aguda é ca (15). a lesão renal aguda é uma PcaS comum que se desenvolve em ~30% dos pacientes hospitalizados com ca (16).
As espécies reativas de oxigênio (roS) são compostas por uma série de intermediários de oxigênio, incluindo o ânion superóxido radical livre (o2•‑), o peróxido de hidrogênio não radical (H2o2), o radical livre hidroxila altamente reativo (OH•), peroxinitrito (onoo ) , e oxigênio singlete (1o2) (17). Os roS demonstraram desempenhar um papel essencial em várias condições renais experimentais, como insuficiência renal isquêmica aguda, rejeição de enxerto renal, glomerulonefrite aguda e doenças renais tóxicas (18). Há evidências significativas que apoiam a síntese de roS imediatamente após acidente vascular cerebral isquêmico agudo (19) e infarto agudo do miocárdio (20). roS são conhecidos por serem importantes em doenças isquêmicas, como acidente vascular cerebral e infarto do miocárdio. Por exemplo, Hackenhaar et al (21) relataram que roS são gerados no sangue de pacientes com PcaS; no entanto, estudos raramente investigaram a formação de roS no rim após ca durante o período pós-PcaS inicial (22,23).
Por esta razão, foi levantada a hipótese de que os roS são importantes na lesão renal após ca e contribuem para a baixa taxa de sobrevivência nos estágios iniciais da PcaS. Para examinar esta hipótese, ca asfixia foi induzida em ratos e a taxa de sobrevivência durante os estágios iniciais de PcaS foi observada. além disso, foi realizada hipotermia imediata e tardia para aumentar a baixa taxa de sobrevida associada à PcaS após roSc. Além disso, a disfunção renal foi analisada histopatologicamente e as alterações induzidas pela roS, como superóxido dismutase de cobre-zinco (Sod‑1), superóxido dismutase de manganês (Sod‑2), catalase (caT) e glutationa peroxidase (GPX) foram avaliadas via análise imuno-histoquímica seguindo roSc.
cistache pharma especial
Materiais e métodos
Animais e grupos experimentais.Um total de 62 ratos machos Sprague-Dawley (Sd) (peso, 270-300 g; idade, 10 semanas) foram obtidos do centro experimental de animais da Universidade Nacional de Jeonbuk (iksan, República da Coreia). Eles foram alojados a uma temperatura de 23±2˚C e umidade de 60±10% sob um ciclo claro/escuro de 12 horas. Eles foram fornecidos com acesso gratuito a comida e água. todos os protocolos experimentais foram aprovados com base em procedimentos éticos e cuidados científicos pelo comitê institucional de cuidados e uso de animais da universidade nacional de Jeonbuk (aprovação nº JBnu 2020-084).
Os animais experimentais foram estratificados em três categorias [um grupo de operação simulada, ca sob normotermia e tratamento ca e hipotermia (HT)] da seguinte forma: i) grupo I, um grupo simulado (n=5) foi mantido sob condições de normotermia sem ca; ii) grupo ii, um grupo normotermia sem tratamento de hipotermia (33˚C) após AC (n=17); e iii) grupo iii (n=40), grupo submetido a ca sob normotermia e tratado com HT após ca por 2 h (n=17), 4 h (n=13) e 6 h (n=10) após roSc, onde todos os ratos foram reaquecidos até normotermia.
Indução de CA e RCP.Ca e cPr foram realizados conforme descrito anteriormente (24,25) com pequenas modificações (Fig. 1). Resumidamente, os ratos foram anestesiados com 2-3 por cento de isoflurano e ventilados mecanicamente para manter a respiração usando um ventilador para roedores (aparelho de Harvard). Para monitorar a saturação periférica de oxigênio (Spo2), uma sonda de saturação de oxigênio de oximetria de pulso (Nonin Medical, inc.) foi acoplada ao pé esquerdo. A temperatura corporal foi mantida em 37±0,5˚C durante e após a cirurgia ca. Para monitorar as alterações do eletrocardiograma (ECG), sondas eletrocardiográficas (cytiva) foram colocadas nos membros para fornecer dados de três derivações, que foram monitorados continuamente. A artéria femoral esquerda e a veia femoral direita foram canuladas separadamente para monitorar a pressão arterial média (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) e injeção intravenosa.
