Visão mecanística da neuroproteção induzida pela diosmina e melhoria da memória no modelo de rato com ácido intracerebroventricular-quinolínico: ressurreição de funções mitocondriais e antioxidantes, parte 4

2.12.4. Atividade da Superóxido Dismutase. A taxa de ação da SOD (EC1.15.1.1) (unidades por mg de proteína) foi considerada pelo procedimento de Kakkar et al. [33]. A mistura de reação envolveu 0,3 ml de homogenato, 100 µl de 5-sulfato de metilfenaziniometil (197 μM) e 1,3 ml de difosfatotetrabásico de sódio (0,066 mM, pH 7,2). A reação foi iniciada usando 200 µl de dinucleotídeo -nicotinamida adenina (DPNH) (780 μM) e interrompida 60 segundos depois usando 1 ml de CH3COOH glacial nesta mistura. A quantidade de cromogênio gerada foi calculada observando a intensidade da cor em λmax 560 nm.

A superóxido dismutase (SOD) é uma importante substância enzimática que pode desempenhar um papel antioxidante no corpo. Cada vez mais estudos têm mostrado que existe uma estreita relação entre SOD e memória.

Primeiro, a enzima SOD pode ajudar o corpo a remover os radicais livres e reduzir os danos do estresse oxidativo aos neurônios, protegendo assim o funcionamento normal do sistema nervoso. O funcionamento normal do sistema nervoso é a chave para a memória humana, o aprendizado e outras atividades de pensamento avançado. Portanto, um nível suficiente de SOD pode nos ajudar a manter um bom estado de memória, cognição e aprendizagem.

Em segundo lugar, a SOD também pode ajudar o corpo humano a repor oxigênio suficiente. Com a idade e as mudanças no ambiente, o suprimento de oxigênio no corpo diminuirá gradualmente. O oxigênio é uma das substâncias-chave para o metabolismo celular humano e também é muito importante para manter uma boa memória. A SOD pode ajudar o corpo a manter os níveis de oxigênio e garantir as funções metabólicas básicas normais do corpo humano, proporcionando assim condições para a geração e manutenção da memória.

Na vida diária, também é muito fácil manter um nível suficiente de SOD. Podemos aumentar o conteúdo de SOD do corpo através da dieta, como consumir vegetais ricos em SOD, como vegetais verdes, repolho e cenoura. Além disso, manter bons hábitos de vida também pode nos ajudar a manter um nível saudável de SOD, como exercícios moderados, sono adequado, etc.

Em suma, existe uma estreita relação entre a enzima SOD e a memória. Aumentar o conteúdo de SOD do corpo pode nos ajudar a manter um sistema nervoso saudável e promover o progresso normal das atividades de pensamento avançado. Devemos ajudar o corpo a manter níveis suficientes de SOD através de dieta científica, hábitos de vida e exercício físico, para proteger melhor a nossa memória. Percebe-se que precisamos melhorar a memória, e Cistanche pode melhorar significativamente a memória porque Cistanche tem efeitos antioxidantes, antiinflamatórios e antienvelhecimento, que podem ajudar a reduzir a oxidação e as reações inflamatórias no cérebro, protegendo assim a saúde do sistema nervoso. Além disso, Cistanche também pode promover o crescimento e a reparação das células nervosas, melhorando assim a conectividade e a função das redes neurais. Esses efeitos podem ajudar a melhorar a memória, a capacidade de aprendizagem e a velocidade de pensamento, e também podem prevenir a ocorrência de disfunções cognitivas e doenças neurodegenerativas.

Clique agora para melhorar sua memória

2.12.5. Atividade da Catalase. Para avaliar a taxa de ação da catalase (EC1.11.1.6), a discrepância de DO (λmax � 240 nm) da mistura analisada (3,0 ml) compreendendo 50 µl amostra investigada, 1,22 ml de H2O2 (0,03 M) em tampão Na+-K+ [PO4]2- (pH 7,91, 0,06 M) e 1,63 ml de Na+-K+ [PO4]2- (pH 7,91, 0,06 M) e 1,63 ml de Na{{ 29}}tampão K+ [PO4]2- (pH 7,1) foi registrado.

