PARTE DOIS Glicosídeos de Feniletanol Protegem a Hipertrofia do Miocárdio Induzida pela Constrição da Aorta Abdominal Via ECE 1 Inibição da Desmetilação e Melhoria da Via PI3K PKB ENOS
Mar 06, 2022
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Em um estudo anterior, descobrimos que a desmetilação da ECE-1 funcionou na hipertensão e pode ter efeitos na produção de ET-1 [13]. Assim, nos perguntamos se os CPhGs(GLICÓSIDO FENILETANOILDO DE CISTANCHE)afetaria o nível de desmetilação de ECE-1. Conforme mostrado na Figura 7, em comparação com o grupo sham, o nível de metilação da ECE-1 no tecido miocárdico aumentou significativamente no grupo AAC. Ao mesmo tempo, foi reduzido significativamente nos grupos AC 125, 250 e 500 mg/kg em comparação com o grupo AAC. -e nível de desmetilação do gene ECE-1 no grupo AC 125 mg/kg foi significativamente maior do que no grupo AV; não houve diferença significativa no grupo AC 125 mg/kg, mas houve queda significativa no grupo AC 500 mg/kg quando comparado ao grupo AV.
3.7. CPhGs(FENILETANOILD GLYCOSIDE DE CISTANCHE)Diminuição da Expressão de ECE-1 no Tecido Miocárdico de Ratos após AAC.
Para entender melhor o efeito da metilação de ECE-1, detectamos a expressão de mRNA, proteína e imuno-histoquímica de ECE-1 no tecido miocárdico. Conforme mostrado na Figura 8, em comparação com o grupo sham, os níveis de expressão relativa de ECE-1 mRNA, os níveis de expressão relativa de proteína e a área média de imuno-histoquímica miocárdica foram significativamente reduzidos no grupo AAC. A Figura 8(c) revela que em comparação com o grupo AAC, os níveis de expressão relativa de ECE-1 mRNA foram reduzidos significativamente nos grupos AC 250 e 500 mg/kg; quando comparados ao grupo AV, foram significativamente maiores nos grupos AC 125 e 250 mg/kg, mas não foram significativamente diferentes no grupo AC 500 mg/kg. Enquanto isso, como pode ser visto nas Figuras 8(a) e 8(b), em comparação com o grupo AAC, os níveis de expressão relativa da proteína ECE{13}} foram significativamente diminuídos no grupo AC 250 e 500 mg/kg; no entanto, não foram significativamente diferentes no grupo AC 250 e 500 mg/kg em comparação com os do grupo AV. As Figuras 8(d) e 8(e) indicam que, em comparação com o grupo AAC, a área de expressão de ECE{20}} no tecido miocárdico de ratos foi significativamente reduzida no grupo AC 125, 250 e 500 mg/kg ; no entanto, em comparação com o grupo AV, foi significativamente maior nos grupos AC 125 e 250 mg/kg e não apresentou diferença significativa nos grupos AC 500 mg/kg.
