Contato: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 , 〔DU Nian-sheng

(1. Hospital de Tumor afiliado, Universidade Médica de Xinjiang, Urumqi 830011, China; 2. Faculdade de Farmácia, Universidade Médica de Xinjiang, Urumqi 830054, China)

Abstrair:Objetivo: Estudar as relações estrutura-atividade de feniletanoides glicosides em plantas de salsa cistanche sobre atividade antioxidativa. Métodos: Pelos sistemas de ensaio de DPPH •, a atividade antioxidante de seis glícrodo feniletanoides de plantas deCistanchesalsa foi determinada a investigar a relação entre as atividades antioxidantes e fenilethanoide glicosides zs características estruturais. Resultados: A atividade antioxidativa dos gllicosides fenilotanoides foi variante com efeito dependente de dose. A sequência da força da atividade antioxidativa dos seis componentes mostrou-se ser2 ^Acetylacteoside > Acteoside Tubuloside BN Isoacteoside > Echinacoside > Cistanoside A. Conclusão: A atividade antioxidativa dos glicosídeos feniletanoides está relacionada ao número de hidroxilis fenólicos, obstáculos estericos, 2 acetil na colacopyranose média e a localização de hidroxil fenólico. Além disso, pode estar relacionado com a cetona j3 insaturada de fenol-2-propenyl.

Palavras-chave: C. A. Mey. G, Beck; Fenilethanoid glicídeos; Atividade antioxidativa; Estrutura-atividade; DPPH

Echinacoside

A medicina tradicional chinesaCistancheé cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, um caule carnudo seco com escamas e folhas. Foi publicado pela primeira vez no "Shen Nong's Materia Medica". A frequência de ocorrência é a mais alta, perdendo apenas para ginseng em prescrições de medicamentos chineses anti-envelhecimento e anti-envelhecimento, e tem a reputação de "ginseng do deserto". Fenilethanoil glicídeos são componentes característicos deCistancheplantas de gênero. Atualmente, mais de 30 compostos desse tipo foram isolados deste gênero. Estudos farmacológicos basicamente deixaram claro que esses compostos são a principal base material paraCistancheexercer atividades farmacológicas).

Dibenzopicryl radical (DPPH •) é um radical livre relativamente estável com um elétron livre em seu N. A solução de metanol de DPPH-é roxo com um pico máximo de absorção de 517nm. Quando há um carniceiro radical livre, sua absorção gradualmente desaparece devido ao seu emparelhamento de um elétron. Seu grau de descoloração está quantitativamente relacionado com o número de elétrons que aceita. Portanto, o uso da espectrofotometria para detectar a alteração na absorção de DPPH após reação com a solução amostral pode ser usado para testar a capacidade da amostra de remover radicais livres e resistir à oxidação (3). Atualmente, há relatos sobre a pesquisa antioxidante dos gllicoídeos de álcool fenilo em purê de berinjela na limpeza de radicais livres, mas não há análise da relação estrutura-atividade entre suas propriedades antioxidantes e substâncias ativas. Neste artigo, o DPPH • método de análise radical livre é usado pela primeira vez para testar a atividade antioxidante de 6 monômeros glicos de álcool feniltil em Rouhuanrong. Com base nas características estruturais e nos resultados de determinação da atividade desses compostos, os componentes glicoside do álcool fenilo são inferidos preliminarmente. Relação estrutura-atividade da atividade antioxidante.

1 Aparelhos e materiais

Echinacoside, cistanche glicoside A,verbascoside, isoverbasin glycoside, 2,-acetyl verbascoside, substância de referência antocianinina B (isolada e preparada a partir de salsa Cistanche, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr dados de acordos com o valor da literatura, o conteúdo é determinado pelo método de normalização da área hplc, a pureza é maior que 95%, a fórmula estrutural é mostrada na Figura 1 e Tabela 1); Diphenyl picryl radical (DPPH •) foi comprado da Sigma; outros reagentes Todos eles são domesticamente puros.

Detector de atividades biológicas de comprimento de onda total SpectraMaxMax M5 (Anthos Co. Austria), placa de cultura de 96 poços (Costar), ab104-N equilíbrio eletrônico]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Figura 1 As fórmulas estruturais de seis glicos de fenotanoil em Cistanche

Tabela 1 Substituientes em 6 compostos de phenethanol glicoside em Cistanche

Nota: Ac é acetil, Cf é trans-cafeína, Glc * p-D-gluviolanose, e Rha é a-L-rhamnose

2 Preparação da solução de teste

DPPH • Prepare uma solução de estoque com concentração de 1. 3 x 10'2mol/L com etanol, armazene-o no refrigerador, dilua a solução de estoque com etanol para 1-3 xl0^mol/L imediatamente antes do uso; 6 tipos de glicosides de álcool fenilo Etil A substância de referência e a vitamina C são formuladas em uma solução com concentração de 0,05-50,0 ptg/mL com etanol.