A atividade da catalase (µmol H2O2 decaído por minuto por mg de proteína de cérebro) foi calculada aplicando ε � 43,6/M/cm [34].2.12.6. Nível total de nitritos. .e técnica de Sastry et al.[35] foi implementado para avaliar nitritos cerebrais inteiros (μmolper mg de proteína cerebral).

Em tubos de ensaio abrangendo 100 µl de amostra investigativa, 145 mg de amálgama de cobre-cádmio, 500 µl de tampão H2CO3 (pH 8,89), 0,44 M 100 µl NaOH e 119,8 mM 400 µl ZnSO4 foram centrifugados a 4.500 × gpower por 10 minutos e o líquido superior supérfluo(sobrenadante) foi isolado.

O produto químico de Griess (50 µl) foi incluído em 100 µl de líquido supérfluo. Após 60 minutos de incubação, a DO (λmax ± 548 nm de comprimento de onda) foi observada empregando um espectrofotômetro UV1700 de feixe duplo (Shimadzu). Uma curva típica de ácido nitroso sódico (0,02–0,2 mM) foi desenhada e todo o nitrito foi equacionado.

2.12.7. Determinação de Proteínas Totais. O nível global de proteína (mg/ml de homogeneizado) foi calculado usando gráfico de curvatura atípica de albumina sérica bovina com a concentração da solução variando de 0,3 a 3,8 mg/ml. A combinação do exame foi organizada com 250 µl de homogenato, 5,1 ml de reagente de Lowry, tampão Na+-K+ [PO4]2- (900 µl) e 1,1 N 500 µl FCR. .e discrepância de DO foi observada em λmax � 650 nm [36].

2.13. Histopatologia de Seções Cerebrais. Usando uma configuração de difusão alimentada por gravidade, os ratos foram difundidos intracardialmente (via ventrículo esquerdo) com solução de formaldeído tamponado neutro a 10% (NBF a 10%) e anestesiados agudamente. O hipocampo e os setores corticais são imersos em um fixador (fixador 10:1: proporção de tecido), ou seja, NBF a 10% por uma semana (4 graus), acompanhado de natriumazida a 0,04% (pH 7,4).

Álcool etílico (70%) foi empregado como solução de empacotamento para porções fixas de tecido mantidas a 4 graus. Um cortador de micrótomo (tipo rotação) foi empregado para adquirir porções finas (8,0 μm), que foram então tingidas com corante hematoxilina e eosina (H&E). Os slides foram tornados permanentes com resina DPX, que posteriormente foram revestidas e inspecionadas através de um microscópio óptico (binocular) com ampliações de ×40.

2.14. Análise Estatística. Um experimentador habilidoso, cego para diversos regimes de medicamentos administrados a coortes de animais, examinou e avaliou os dados. Os outliers não foram pragmáticos (teste de Grubb) nos dados, e o teste de Kolmogorov-Smirnov e o teste de Levene confirmaram a distribuição normal das variáveis ​​e a homogeneidade da variância (HOV p > 0,05, teste de Levene), respectivamente.

Caso contrário, no caso de variância desigual (HOV p < {{0}}.05, teste de Levene), ANOVA de Welch (p < 0.05, estatística F′), e testes post hoc de Games – Howell podem ser aplicados. As médias das variáveis ​​normalmente distribuídas foram examinadas e relacionadas por medidas unidirecionais ou repetidas de análise de variância bidirecional (ANOVA). No caso da ANOVA, os resultados são significativos (p < 0,05) na estatística F, foram aplicados testes de comparações múltiplas, nomeadamente HSD de Tukey (diferença significativa honesta) ou Bonferroni. A significância estatística foi considerada p < 0,05 e os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média (EPM).

3. Resultados

3.1. Resultados do DSM na massa corporal (g), dieta e ingestão de água de ratos administrados com QA-ICV. O peso corporal, a ingestão de ração e água foram analisados ​​semanalmente, a partir do dia 1.

