Parte 2: Estabelecimento do modelo experimental concorrente de osteoporose combinado com doença de Alzheimer em ratos e os efeitos duplos de echinacoside e acteside de Cistanche Tubulosa

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Yi Chen, Ying-Qi Li, Jia-Yi Fang, Ping Li, Fei Li

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3. Resultados

3.1. Peso corporal

Os pesos corporais semanais dos ratos em cada grupo ao longo de todo o tratamento de 8 semanas foram mostrados na Fig. 1. Em comparação com o grupo Sham, os pesos corporais dos ratos no grupo OVX mais D aumentaram, especialmente tendo uma diferença significativa no primeiro quatro semanas (P<0.05). after="" being="" treated="" with="" ev="" and="" ech,="" the="" body="" weights="" of="" rats="" decreased="" obviously="" as="" compared="" to="" the="" ovx+d="" group=""><0.05,><>

3.2. Avaliação da capacidade cognitiva

3.2.1. Avaliação da capacidade de aprendizagem na fase de aquisição

As trilhas de natação representativas dos ratos de cada grupo na fase de aquisição no 5º dia foram mostradas na Fig. 2. A latência de escape de cada grupo durante a fase de aquisição de 5 dias foi listada na Tabela 1. No primeiro dia, o latência de escape entre o grupo OVX mais D e o grupo DPZ, o grupo ACT apresentou diferença significativa (P<0.05), respectively.="" from="" the="" second="" day,="" the="" escape="" latency="" of="" the="" sham="" group="" significantly="" shortened="" and="" the="" average="" latency="" was="" much="" lower="" than="" that="" of="" the="" ovx+d="" group.="" in="" the="" dpz="" group,="" the="" latency="" decreased="" significantly=""><0.05) as="" compared="" to="" the="" ovx+d="" group="" on="" the="" 3rd="" day.="" compared="" with="" the="" sham="" group,="" the="" latency="" of="" d="" and="" ovx+d="" groups="" obviously="" lengthened=""><0.01,><0.001) on="" the="" 4th="" day.="" in="" addition,="" compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" the="" latency="" of="" ev,="" dpz,="" and="">ECH, os grupos ACT encurtaram significativamente (P<0.05,><0.01,><0.001). on="" the="" 5th="" day,="" the="" latency="" of="" the="" ovx+d="" group="" was="" still="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" sham="" group=""><0.05), and="" the="" latency="" of="" ev="" and="">ECHgrupos obviamente encurtados (P<0.05) as="" compared="" to="" the="" ovx+d="">

3.2.2. Avaliação da capacidade de memória no teste de sonda

As trilhas de natação representativas dos ratos de cada grupo no teste de sonda foram mostradas na Fig. 3. Conforme mostrado na Fig. 4, em comparação com o grupo Sham, os tempos de travessia e o tempo de natação no quadrante alvo de OVX, D e Os grupos OVX mais D diminuíram significativamente (P<0.05,><0.01). compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" the="" crossing="" times="" of="" ev,="" dpz,="" and="">ECH, os grupos ACT obviamente aumentaram (P<0.05,><0.01) and="" the="" time="" in="" the="" target="" quadrant="" of="" ev="" and="" dpz="" groups="" also="" increased="" significantly=""><0.05,><>

3.3. Análise bioquímica do soro

Conforme mostrado na Fig. 5A, B, em comparação com o grupo Sham, as atividades de BALP e TRAP nos grupos OVX e OVX mais D aumentaram significativamente (P<0.001), which="" was="" the="" typical="" characteristic="" of="" high="" turnover="" osteoporosis="" caused="" by="" ovariectomy.="" the="" activities="" of="" balp="" and="" trap="" in="" ev,="" dpz,="">ECH, e os grupos ACT diminuíram obviamente em comparação com o grupo OVX mais D (P<0.05,><0.01,><0.001). ovariectomy,="" intraperitoneal="" injection="" of="" d-galactose,="" and="" intragastric="" administration="" of="" alcl3="" could="" cause="" oxidative="" damage="" (muthusami="" et="" al.,="" 2005;="" prakash="" et="" al.,="" 2013).="" as="" shown="" in="" fig.="" 5c,="" d,="" the="" sod="" activities="" of="" ovx,="" d,="" and="" ovx+d="" groups="" were="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" sham="" group=""><0.05,><0.001), and="" the="" mda="" content="" of="" ovx,="" d,="" and="" ovx+d="" groups="" increased="" significantly=""><0.05,><0.001) as="" compared="" to="" sham="" group.="" compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" after="" being="" treated="" with="" ev,="" dpz,="" ech,="" and="" act,="" the="" sod="" activity="" increased="" significantly=""><0.01,><0.001), and="" the="" mda="" content="" decreased="" to="" a="" certain="" degree,="" especially="" in="" the="" ev="" group=""><>