Após um período de estabilização de 5 minutos, brometo de vecurônio (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) foi administrado por via intravenosa, a anestesia foi interrompida e a ventilação mecânica foi retirada. um MaP abaixo de 25 mm-Hg e subsequente atividade elétrica sem pulso foi usado para definir CA (25,26). CA foi confirmado em 3-4 min após a injeção de brometo de vecurônio. 5 min após ca, cPr foi iniciado pela administração intravenosa de uma injeção de epinefrina em bolus (0,005 mg/kg; Sigma‑Aldrich;
Merck KGaa) e bicarbonato de sódio (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) seguido de ventilação mecânica com oxigênio a 100% e compressões torácicas manuais a uma taxa de 300/min até que o MaP atingisse 60 mm‑Hg e a atividade eletrocardiográfica fosse observada . uma vez que o animal estava hemodinamicamente estável e respirando espontaneamente (geralmente 1 h após roSc), os cateteres foram removidos e o animal foi extubado.
Gerenciamento de temperatura entre os grupos.A temperatura corporal do grupo normotermia foi mantida em 37±0,5˚C durante e após a cirurgia de CA e mantida até que os ratos fossem sacrificados de acordo com o cronograma. no grupo hipotermia, ca foi estabelecido em temperatura normal; em seguida, a temperatura corporal foi mantida com bolsas de gelo e ventiladores a 33±0,5˚C imediatamente após a RCP por 2, 4 e 6 h, e foram reaquecidos rapidamente com a almofada de aquecimento até a temperatura desejada ( 37±0.5˚C). Os ratos foram então devolvidos às suas gaiolas até serem sacrificados um dia após CPR/roSc. A temperatura corporal foi monitorada usando um sensor de temperatura retal (27).
Análise bioquímica do soro.A injeção intraperitoneal de 30 mg/kg de pentobarbital sódico (JW Pharm co., ltd.) foi usada para anestesiar todos os animais. O sangue foi coletado das veias abdominais de cada animal em cada grupo. O soro foi coletado por centrifugação do sangue (2.774 xg, 15 min, 4˚C) e foi preservado a -80˚C até a análise. Os níveis de nitrogênio ureico no sangue (Bun) e creatinina no soro foram determinados de acordo com métodos descritos pela Federação Internacional de Química Clínica (28) usando um analisador químico automatizado Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). todos os ensaios foram conduzidos em triplicado usando o soro fresco.
Processamento de tecidos.Os ratos foram profundamente anestesiados por uma injeção intraperitoneal de 200 mg/kg de pentobarbital sódico (JW Pharm co., ltd.), e foram perfundidos transcardialmente com 0.1 M de solução salina tamponada com fosfato (PBS; pH 7,4), seguida por 4% de paraformaldeído em 0,1 M de tampão fosfato (PB; pH 7,4). Os rins foram isolados de cada animal e fixados com 4% de paraformaldeído em 0,1 M PB (pH 7,4) à temperatura ambiente durante 1 semana, depois fatiados sagitalmente, incluídos em parafina e seccionados (6 µm).
Hematoxilina e eosina (H&E), ácido periódico de Schiff (PAS) e coloração tricrômica de Masson.A coloração de H&e foi realizada para examinar as alterações patológicas nos rins de acordo com um procedimento descrito anteriormente (29). A coloração PaS foi realizada para examinar as alterações nos glomérulos de acordo com os procedimentos descritos anteriormente (30-32). O método de coloração tricrômica de Masson foi usado para definir lesão tubular, considerando dilatação tubular, atrofia tubular, formação de cilindro tubular, vacuolização, degeneração, fibrose intersticial e descamação de células epiteliais tubulares ou espessamento da membrana basal tubular de acordo com procedimentos previamente descritos (33). ,34).