3.8. CPhGs(FENILETANOILD GLYCOSIDE DE CISTANCHE)Reduziu o nível de Plasma ET-1 em Ratos após AAC.
Também medimos os níveis plasmáticos de ET-1 em ratos por ELISA, conforme mostrado na Figura 9, em comparação com o grupo simulado, os níveis plasmáticos de ET-1 no grupo AAC aumentaram significativamente. Enquanto isso, os níveis plasmáticos de ET-1 mostraram tendência ascendente no grupo AC 125 mg/kg, mas não indicaram diferença significativa nos grupos AC 250 e 500 mg/kg quando comparados aos do grupo AV. 3.9. CPhGs(FENILETANOILD GLYCOSIDE DE CISTANCHE)Aumento da expressão da via PI3K/PKB/eNOS em ratos após AAC. PI3K/PKB/eNOS é uma via importante no processo de hipertrofia miocárdica e tem uma importante conexão com ET-1 [14–16]. Portanto, detectamos ainda os níveis de expressão de proteínas da via PI3K/PKB/eNOS em tecido miocárdico de rato. Conforme mostrado na Figura 10, em comparação com o grupo sham, o valor relativoos níveis de expressão das proteínas p-PI3K, p-PKB e p-eNOS no grupo AAC foram reduzidos significativamente; no entanto, em comparação com o grupo AAC, os níveis de expressão relativa de p-PI3K aumentaram significativamente nos grupos AC 250 e 500 mg/kg. Ao mesmo tempo, os níveis de expressão relativa mostraram uma tendência descendente no grupo AC 125 mg/kg e não mostraram diferença significativa nos grupos AC 250 e 500 mg/kg em comparação com os do grupo AV. Conforme mostrado na Figura 10(b), em comparação com o grupo AAC, os níveis de expressão relativa de p-PKB aumentaram significativamente no grupo AC 250 e 500 mg/kg. Enquanto isso, eles foram significativamente menores no grupo AC 125 mg/kg e não foram significativamente diferentes nos grupos AC 250 e 500 mg/kg em comparação com os do grupo AV. Conforme mostrado na Figura 10(c), em comparação com o grupo AAC, os níveis de expressão relativa de p-eNOS aumentaram significativamente nos grupos AC 125, 250 e 500 mg/kg; no entanto, em comparação com o grupo AV, os níveis de expressão relativa apresentaram uma tendência significativamente decrescente nos grupos AC 125 e 250 mg/kg, mas não mostraram diferença significativa no grupo AC 500 mg/kg.
BENEFÍCIO CISTANCHE
4. Discussão
Em comparação com pacientes com hipertensão, aqueles com hipertensão e hipertrofia cardíaca têm uma probabilidade 6-8 maior de infarto agudo do miocárdio, insuficiência cardíaca crônica e até morte súbita cardíaca, o que afeta seriamente o tratamento e o prognóstico da hipertensão [23, 24] . Sob tais circunstâncias, o tratamento da hipertensão não deve se limitar ao controle da pressão arterial. Nesse sentido, a reversão da hipertrofia cardíaca, como fator chave, também merece grande preocupação. Em pacientes com hipertrofia cardíaca, a síntese proteica de cardiomiócitos está aumentada em número, aumentada em tamanho, espessada nas paredes celulares, juntamente com a ocorrência de mais sarcômeros, proliferação de fibroblastos intersticiais e proliferação de colágeno cardíaco. Ao mesmo tempo, a expressão de marcadores de hipertrofia cardíaca, como ANP, BNP e -MHC mRNA, também é aumentada [25-27]. Como medicina tradicional chinesa para o tratamento da infertilidade feminina e impotência masculina, o caule daCistanche tubulosafoi registrado pela primeira vez na Materia Medica de Shen Nong em ca. 100 aC e atualmente é amplamente utilizado como um tipo de alimento saudável na área do Sudeste Asiático [28]. Nos últimos anos,Cistanche tubulosatem chamado a atenção da comunidade médica por causa de sua significativa atividade biológica. Como uma erva antifadiga tradicional, não sóCistanche tubulosatem a função de proteção muscular, mas também seu extrato pode melhorar o armazenamento de ATP e reduzir o dano muscular após o exercício em ratos [29]. De acordo com os resultados de experimentos ex vivo, Cistanche tubulosa também tem um efeito protetor contra a toxicidade muscular induzida por estatinas com a ajuda da via das caspases [30]. Além disso, os pesquisadores estudaram os efeitos farmacológicos da Cistanche tubulosa na proteção cardiovascular e outros aspectos e descobriram queCistanche tubulosapoderia inibir o aumento da glicemia de jejum e glicemia pós-prandial, melhorar a resistência à insulina e melhorar a dislipidemia, bem como inibir a perda de peso em camundongos db/db [31].