3.4. Análise bioquímica do hipocampo

Conforme mostrado na Fig. 6A, a atividade de AChE do grupo OVX mais D foi obviamente maior do que a do grupo Sham (P<0.05), which="" indicated="" the="" learning="" and="" memory="" ability="" of="" the="" ovx+d="" group="" may="" reduce="" with="" the="" acceleration="" of="" hydrolysis="" of="" the="" acetylcholine="" in="" the="" brain.="" compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" the="" ache="" activity="" in="" drug="" treatment="" groups="" decreased="" to="" some="" extent,="" especially="" in="" the="" ev="" group=""><0.01). as="" shown="" in="" fig.="" 6b,="" compared="" with="" the="" sham="" group,="" the="" chat="" activities="" of="" ovx,="" d,="" and="" ovx+d="" groups="" obviously="" decreased=""><0.01,><0.001) which="" indicated="" that="" their="" learning="" and="" memory="" abilities="" of="" them="" could="" be="" influenced="" due="" to="" their="" slower="" synthesis="" of="" acetylcholine="" in="" the="" brain.="" compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" the="" chat="" activities="" of="" ev,="" dpz,="" and="">ECH, os grupos ACT aumentaram significativamente (P<0.05,><0.01,><>

O dano oxidativo também pode ocorrer no hipocampo (Dilek et al., 2010; Yang et al., 2013). Conforme mostrado na Fig. 6C, D, em comparação com o grupo Sham, as atividades SOD dos grupos OVX, D e OVX mais D diminuíram significativamente (P<0.01,><0.001), and="" the="" mda="" content="" obviously="" increased=""><0.01,><0.001). after="" being="" treated="" with="" ev,="" dpz,="" ech,="" and="" act,="" the="" sod="" activity="" increased="" significantly=""><0.001) and="" the="" mda="" content="" significantly="" decreased=""><0.001) as="" compared="" to="" the="" ovx+d="">

3.5. Análise da histomorfologia do hipocampo

Conforme mostrado na Fig. 7A, os neurônios no hipocampo do grupo Sham foram uniformemente corados. Enquanto isso, as características morfológicas dos neurônios eram claras com o nucléolo óbvio. O arranjo deles também era limpo e compacto com um grande número e estrutura intacta. Nos grupos OVX, D e OVX mais D, o número de neurônios no hipocampo reduziu significativamente em comparação ao grupo Sham. Os neurônios estavam organizados desordenadamente e os vazios estavam aumentados. Especialmente nos grupos D e OVX mais D, menos neurônios foram encontrados no hipocampo e a distribuição deles foi dispersa. A cariopicnose e as características morfológicas indistintas de neurônios e neurônios necróticos também ocorreram nos grupos D e OVX mais D. Conforme mostrado na Fig. 7B, após a intervenção medicamentosa, o número de neurônios no hipocampo dos grupos EV, DPZ, ECH e ACT foi significativamente maior do que no grupo OVX mais D. Ao mesmo tempo, o alinhamento entre os neurônios foi relativamente ordenado e o número de neurônios com cariopicnose e necrose também diminuiu.

3.6. Peso úmido do útero e análise da histomorfologia e morfometria uterina

Conforme mostrado na Fig. 8, os pesos úmidos do útero dos grupos OVX e OVX mais D foram significativamente menores do que os do grupo Sham (P<0.05,><0.01). compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" the="" uterus="" wet="" weights="" of="" the="" ev="" group="" increased="" obviously=""><0.01) under="" the="" effect="" of="" estradiol="" valerate.="" in="" addition,="" the="" uterus="" wet="" weights="" of="" the="" dpz="" group="" and="" ech="" group="" also="" increased="" to="" a="" certain="" degree.="" as="" shown="" in="" fig.="" 9a,="" the="" uterus="" of="" the="" sham="" group="" was="" a="" thick-walled="" muscular="" organ="" and="" the="" uterine="" mucosal="" epithelium="" was="" a="" single-layer="" columnar="" epithelium.="" the="" lamina="" propria="" was="" distributed="" with="" uterine="" glands="" and="" blood="" vessels.="" the="" muscular="" layer="" was="" composed="" of="" bundled="" or="" pieces="" of="" smooth="" muscle="" and="" the="" muscle="" fiber="" was="" tightly="">