um total de 2 patologistas experientes avaliaram as alterações histopatológicas de forma duplo-cega. imagens de 10 seções coradas/rato foram capturadas em ampliações de x400 usando um microscópio de luz Leica dM 2500 (Leica Microsystems GmbH). Um total de 10 campos foram analisados em cada seção. A análise histopatológica das lesões renais foi realizada de acordo com os procedimentos descritos anteriormente (35,36). Resumidamente, as lesões foram categorizadas como lesões microscópicas sem significância (nSMl), lesões mínimas, leves, moderadas ou marcadas, respectivamente, graduadas pela seguinte escala com o teste cego: normal, 0 pontos;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
As lesões glomerulares foram definidas pela perda de elementos celulares, colapso da luz capilar, material hialino amorfo com ou sem aderências à cápsula de Bowman (30-32) e pontuadas pelas seguintes escalas numéricas: sem dano, { {7}} pontos; muito leve, 1 ponto; leve, 2 pontos; moderado, 3 pontos; e grave, 4 pontos. A lesão tubular foi pontuada pelo seguinte sistema de pontuação: sem lesão tubular, 0 pontos; 1-9 por cento dos túbulos lesionados, 1 ponto; 10-25 por cento dos túbulos lesionados, 2 pontos; 26-50 por cento dos túbulos lesionados, 3 pontos; 51-75 por cento dos túbulos lesionados, 4 pontos; e pelo menos 76 por cento dos túbulos lesionados, 5 pontos (33,34).
Malondialdeído (MDA).A concentração de Mda no córtex renal foi avaliada de acordo com um protocolo previamente descrito (23,37,38). em resumo, a homogeneização e centrifugação dos tecidos renais foram realizadas a 8.832 xg por 10 min a 4°C, e o sobrenadante foi coletado e armazenado a -80°C para análise de MDA. O teor de MDA foi determinado de acordo com as instruções do kit de ensaio TBarS (cat. n.º 10009055; empresa química cayman).
Imuno-histoquímica (IHC) para enzimas antioxidantes. A iHc foi realizada com Sod‑1, Sod‑2, caT e GPX para estudar as alterações nas imunorreatividades antioxidantes no rim. A iHc foi realizada de acordo com nosso método descrito anteriormente (22). Em resumo, as seções (6 µm) foram incubadas com anti-Sod1 de cabra primário (1:500; cat. n.º SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), anti-Sod2 de cabra (1:1 ( 1:1,000; cat. no. ab22604; Abcam) durante a noite a 4˚C, seguido pelo anti-coelho conjugado biotinilado (1:250; cat. no. Ba-1000-1.5; Laboratórios de vetores , inc.) e os anticorpos secundários anti-cabra conjugados biotinilados (1:250; cat. nº Ba-5000-1,5; Vector Laboratories, Inc.) por 2 h a 24°C e desenvolvidos usando Vectastain aBc (Vector Laboratory , Inc.). Em seguida, foram visualizados com solução de 3,3'-diaminobenzidina (em tampão Tris-HCl 0,1 M).
O microscópio Leica dM 2500 foi usado para criar imagens das seções com uma ampliação de x400. Um total de 10 seções/ratos foram selecionados e 10 áreas foram capturadas. O software de análise de limiar de imagem versão 1.52a (Instituto Nacional de Saúde) foi usado para medir a porcentagem ( por cento ) de densidade óptica relativa (haste).
Análise estatística.Todas as experiências foram repetidas em triplicado. Graph Pad Prism versão 5.0 (GraphPad Software, inc.) foi usado para analisar os dados, que foram expressos como média ± erro padrão dos valores médios (SeM). A sobrevivência foi analisada por meio da estatística de Kaplan‑Meier e do teste log‑rank. MaP e oxigênio periférico foram comparados usando medidas repetidas de análise de variância de uma e duas vias para avaliar o efeito do tempo. Para determinar a significância das diferenças, análises post hoc foram conduzidas usando o teste de Tukey para todas as comparações múltiplas aos pares. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Resultados
Alterações fisiológicas, taxa de sobrevivência e variáveis bioquímicas séricas. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos em relação às características basais, incluindo peso corporal, MaP e Spo2 (Tabela ie Fig. 2). A indução de ca ocorreu 3-4 min após a injeção intravenosa de brometo de vecurônio (2 mg/kg). CA foi confirmada com um ecG isoelétrico, Spo2 e MaP, e estes mudaram conforme o esperado de acordo com o protocolo experimental (Fig. 2a-c). conforme revelado na Fig. 2d, a temperatura corporal foi diferente entre todos os grupos após roSc, conforme revelado na Fig. 3, a taxa de sobrevivência de cada grupo foi avaliada em um dia pós-ca. A taxa do Grupo II foi de 42,9%.