Extrato de Cistanche tubulosa
Estudos anteriores mostraram que CPhGs(GLICÓSIDO FENILETANOILDO DE CISTANCHE)pode reduzir o dano dos radicais livres à membrana mitocondrial do miocárdio e ao omento plasmático, reduzir o conteúdo de malondialdeído, reduzir o dano ultraestrutural do miocárdio, aumentar a atividade da enzima antioxidante mitocondrial do miocárdio, reduzir o tamanho do infarto do miocárdio, melhorar a atividade da fosfocreatina no tecido miocárdico e ter um efeito protetor efeito no miocárdio isquêmico [9, 10, 32]. Nosso objetivo foi explorar os efeitos dos CPhGs na hipertrofia cardíaca induzida por sobrecarga de pressão. Neste estudo, descobriu-se que os CPhGs diminuíram LVPWT, LVED, HWI, AMC e os níveis de genes de hipertrofia cardíaca (ou seja, ANP, BNP e -MHC), aumentaram FE e FS, inibiram a hipertrofia cardíaca e melhoraram a função cardíaca em ratos . Além disso, a inflamação é um dos fenótipos chave na patogênese da hipertrofia cardíaca [33]. Alguns estudiosos descobriram que a deleção de IL-6 pode atenuar a hipertrofia e disfunção ventricular esquerda induzida por sobrecarga de pressão [34]. E descobrimos que os CPhGs podem não apenas diminuir o nível plasmático de IL-6 de ratos após AAC, mas também reduzir outros pró-inflamatórios, como COX-1, IL-1 e TNF- . Além disso, os CPhGs também podem reduzir a proteína COX-2 e HMGB-1 relacionada à inflamação. -e os efeitos dos CPhGs foram dependentes da dose com o aumento das doses do fármaco. Além disso, vale ressaltar que a alta dose do grupo CPhGs teve um efeito protetor significativo em ratos hipertróficos, semelhante ao efeito do grupo valsartan positivo. -portanto, os CPhGs podem ser um potencial agente farmacológico para inibir a hipertrofia cardíaca induzida por sobrecarga de pressão. A metilação do DNA refere-se a um processo de modificação de metilação do DNA molecular no qual a S-adenosil-L-metionina atua como um doador de metil para obter um grupo metil por meio de ligação covalente sob a catálise de DNA metiltransferases [35]. É bem conhecido que a ET-1 é o vasoconstritor mais potente e pode contrair fortemente as artérias medulares e medulares, resultando em diminuição da natriurese e aumento da pressão arterial [36-38]. Sendo a enzima chave na etapa final da produção de endotelina, ECE- 1 não só coexiste com ET-1 em doenças cardiovasculares, mas também pode regular a produção de ET-1. -nos, ECE-1 pode ser bastante essencial para o desenvolvimento e progressão da doença [39]. Em experimentos in vitro em células endoteliais vasculares, a metilação da ilha CpG na região promotora de ECE-1c diminui sua atividade transcricional, resultando na diminuição da expressão de ECE-1c, levando ainda à diminuição da produção de ET -1 e diminuição da pressão arterial in vivo, e esta linha de alterações sugere que a metilação da ECE-1 pode estar envolvida na patologia da hipertensão [40, 41]. Em nosso estudo anterior, também encontramos aumento da desmetilação da ECE-1 em pacientes hipertensos [35]. -e os resultados do presente estudo mostraram que os CPhGs reduziram significativamente a demetilação de ECE-1, diminuíram a expressão de mRNA e proteína de ECE-1 e reduziram os níveis plasmáticos de ET-1 no miocárdio de ratos com sobrecarga de pressão hipertrofia cardíaca induzida após AAC. Se os CPhGs afetam os níveis de desmetilação da ECE{45}} e se protegem contra a hipertrofia cardíaca em ratos não foi esclarecido. PI3K é a via final para hipertrofia de cardiomiócitos do tipo contrátil para hipertrófico [42]. Ambas as isoformas de PI3K podem estar envolvidas na hipertrofia de cardiomiócitos, em que a Pll0 está envolvida na hipertrofia fisiológica, enquanto a p110c está envolvida na hipertrofia patológica. P110, quando nocauteado em camundongos, pode proteger contra estímulos patológicos cardiomiopáticos e desempenha um papel crucial no desenvolvimento e progressão da hipertrofia de cardiomiócitos [43]. PKB é central para esta via de sinalização. Sua ativação pode modular a função molecular ativando ou inibindo efeitos ou moléculas a jusante através da fosforilação [44]. PI3K/PKB também é uma via de sinalização chave por trás de ET-1, e estudos mostraram que ET-1 pode induzir independentemente resistência de fibroblastos à apoptose através da ativação de sinalização PI3K/PKB [45].