Uma redução significativa (p < {{{{10}}}}.001) na massa corporal (g), consumo de ração e água nos dias 7, 14 , e 21 foi pragmático em ratos submetidos à injeção de QA-ICV no dia 1 quando comparado aos equivalentes simulados (Figura 2). A dosagem de DSM (100 mg/kg) causou um aumento significativo no peso corporal (dia 7p <{28}}.05, dia 14 p <{38} }.01, dia 21 p < 0.001), alimentação (dia 7p < 0.{{6{{63} }}}5, dia 14 p < 0 0,01, dia 21 p < 0,001) e ingestão de água (dia 7 p < 0,01, dia 14 p < 0,05) em ratos contra QA-ICV.DSM (50 mg/kg) também atenuou significativamente a diminuição do peso corporal desencadeada por QA-ICV (dia 21 p < 0,05) e ingestão de ração (dia 7 p < 0,01) de ratos em relação aos ratos que receberam injeções isoladas de QA-ICV. Ratos tratados com QA-ICV e DNP revelaram um aumento significativo na massa corporal (g) (dia 7p < 0,05, dia 14 p < 0,001, dia 21 p < 0,001), alimentação (dia 7p < 0,001, dia 14 p < 0,01, dia 21 p < 0,001) e ingestão de água (dia 7, 14, 21 p < 0,01) em relação aos ratos que permaneceram expostos ao QA-ICV isolado.

3.2. Efeito do DSM na Locomoção, Coordenação Motora e Marcha de Ratos contra QA-ICV. Neste estudo, as atividades locomotoras dos animais não foram afetadas pelo QA-ICV ou tratamentos medicamentosos.

O grupo QA não apresentou alteração significativa nas contagens médias por 5 minutos no aparelho actinômetro em comparação com o grupo simulado (Figura 3 (a)). Análises de Rotarod e pegada foram utilizadas para avaliar o desempenho sensório-motor e a marcha dos ratos.

Os resultados mostraram que o QA-ICV prejudicou significativamente (p <{1}} 0,001) a coordenação motora (Figura 3 (b)) e a marcha (Figura 3 (c)) de ratos, refletida por uma diminuição na latência para cair da haste giratória e o comprimento da passada de ratos na análise de pegadas em comparação com homólogos falsos.

Os grupos QA + DSM50 e QA + DSM100 retrataram um aumento notável na latência de queda (p < 0,05, p < 0,01) e no comprimento da passada (p < 0,05, p < 0,001)em relação ao grupo GQ.

O tratamento com DNP atenuou significativamente o QA-ICV e desencadeou uma diminuição na latência para queda (p < 0.001) e no comprimento da passada (p < 0,001) quando comparado aos ratos que receberam QA-ICV sozinho. Além disso, o tratamento com DSM (100 mg/kg) apresentou uma melhora significativa (p < 0,01) na marcha em relação ao DSM (50 mg/kg) em ratos submetidos a QA-ICV.

3.3. Efeito do DSM na memória de trabalho e na memória espacial de longo prazo de ratos contra QA-ICV. Uma diminuição no índice de discriminação (%) no NORT corroborou uma diminuição na memória do tipo de trabalho.

Um aumento gradual no ELT ao longo de 4 dias de testes de treinamento e uma diminuição no TSTQ nos testes de recuperação (realizados 24 horas após o último teste de treinamento) no MWM denotaram perda de memória de longo prazo em ratos.

Neste estudo, os ratos que foram expostos apenas ao tratamento QA-ICV indicaram um declínio notável (p <{1}} 0,001) no índice de discriminação (%) em relação à simulação (Figura 4 (a)).

No teste MWM, os ensaios de treinamento do dia 17 não revelaram nenhuma alteração significativa no ELT entre os diferentes grupos, no entanto, no dia 18, foi observada uma mudança acentuada no ELT. Uma coorte de controle de qualidade apresentou um aumento substancial (p <{2}} 0,001) no ELT (dia 18-20) (figura 4 (b)) e uma diminuição no TSTQ (dia 21) (Figura 4 (c)) em relação às contrapartes simuladas.

O tratamento com QA-ICV atenuado por DSM (100 mg/kg) provocou diminuição no índice de discriminação (%) (p < 0.0{{14} }1), aumento no ELT (dia 18 p < 0,05, dia 19 p < 0,01, dia 20 p < 0,001) e diminuição no TSTQ (p < 0,001) quando comparado com os ratos que foram submetidos apenas à injeção de QA-ICV.