No grupo iii, a taxa após 2 h-HT foi de 42,9%, a taxa após 4 h-HT foi de 57,1% e a taxa após 6 h-HT foi de 71,4%. neste experimento, não houve diferença entre os ratos do Grupo ii e os ratos com 2 h-HT no Grupo iii.
conforme demonstrado na Fig. 4B, o nível sérico de Bun no Grupo i foi de 13,8 mg/dl um dia pós-ca. no grupo ii, o nível de Bun aumentou significativamente para 35,3 mg/dl. no Grupo iii, o nível de Pão foi de 3{{10}},7 mg/dl após 2 h-HT, 25,0 mg/dl após 4 h-HT e 22,7 mg/ dl após 6 h-HT. além disso, conforme revelado na Fig. 4c, o nível de creatinina sérica no Grupo I foi de {{20}},23 mg/dl. no grupo ii, o nível de creatinina foi significativamente aumentado para 0,43 mg/dl. no grupo iii, os níveis de creatinina foram inferiores aos observados no grupo ii: 0,39 mg/dl após 2 h-HT, 0,37 mg/dl após 4 h-HT e 0,36 mg/dl após 6 h-HT.
Achados histopatológicos. no Grupo I (sham), estruturas histológicas intactas foram reveladas por H&e, PaS e coloração com tricrômio de Masson (Fig. 5A). A fibrose intersticial não foi detectada em todos os grupos, entretanto, no Grupo ii, a histopatologia renal induzida por ca foi examinada um dia após roSc usando coloração H&e, PaS e tricrômio de Masson. A lesão renal grave induzida por CA aumentou significativamente nos túbulos proximais e glomérulos; particularmente, as bordas em escova das células epiteliais tubulares renais estavam seriamente erodidas (Fig. 5a e B). além disso, neste grupo, os capilares glomerulares estavam dilatados com células inflamatórias, e o edema intersticial e a necrose tubular renal aguda eram graves em comparação com os observados no Grupo I (fig. 5a).
no Grupo iii, a lesão renal foi atenuada um dia após roSc (Fig. 5a e B). em particular, a lesão induzida por ca nos túbulos proximais foi significativamente diminuída após 6 h-HT em comparação com a observada no Grupo ii. além disso, a expansão local dos túbulos proximais foi diminuída em comparação com a revelada no Grupo ii (Fig. 5A). Para os glomérulos, 6 h-HT atenuou significativamente a lesão glomerular em comparação com o revelado no Grupo ii (Fig. 5a e B).
nível MDA. conforme revelado na Fig. 4a, o nível de Mda no córtex renal foi significativamente aumentado em um dia após ca no Grupo ii em comparação com o Grupo i. No entanto, no Grupo III, o nível de MDA foi significativamente diminuído após 4 h e 6 h-HT. também foi diminuído no 2 h‑HT, mas não houve diferença estatisticamente significativa em relação ao Grupo ii.
Achados de imunorreatividade de enzimas antioxidantes.
No Grupo I, foram avaliadas as imunorreatividades normais de Sod‑1, Sod‑2, GPX e caT, revelando que estavam localizadas principalmente nos túbulos (Fig. 6a). no Grupo ii, as imunorreatividades de Sod‑1, Sod‑2, GPX e CAT foram significativamente reduzidas em um dia após roSc em comparação com aquelas reveladas no Grupo i (Fig. 6a e B).
no Grupo iii, as imunorreatividades de Sod-1, Sod-2, GPX e caT após 2 h-HT não foram significativamente diferentes daquelas observadas no Grupo ii (Fig. 6a e B). no caso de 4 h‑HT, as quatro imunorreatividades foram significativamente maiores do que as reveladas no Grupo ii (Fig. 6a e B), demonstrando que, em particular, a imunorreatividade GPX foi significativamente maior em comparação com as outras imunorreatividades. no caso de 6 h-HT, todas as imunorreatividades foram maiores do que as identificadas nos ratos que receberam 4 h-HT, revelando que o bastonete de cada imunorreatividade Sod‑1, Sod‑2, GPX e caT foi de 78,4, 67,4, 86,5 e 79,5 por cento, respectivamente, em comparação com o Grupo i (Fig. 6a e B).