Nos grupos OVX e OVX mais D, o útero encolheu significativamente com estenose luminal. O endométrio e a camada muscular foram significativamente mais finos do que o grupo Sham. Além disso, o número de glândulas uterinas diminuiu e as fibras musculares ficaram finas. Conforme mostrado na Fig. 9B, em comparação com o grupo OVX mais D, a histomorfologia uterina melhorou até certo ponto após ser tratada com EV, DPZ, ECH e ACT. Particularmente no grupo EV, o útero estava significativamente cheio, o endométrio e a camada muscular eram obviamente espessos. Além disso, o número de glândulas uterinas aumentou e as fibras musculares se alargaram. Os resultados da análise morfométrica do útero de cada grupo foram mostrados na Fig. 10A-C. Comparado com o grupo Sham, o diâmetro uterino, a espessura do epitélio da mucosa uterina e o número de glândulas uterinas nos grupos OVX e OVX mais D diminuíram significativamente (P<0.01,><0.001). after="" being="" treated="" with="" ev,="" the="" uterine="" diameter,="" uterine="" mucosal="" epithelial="" thickness,="" and="" the="" number="" of="" uterine="" glands="" increased="" obviously="" as="" compared="" to="" the="" ovx+d="" group=""><0.001). in="" addition,="" ech="" and="" act="" also="" showed="" the="" trend="" of="" increasing="" uterine="" diameter,="" uterine="" mucosal="" epithelial="" thickness,="" and="" the="" number="" of="" uterine="">

3.7. Análise de micro-CT

Imagens bidimensionais da transecção do osso esponjoso do fêmur distal foram obtidas pelo software Bruker DataViewer mostrado na Fig. 11A. Após realizado pelo software CTvol, imagens tridimensionais do osso trabecular na região VOI do osso esponjoso femoral distal de cada grupo foram mostradas na Fig. 11B. Além disso, a média de DMO, BV/TV, SMI, Tb. N, Tb. Sp, Tb.Th, BS/TV e Tb. Pf que foi analisado pelo software CTAn também foram mostrados na Tabela 2.1 e Tabela 2.2. Como as figuras são mostradas acima, em comparação com o grupo Sham, o número trabecular e a área trabecular no grupo OVX mais D obviamente diminuíram. Enquanto isso, a quantificação de vários parâmetros trabeculares também indicou a média de DMO, BV/TV, Tb. N, Tb. Th, BS/TV diminuiu significativamente no grupo OVX mais D (P<0.05,><0.01) and="" the="" smi,="" tb.="" sp,="" tb.="" pf="" of="" ovx+d="" group="" increased="" obviously=""><0.01). compared="" with="" the="" ovx+d="" group,="" the="" trabecular="" microarchitecture="" was="" improved="" to="" some="" extent="" after="" being="" treated="" with="" ev="" and="">

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3.8. Análise da histomorfologia óssea

As estruturas trabeculares do osso esponjoso nos fêmures distais de cada grupo foram mostradas na Fig. 12. O grupo Sham tinha muitas trabéculas que eram espessas e interligadas em uma rede. Em comparação com o grupo Sham, as trabéculas dos grupos OVX e OVX plus D foram significativamente reduzidas e afinadas. Particularmente, as trabéculas do grupo OVX mais D foram bastante destruídas e a maioria delas não pôde ser conectada a uma rede. Além disso, as trabéculas do grupo D também foram obviamente afinadas. Após serem tratadas com EV e ECH, as trabéculas aumentaram significativamente e ficaram espessadas e reticuladas em relação ao grupo OVX mais D. As características morfológicas do grupo EV foram próximas às do grupo Sham. Enquanto isso, as estruturas trabeculares dos grupos DPZ e ACT também foram melhoradas até certo ponto.