Suplemento Cistanche tubulosa
Outros estudos mostraram que a ET-1 pode regular a atividade da eNOS e a liberação de NO através do receptor de endotelina B1 [46]. Como um importante vasodilatador, o NO pode antagonizar os efeitos vasoconstritores da ET-1 de múltiplos níveis e manter a função cardiovascular normal [47]. Neste estudo, os CPhGs de dose média e alta(GLICÓSIDO FENILETANOILDO DE CISTANCHE)grupos mostraram um aumento significativo em p-PI3K, p-PKB e p-ENOS. No entanto, o grupo CPhGs de alta dose teve o mesmo efeito que o grupo AV, o que demonstrou ainda que CPhGs podem inibir a hipertrofia cardíaca em ratos após AAC ativando a via de sinalização PI3K/PKB/eNOS. Outros estudos também encontraram uma ligação entre a via PI3K/PKB e as respostas inflamatórias [48, 49]. Zou e outros pesquisadores relataram que, na asma, os genes relacionados ao Brahman desempenham um papel essencial na manutenção da inflamação das vias aéreas e afetam a via PI3K/Akt/mTOR [50]. Além disso, os CPhGs também diminuíram a expressão de genes relacionados à inflamação no tecido miocárdico. Portanto, especulamos que os CPhGs podem atenuar a resposta inflamatória em ratos sobrecarregados de estresse, aumentando a via de sinalização PI3K/PKB/eNOS. No geral, nosso estudo é o primeiro a demonstrar o efeito protetor dos CPhGs na hipertrofia cardíaca induzida por sobrecarga de pressão em ratos após AAC, o que pode estar relacionado ao papel que os CPhGs desempenham na redução efetiva do nível de desmetilação da ECE-1 e aumento a via PI3K/PKB. -esses achados fornecem uma nova ideia para a pesquisa clínica da hipertrofia hipertensiva e o desenvolvimento de novas drogas terapêuticas para prevenir, controlar e reverter a hipertrofia hipertensiva. Embora ainda existam muitas questões-chave esperando para serem abordadas, uma maior compreensão dos mecanismos pelos quais CPhGs e PI3K/PKB medeiam as respostas inflamatórias podem lançar uma nova luz sobre a exploração do tratamento da hipertrofia cardíaca no futuro.
5. Conclusões
Nossos resultados mostraram que CPhGs(GLICÓSIDO FENILETANOILDO DE CISTANCHE)melhorou a hipertrofia miocárdica de ratos por AAC, o que pode estar relacionado à inibição da desmetilação de ECE-1 e aumento de PI3K/PKB/eNOS
Suplemento Cistanche tubulosa
Disponibilidade de dados
Todos os dados incluídos neste estudo estão disponíveis mediante solicitação por meio de contato com o autor correspondente. Conflitos de interesse -e autores declaram não haver conflitos de interesse.
Contribuições dos autores
Shu-Ping You, Tao Liu, Jun Zhao e Qiong-Ling Fan conceberam e projetaram os experimentos. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang e Shi-Lei Zhang trabalharam na metodologia. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang, Shi-Lei Zhang e Shu Ping You analisaram os dados. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang e Shi-Lei Zhang escreveram o manuscrito. Shu-Ping You, Tao Liu e Jun Zhao revisaram o manuscrito. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.
Agradecimentos
-este trabalho foi financiado por um grande projeto do Laboratório Nacional de Chaves Estabelecido em Conjunto pela Província e pelo Ministério na Região Autônoma Uigur de Xinjiang (SKLHIDCA-2018-3), Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (nº 8156140127) e um projeto para jovens de Pesquisa em Ciências Naturais na Instituição de Ensino Superior da Região Autônoma Uigur de Xinjiang (XJEDU2019Y027).
Referências
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