Herba Epimedium Sagittatum
Discussão
Em estudos com animais, o coração e o cérebro são os órgãos mais afetados após lesão de isquemia/reperfusão (i/r) após ca (39,40). no entanto, alguns estudos relataram que a lesão renal aguda tem impacto na recuperação neurológica (41,42). Portanto, é importante investigar lesão renal aguda após ca e cPr. no presente estudo, ratos Sd machos adultos foram usados para asfixia ca por injeção de brometo de vecurônio. A CA foi confirmada 3-4 min após a indução da asfixia e a cPr foi realizada 5 min após ca. MaP, ecG e Spo2foram alterados conforme esperado durante ca e após roSc. em nosso estudo, a taxa de sobrevivência no Grupo iii foi de 42,9 por cento um dia após roSc em ratos expostos a 2 h-HT, 57,1 por cento em ratos tratados com 4 h-HT e 71,4 por cento em ratos submetidos a 6 h-HT. che et al (26) relataram que a taxa de sobrevivência foi de 40 por cento dois dias após roSc em um modelo de rato de asfixia ca. além disso, Wang et al (43) relataram que em ratos, a combinação de hipotermia e levosimendan (um sensibilizador de cálcio e abridor de canais de potássio) após roSc aumentou significativamente a sobrevida. Com base nesses achados, a HT em ratos com ca pode aumentar a taxa de sobrevivência alguns dias após o roSc. No entanto, em humanos, HT após ca dificilmente aumenta a taxa de sobrevivência após roSc (44).
disfunção renal foi relatada em 12-28 por cento dos pacientes com ca após ressuscitação bem sucedida (13). além disso, a lesão renal aguda se desenvolveu em 43% dos pacientes ressuscitados após ca, e mais de 75% desses episódios ocorreram dentro de três dias após ca (45). em modelos animais, a lesão renal aguda induzida por i/R (ou seja, ROSC após CA) foi significativamente atenuada por HT (43,46,47). Por exemplo, Tissier et al (47) relataram atenuação significativa de lesões renais por HT em um modelo de coelho de ca, baseado em histopatologia e microscopia eletrônica, em comparação com o grupo controle. em nosso estudo, os escores histopatológicos de lesão glomerular e tubular dos rins no Grupo ii foram aparentemente aumentados um dia após roSc. neste grupo, os níveis séricos de Bun e creatinina foram significativamente aumentados após ROSC quando comparados com o grupo sham (Grupo i). Esses resultados foram semelhantes aos de estudos anteriores envolvendo modelos de ca canino, coelho e leitão (47-49). Assim, a lesão renal foi severamente aumentada na fase inicial após ca em animais experimentais. em nosso estudo, as lesões glomerulares e tubulares renais e os escores histopatológicos no Grupo iii foram significativamente reduzidos após 4 h e 6 h-HT um dia após roSc em comparação com o Grupo ii. Ribeiro et al (46) e Souza et al (50) relataram que a TH foi eficaz em modelos animais de lesão de i/r renal. Islam et al (23) e Jawad et al (22) determinaram que a TH reduziu a gravidade da lesão renal e aumentou a taxa de sobrevida em um modelo de ca asfixia. Os achados sugeriram que a TH tem um efeito protetor renal significativo, que foi associado a um aumento da taxa de sobrevida.
Enzimas antioxidantes endógenas incluem principalmente Sods, CAT e GPX. Essas enzimas fornecem uma primeira linha de defesa contra o2•‑ e OH•. SOD-1 e SOD-2 fornecem uma defesa contra o estresse oxidativo catalisando a dismutação de o2•‑ em o2 e H2o2 (51). o estresse oxidativo é um fator crucial na lesão de órgãos e disfunção hemodinâmica durante PcaS e na geração de roS durante a lesão i/r. A atividade das enzimas antioxidantes é alterada pela lesão i/r após ca (21). nosso estudo revelou que os níveis de Sod‑1, Sod‑2, GPX e caT diminuíram após roSc no Grupo ii em comparação com o Grupo i. Os níveis dessas enzimas antioxidantes são reduzidos após i/r, o que causa danos e morte celular devido ao consumo de antioxidantes endógenos como resultado da liberação de roS (52).