3.9. Análise biomecânica

Os resultados do teste de flexão de três pontos foram mostrados na Tabela 3. Comparado com o grupo Sham, a carga máxima e a tensão máxima reduziram significativamente (P<0.05,><0.01) in="" ovx="" and="" ovx+d="" groups,="" and="" the="" energy="" absorption="" also="" decreased="" greatly.="" after="" being="" treated="" with="" ev="" and="" ech,="" the="" maximum="" load,="" maximum="" stress,="" and="" energy="" absorption="" increased="" to="" some="" extent="" as="" compared="" to="" the="" ovx+d="">

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4. Discussão

A investigação epidemiológica da osteoporose revelou que o número de pacientes do sexo feminino foi maior do que o de pacientes do sexo masculino e ocorreu frequentemente em mulheres idosas e na pós-menopausa (Chen et al., 2016). A osteoporose tem afetado seriamente a saúde dos idosos e se tornou um dos graves problemas sociais em todo o mundo (Deal, 2009; Roy et al., 2011; Bessette et al., 2011). A pesquisa epidemiológica da doença de Alzheimer tem mostrado que a incidência e prevalência dedoença de Alzheimeraumentou exponencialmente com o aumento da idade, principalmente nos idosos acima de 65 anos (Sosa-Ortiz et al., 2012). Além disso, a prevalência de DA foi significativamente maior em mulheres do que em homens (Mielke et al., 2014). Estimativas recentes sugerem que quase dois terços dos indivíduos diagnosticados com DA eram mulheres (Hebert et al., 2013). Notavelmente, a prevalência global da DA colocou um fardo considerável na sociedade (Reitz e Mayeux, 2014).

Estudos relataram que a principal razão que causa a osteoporose pós-menopausa foi a deficiência de estrogênio (Klein-Nulend et al., 2015). Isso pode acelerar significativamente a taxa de renovação óssea e fazer com que a taxa de reabsorção óssea exceda a taxa de formação óssea, resultando na perda de massa óssea, no declínio da densidade mineral óssea e na diminuição da força óssea (Tella e Gallagher, 2014). Além disso, também foi demonstrado que as mulheres na pós-menopausa têm um risco aumentado de comprometimento cognitivo ou demência (Rocca et al., 2007). Alguns estudos demonstraram que o estrogênio desempenha um papel crucial no tratamento da DA, incluindo a manutenção da função hipocampal durante o envelhecimento (Han et al., 2013), aumentando a atividade da colina acetiltransferase no hipocampo (Gibbs e Aggarwal, 1998), reduzindo a agregação de amiloide -beta (Nilsen et al., 2006).

Foi crucial selecionar os modelos de ratos aplicáveis ​​para os estudos de osteoporose edoença de Alzheimer. O modelo de osteoporose induzida por ovariectomia tem sido amplamente adotado nos estudos de osteoporose (Zhao et al., 2011; Liu et al., 2018). Embora a patogênese da DA seja diversa, estudos mostraram que o estresse oxidativo e a exposição ao alumínio foram as causas importantes da DA (Xiao et al., 2011; Bhattacharjee et al., 2014). A D-galactose é um tipo de açúcar redutor in vivo. Quando era muito mais alto do que o nível normal no corpo, poderia ser oxidado pela galactose oxidase em aldeídos que não poderiam ser mais metabolizados e poderiam ser amplamente acumulados no cérebro, consequentemente causando estresse oxidativo e apoptose de neurócitos (Cui et al. , 2006). O alumínio pode atravessar facilmente a barreira hematoencefálica e tem neurotoxicidade óbvia para o cérebro (Prakash et al., 2013). Pode causar deposição extracelular de neurônios e induzir a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), que causam estresse oxidativo e comprometimento nos neurônios (Walton, 2013). Numerosos estudos mostraram que o tratamento de D-galactose combinado com AlCl3 em animais, especialmente roedores, pode prejudicar significativamente sua capacidade de aprendizado e memória (Chiroma et al., 2018). Poderia induzir a expressão e acúmulo de A 1-42 no córtex cerebral e hipocampo (Yang et al., 2014). Além disso, estudos também indicaram que a ovariectomia combinada com uma injeção intraperitoneal de longa duração de D-galactose pode resultar em alterações fisiopatológicas associadas à doença de Alzheimer, como perda sináptica, comprometimento dos astrócitos, acúmulo de A intracelular e emaranhados neurofibrilares, que podem servir como modelo de dupla lesão para DA (Su et al., 2010).