Acteoside

3 métodos e resultados

3. 1 Método Primeiro adicione 10 |xL de amostra aos poços de amostra, adicione 10|jlL de etanol aos poços em branco e, em seguida, adicione 190 jiL de DPPH • com uma concentração de 1,3 xlO^mol/L, e coloque-os no escuro à temperatura ambiente por 30 minutos. Use o detector de atividade biológica de comprimento de onda total SpectraMax M5 para medir a absorvância (A) a 517 nm. Cada absorvência foi medida 3 vezes em paralelo, e o valor médio foi tomado. A taxa de liberação é calculada da seguinte forma: taxa de liberação (%) = (Amostra em branco-A)/A em branco x 100%

3.2 Resultados Os resultados da apuração estão na Tabela 2. Pode-se ver a partir da Tabela 2 que os seis glicócitas de álcool feniltil em diferentes concentrações têm diferentes graus de efeitos de limpeza em DPPH •, e sua capacidade de limpeza radical livre tem uma relação significativa de efeito de dose com a concentração. Glycoside em DP PH • O tamanho do efeito de limpeza aumenta com o aumento da concentração.

Tabela 2 A taxa de desembaraço das amostras com diferentes concentrações em DPPH • («=3)

Nota: O controle positivo é ácido ascórbico (Vitamina C), o número da amostra é 7

De acordo com o IC5 de cada amostra. De acordo com o valor, a capacidade de limpeza de 6 tipos de glicosídeos feniletanoides em DPPH • está em ordem: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside> cistanche glycoside A. Os efeitos dos seis glicóis de álcool fenilo na mesma concentração que o controle positivo Vitamina C são ligeiramente inferiores aos da Vitamina C.

verbascoside

4 Discussão

Os resultados deste estudo confirmaram ainda que os gllicos de álcool fenilo geralmente têm atividade antioxidante. Analisando e comparando suas estruturas químicas, verbascoside, iso-verbasin glycoside, 2'-acetil verbasin glycoside, e tubo anorthosite B são todos glicosídeos, enquanto echinacoside ecistancheA são triglicérides, com grande obstáculo estérico. O efeito de obstáculo esterico aumentado torna o echinacoside e o solanacoside difícil de abordar radicais livres, de modo que sua capacidade antioxidante é relativamente fraca; a diferença estrutural entre echinacoside e striata: echinacoside A é apenas O R5 do primeiro é um grupo hidroxil fenólico e o último é um grupo de metoxi. O grupo hidroxil o-fenólico é considerado um importante grupo funcional para a atividade antioxidante. O grupo de hidroxil difenol desaparece, e o efeito antioxidante é significativamente reduzido. Analisando a estrutura do composto e combinando os resultados da medição, é inferido que a atividade antioxidante dos glicólitos de fenilo na pasta de berinjela está relacionada ao número de aglycones e grupos hidroxil fenólicos no grupo fenilecriloyl, a posição de conexão do grupo hidroxila fenólica, o tamanho do obstáculo esterico do composto, e a glicose central 2 Há uma certa relação entre a substituição do grupo de acetil na posição, que também pode estar relacionada ao fragmento de estrutura de cetona a,/3 insaturada no grupo aciil de estireno, mas tem pouca relação com a posição de substituição do grupo fenilecriloyl.

DPPH • é um radical livre relativamente estável centrado em N, com forte absorção a 517nm. Após a adição da substância de teste, detectando a alteração na absorção a 517nm após a DPPH • radicais reagem com a solução amostral, a capacidade da amostra de catarver radicais livres e a antioxidante pode ser verificada. Experimentos mostram que o uso de DPPH • para estabelecer um modelo de dano radical livre in vitro não requer equipamentos complicados e reagentes caros. É simples e fácil de usar, sensível, confiável e reprodutível. É um bom método para triagem gratuita de catadores radicais.

A vitamina C é atualmente reconhecida como um antioxidante altamente ativo e amplamente utilizado. Portanto, este experimento escolheu a Vitamina C como um controle positivo para a capacidade antioxidante dos glicosídeos de álcool fenilo na limpeza de radicais livres.

Referências

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Pesquisa sobre os componentes químicos da Cistanche Research progresso[J]. Medicina fitoterápica chinesa, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Progresso na pesquisa sobre as atividades farmacológicas das plantas cistanche[J]. Medicina de Ervas Chinesas, 2003, 34(9): Anexado 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Um método simples para triagem gratuita de catadores radicais [J]. Medicina de Ervas Chinesas, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Determinação da atividade antioxidante de Chuanling, Rhodiola Rosea e Huang Zhi por espectrofotometria radical da pirataria difenil [J]. Journal of Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2) ): 114-117.