Xia et al (53) relataram atividade antioxidante aumentada em tecidos renais de camundongos expostos a HT em lesão de i/r renal. Hackenhaar et al (21) observaram um aumento significativo na atividade de Sod‑1, Sod‑2, GPX e caT após 6, 12, 36 e 72 horas de HT em humanos após roSc. em estudos anteriores usando um modelo de rato de ca asfixia, Islam et al (23) relataram que HT após ca reduz o estresse oxidativo no rim, e Jawad et al (22) relataram que HT após ca protege o rim contra lesão induzida por ca, demonstrando que nrf2/Ho-1 estava aumentado no rim. em nosso estudo, as imunorreatividades de Sod‑1, Sod‑2, GPX e caT foram significativamente aumentadas após 4 h‑HT e 6 h‑HT no Grupo iii quando comparadas com o Grupo ii, sugerindo que a HT ativou enzimas antioxidantes e reduziu o estresse oxidativo.
Com base na sobrevida, histopatologia, resultados bioquímicos e imuno-histoquímicos deste estudo, foi determinado que a disfunção renal é comum e associada à mortalidade nos estágios iniciais de SPC após roSc, em nosso modelo de rato de asfixia ca. No entanto, 4 h ou 6 h-HT após ROSC reduziu significativamente a lesão renal, sugerindo que a HT induz a ativação de enzimas antioxidantes, como Sod‑1, Sod‑2, GPX e caT, resultando em redução do estresse oxidativo nos rins. como resultado, levantou-se a hipótese de que a TH reduz a lesão renal por um mecanismo antioxidante e aumenta a taxa de sobrevida precoce. No entanto, a análise de western blot é necessária para elucidar o mecanismo de lesão renal e HT em ca após roSc. Esta é uma potencial limitação do presente estudo e ressalta a necessidade de mais estudos.
miricetina
1 departamento de medicina de emergência, um instituto de pesquisa de medicina clínica da universidade nacional de Jeonbuk, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;
2faculdade de Medicina Veterinária e Instituto de Pesquisa em Biossegurança, Universidade Nacional de Jeonbuk, San, Jeollabuk-do 54596;
3departamento de Ciências Biomédicas e instituto de pesquisa em Biociência e Biotecnologia, Hallym University, chuncheon, Gangwon‑do 24252;
4Departamento de Cirurgia, Hospital Universitário Nacional de Kangwon,
Escola de Medicina, Universidade Nacional de Kangwon, chuncheon, Gangwon‑do 24289; 5Departamento de Neurobiologia, Escola de Medicina, Universidade Nacional de Kangwon, Chuncheon, Gangwon‑do 24341, República da Coreia
Agradecimentos
não aplicável.
Financiamento
O presente estudo foi apoiado pelo Programa de Pesquisa Científica Básica por meio da Fundação Nacional de Pesquisa da Coréia, financiada pelo Ministério da Educação (concessão nos. nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 e nrF-2021r1F1a1059992).
Disponibilidade de dados e materiais
Os conjuntos de dados usados e/ou analisados durante o estudo atual estão disponíveis com o autor correspondente mediante solicitação razoável.
Contribuições dos autores
SeK, HYS, MHW e HJT foram responsáveis pelo desenho experimental, aquisição de dados, análise de dados e redação do manuscrito. eYl, YJY, rHK, JHc e TKl realizaram os experimentos e a análise dos dados. dca, BYP, JcY, SKH e iSK realizaram a análise dos dados e fizeram comentários críticos sobre todo o processo do estudo. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final. HYS e HJT confirmam a autenticidade de todos os dados brutos.
Aprovação ética e consentimento para participar
todos os protocolos experimentais foram aprovados com base em procedimentos éticos e cuidados científicos pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da universidade nacional de Jeonbuk (aprovação nº JBnu 2020-084; Jeonju, Coréia do Sul).
Consentimento do paciente para publicação
não aplicável.
Interesses competitivos
Os autores declaram não ter interesses conflitantes.