Em nosso estudo, três grupos modelo do grupo OVX, grupo D e grupo OVX mais D foram definidos, respectivamente, para confirmar que o método de cirurgia de ovariectomia combinado com uma injeção intraperitoneal de D-galactose e administração intragástrica de AlCl3 poderia resultar melhor no resultado patológico. características da osteoporose edoença de Alzheimerao mesmo tempo. Vários métodos foram usados ​​para avaliar o modelo de osteoporose combinado com a doença de Alzheimer. Aprendizagem e memória são atividades de alto nível no cérebro. A doença de Alzheimer pode causar diferentes graus de comprometimento cognitivo (Albert et al., 2011). O teste de aprendizagem e memória de roedores é um método comum para estudar comportamentos e mecanismos cognitivos no campo da neurociência (Kwon et al., 2011). O teste Morris Water Maze (MWM) foi usado em nosso estudo para avaliar a capacidade de aprendizado e memória de ratos, que tem sido amplamente utilizado em neurobiologia e que causa estresse oxidativo e comprometimento nos neurônios (Walton, 2013). Numerosos estudos mostraram que o tratamento de D-galactose combinado com AlCl3 em animais, especialmente roedores, pode prejudicar significativamente sua capacidade de aprendizado e memória (Chiroma et al., 2018). Poderia induzir a expressão e acúmulo de A 1-42 no córtex cerebral e hipocampo (Yang et al., 2014). Além disso, estudos também indicaram que a ovariectomia combinada com uma injeção intraperitoneal de longa duração de D-galactose pode resultar em alterações fisiopatológicas associadas à doença de Alzheimer, como perda sináptica, comprometimento dos astrócitos, acúmulo de A intracelular e emaranhados neurofibrilares, que podem servir como modelo de dupla lesão para DA (Su et al., 2010). Em nosso estudo, três grupos modelo do grupo OVX, grupo D e grupo OVX mais D foram definidos, respectivamente, para confirmar que o método de cirurgia de ovariectomia combinado com uma injeção intraperitoneal de D-galactose e administração intragástrica de AlCl3 poderia resultar melhor no resultado patológico. características da osteoporose e da doença de Alzheimer ao mesmo tempo.

Vários métodos foram usados ​​para avaliar o modelo de osteoporose combinado comdoença de Alzheimer. Aprendizagem e memória são atividades de alto nível no cérebro. A doença de Alzheimer pode causar diferentes graus de comprometimento cognitivo (Albert et al., 2011). O teste de aprendizagem e memória de roedores é um método comum para estudar comportamentos e mecanismos cognitivos no campo da neurociência (Kwon et al., 2011). O teste Morris Water Maze (MWM) foi usado em nosso estudo para avaliar a capacidade de aprendizado e memória de ratos, que tem sido amplamente utilizado na pesquisa de neurobiologia e neurofarmacologia de roedores (Gacar et al., 2011). Os resultados do teste MWM mostraram que a latência de escape do grupo OVX mais D aumentou significativamente e os tempos de travessia e tempo de natação no quadrante alvo do grupo OVX mais D diminuíram obviamente em relação ao grupo Sham, o que indicou que o habilidade de ratos no grupo OVX mais D foi seriamente prejudicada. O hipocampo, uma área do cérebro crítica para o aprendizado e a memória, é especialmente vulnerável a danos nos estágios iniciais da DA. (Mu e Gage, 2011). A análise bioquímica do hipocampo revelou que a atividade da AChE foi obviamente maior e a atividade da ChAT foi muito menor no grupo OVX mais D do que no grupo Sham, o que indicou que a capacidade de aprendizado e memória do grupo OVX mais D pode ser prejudicada devido à diminuição da acetilcolina no cérebro. Além disso, o dano oxidativo também pode ter afetado as funções normais do hipocampo devido à diminuição da atividade da SOD e aumento do conteúdo de MDA no grupo OVX mais D. A análise histomorfológica do hipocampo mostrou que o número de neurônios reduziu significativamente e os neurônios foram organizados desordenadamente no grupo OVX mais D em comparação com o grupo sham, o que indicou que os neurônios do hipocampo foram severamente prejudicados.