Referências
1. Girotra S, chan PS e Bradley SM: Cuidados pós-ressuscitação após parada cardíaca extra-hospitalar e intra-hospitalar. Coração 101: 1943-1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS e Cha KC: Intervalo de desfibrilação mais curto promove resultados de desfibrilação e ressuscitação bem-sucedidos. ressuscitação 143: 100-105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a e Papadimitriou l: A albumina modificada pela isquemia prevê o resultado da ressuscitação cardiopulmonar: um estudo experimental. reanimação 81: 591-595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se e Angelos MG: necessidade de oxigênio durante a ressuscitação cardiopulmonar (cPr) para efetuar o retorno da circulação espontânea. reanimação 80: 951-955, 2009.
5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a e carrillo Á; Rede de estudos iberoamericana de parada cardíaca pediátrica riBePci: Fatores pós-retorno de circulação espontânea associados à mortalidade em parada cardíaca pediátrica intra-hospitalar: um estudo observacional multicêntrico multicêntrico prospectivo. cuidados críticos 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, tornam-se S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F e cariou a: Síndrome de parada postal: Da ressuscitação imediata ao resultado a longo prazo. ann terapia intensiva 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, et al: Síndrome pós-parada cardíaca: epidemiologia, fisiopatologia, tratamento e prognóstico. uma declaração de consenso do comitê de ligação internacional sobre ressuscitação (American Heart Association, conselho australiano e neozelandês de ressuscitação, conselho europeu de ressuscitação, Heart and Stroke Foundation of Canada, Interamerican Heart Foundation, resuscitation Council of Asia e o resuscitation Council of Southern Africa ); o comitê de cuidados cardiovasculares de emergência da American Heart Association; o conselho de cirurgia cardiovascular e anestesia; o conselho de cuidados cardiopulmonares, perioperatórios e intensivos; o conselho de cardiologia clínica; e o Conselho de AVC. circulação 118: 2452-2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, et al: Síndrome pós-parada cardíaca: epidemiologia, fisiopatologia, tratamento e prognóstico. Uma Declaração Científica do Comitê de Ligação Internacional sobre ressuscitação; o comitê de cuidados cardiovasculares de emergência da American Heart Association; o conselho de cirurgia cardiovascular e anestesia; o conselho de cuidados cardiopulmonares, perioperatórios e intensivos; o conselho de cardiologia clínica; o conselho de AVC. reanimação 79: 350-79, 2008. DOI: 10.1016/j.reanimação.2008.09.017
9. Jentzer Jc, mudança Md e dezfulian c: Disfunção miocárdica e choque após parada cardíaca. Res. BioMed 2015: 314796, 2015.
10. Madl ce Holzer M: Função cerebral após ressuscitação de parada cardíaca. curropin crit care 10: 213-217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je e Trzeciak S: Disfunção de múltiplos órgãos após o retorno da circulação espontânea na síndrome de parada cardíaca. crit care Med 41: 1492-1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder‑Plassmann G, Sterz F, Holzer M, perdedores H, laggier an e Müllner M: O efeito da hipotermia terapêutica leve na função renal após ressuscitação cardiopulmonar em homens. ressuscitação 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW e Rittenberg Jc; Serviço pós-parada cardíaca: disfunção renal é comum após ressuscitação de parada cardíaca fora do hospital. reanimação 84: 1371-1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: alterações na histopatologia e níveis de fator de necrose tumoral no coração de ratos após parada cardíaca asfixia. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tani, Bouman c, Macedo e, et ai; Iniciando e terminando os investigadores da Terapia de Suporte para o Rim (BeST Kidney): insuficiência renal aguda em pacientes críticos: um estudo multinacional e multicêntrico. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J e Singhal Pc: Prevalência e determinantes de insuficiência renal aguda após ressuscitação cardiopulmonar. arch estagiário Med 153: 235-239, 1993.
17. Sachse a e Wolf G: espécies reativas de oxigênio induzidas pela angiotensina ii e o rim. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.
18. Baud le ardaillou r: espécies reativas de oxigênio: Produção e papel no rim. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.
19. rodrigo r , Fernández‑Gajardo r , Gutiérrez r , Matamala JM, carrasco r , Miranda‑Merchak ae Feuerhake W: estresse oxidativo e fisiopatologia do acidente vascular cerebral isquêmico: novas oportunidades terapêuticas. CNS Neurol Disord Drug Targets 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fátima n e Moin S: dano elevado ao dna, estresse oxidativo e sistema de defesa de resposta prejudicado infligido em pacientes com infarto do miocárdio. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.