A formação de osteoporose foi avaliada por bioquímica sérica, Micro-CT, histomorfologia óssea e teste biomecânico em nosso estudo. As atividades de BALP e TRAP no soro são o índice representativo na formação e reabsorção óssea (Rufus et al., 2013). Em comparação com o grupo Sham, as atividades de BALP e TRAP nos grupos OVX e OVX mais D aumentaram significativamente, que eram as características típicas da osteoporose de alta rotatividade causada pela ovariectomia. Enquanto isso, danos oxidativos também ocorreram nos ratos do grupo OVX mais D pela diminuição da atividade da SOD e aumento do conteúdo de MDA, o que acelerou ainda mais o processo de osteoporose. A micro-TC é um tipo de técnica com características de imagem não invasiva combinada com detecção histológica de alta resolução que é particularmente indicada para imagens ósseas e pesquisa de parâmetros ósseos (Ito, 2011).

Os resultados da análise de Micro-CT indicaram que a diminuição da DMO, uma grande perda de massa óssea e a microarquitetura das trabéculas destruídas foram mostradas no grupo OVX mais D em comparação com o grupo Sham. A histomorfologia óssea também demonstrou que as trabéculas foram significativamente destruídas no grupo OVX mais D. A osteoporose pode aumentar o risco de fratura, e o teste biomecânico ósseo pode ser usado para detectar a resistência óssea (Mears et al., 2010). O teste de flexão de três pontos da tíbia mostrou que a resistência óssea do grupo OVX mais D diminuiu significativamente em comparação com o grupo Sham. Além disso, a análise da histomorfologia e morfometria uterina revelou que o útero encolheu significativamente, o endométrio estava obviamente mais fino e o número de glândulas uterinas diminuiu no grupo OVX mais D em comparação com o grupo sham pela falta de estrogênio.Cistanche tubulosaé um tônico bem conhecido na medicina tradicional chinesa que tem os efeitos de imunorregulação, antioxidante, antienvelhecimento, neuroproteção e promoção do crescimento de osteoblastos (Li et al., 2016).Echinacosidee acteosídeos são os principais constituintes ativos emCistanche tubulosa, e seus vários efeitos farmacológicos merecem ser estudados em profundidade (Fu et al., 2018).

Em nosso experimento atual, os efeitos deechinacosideou acteosídeo no modelo de rato de osteoporose combinado comdoença de Alzheimerforam mais estudados. Mostrou efeitos óbvios sobre a osteoporose e a doença de Alzheimer, especialmente o echinacoside. Os resultados indicaram que o echinacoside pode aumentar significativamente a capacidade de aprendizado e memória e melhorar a disfunção cognitiva, promovendo a síntese de acetilcolina e protegendo os neurônios no hipocampo. Enquanto isso, echinacoside e acteoside podem reduzir significativamente a reabsorção óssea, diminuindo as atividades de BALP e TRAP. Além disso, eles também podem aumentar a densidade mineral óssea média e a resistência óssea, evitando a perda de massa óssea e melhorando a microarquitetura das trabéculas. Além disso, echinacoside e acteoside também mostraram a tendência de melhorar as condições do útero. Foi relatado que o echinacoside e o acteoside têm um efeito semelhante ao estrogênio (Wang et al., 2014). Nosso estudo anterior também havia demonstrado que, como um novo tipo de fitoestrogênio,echinacosidepoderia efetivamente prevenir a osteoporose e inibir a reabsorção óssea após ovariectomia em ratos (Li et al., 2013). De acordo com esses resultados, echinacoside ou acteoside podem atuar pela via de sinalização do estrogênio ou outra via associada ao estrogênio. Na pesquisa a seguir, várias doses de echinacoside ou acteosídeo serão definidas para revelar a relação dose-efeito e as vias de sinalização relevantes serão estudadas para elucidar os mecanismos comuns de echinacoside ou acteosídeo na osteoporose combinada com a doença de Alzheimer.

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5. Conclusão

O modelo de rato de osteoporose combinado comdoença de Alzheimerfoi viável e estabelecido com sucesso em nosso estudo. Enquanto isso, echinacoside e acteside deCistanche tubulosademonstraram os efeitos significativos de melhorar a capacidade de aprendizado e memória, regular o metabolismo ósseo, reduzir o dano oxidativo e proteger os neurônios neste modelo concorrente.Echinacosidee acteosídeo podem ser os potenciais candidatos com efeitos duplos e fornecer a evidência experimental para um estudo mais aprofundado de mecanismos moleculares na pesquisa a seguir.