A coorte QA + DSM50 exibiu um aumento substancial no índice de discriminação (%)(p < 0.001), uma diminuição no dia 20 ELT (p < 0,01) e um aumento TSTQ (p < 0,001) relativo ao grupo QA.

O tratamento com DNP melhorou o índice de discriminação (%) (p < {{0}}.001), diminuiu ELT (dia 18 p < 0.01, dia 19p < 0,001, dia 20 p < 0,001) e aumento de TSTQ (p < 0,001) em ratos que receberam QA-ICV em comparação com ratos QA-ICV tratados com veículo. Além disso, injeções repetidas de DSM (100 mg/kg) revelaram uma melhoria substancial nas funções de memória em relação ao DSM (50 mg/kg) em ratos submetidos a QA-ICV.

3.4. Resultados do DSM no complexo mitocondrial cerebral em ratos injetados com QA-ICV.

A atividade mitocondrial no homogeneizado de todo o cérebro foi avaliada após testes comportamentais. Os resultados mostraram um declínio significativo (p <{1}}.001) nas taxas do complexo I/II na fração mitocondrial do homogeneizado cerebral por QA-ICV em relação à simulação (Figura 5) ..essa diminuição na atividade do complexo I/II pelo tratamento com QA-ICV foi atenuada (complexo I p < {{10}}.05, p < 0,001;complexo II p < 0,01, p < 0,001) por DSM (50 e 100 mg/kg) administrado por 21 dias sucessivos em comparação com ratos administrados com QA-ICV que receberam tratamento isolado com veículo medicamentoso. O DNP aumentou significativamente (p < 0,001) a atividade do complexo I/II em contraste com o veículo em ratos injetados com QA-ICV.

3.5. Efeito do DSM no estresse oxidativo mitocondrial cerebral em ratos injetados com QA-ICV. Os resultados exibiram um aumento notável (p <{3}}.001) no TBARS e nitritos totais e um declínio nas atividades de GSH, GPx, SOD e catalase na fração mitocondrial do cérebro homogeneizar por QA-ICV em relação à simulação (Figura 6). .é aumento no cérebroTBARS (p < 0.05, p < 0.001) e nitritos totais (p < {{ 21}}.05,p < 0.01) e declínio no GSH (p < 0.05, p < {{ 39}}.001), GPx (p < 0,05, p < 0,001), SOD (p < 0,01, p < 0,001) e atividades de catalase (p < 0,05, p < 0,001) pelo tratamento QA-ICV foram atenuadas pelo DSM ( 50 e 100 mg/kg) administrados durante 21 dias ininterruptos em comparação com ratos administrados com QA-ICV que receberam apenas tratamento com veículo medicamentoso. O DNP depreciou significativamente (p < 0,001) o acúmulo de TBARS cerebral e de nitritos totais e aumentou (p < 0,001) a atividade de GSH, GPx, SOD e catalase em comparação ao veículo em ratos tratados com QA-ICV.

Além disso, o tratamento com DSM (100 mg/kg) apresentou uma notável depreciação na peroxidação lipídica (p < 0.001) e intensificação em antioxidantes endógenos, como GSH (p < 0,001), GPx (p < 0,01), SOD (p < 0,05) e catalase (p < 0,05), em relação ao DSM (50 mg/kg) em ratos submetidos à QA-ICV. 3.6. Efeito do DSM na histopatologia cerebral em ratos contra QAICV.

Na análise histopatológica, foram observadas grandes alterações na arquitetura celular no grupo QA. Os xamanimais não mostraram sinais de neurodegeneração. O tratamento com QA-ICV causou alterações marcantes destacadas por picnose e formação de bolhas na membrana plasmática nos neurônios corticais e do hipocampo (CA 1 e (2). O tratamento de ratos QAICV com DSM ou DNP atenuou os sinais patológicos de neurodegeneração (Figura 7).

4. Discussão

QA (ácido 2,3-piridina dicarboxílico) é uma excitotoxina semelhante ao glutamato e é capaz de evocar neurodegeneração à medida que sua concentração aumenta com a idade [5]. Os antagonistas de NMDARs e aminofosfonatos podem proibir a excitotoxicidade neurodegenerativa do QA, o que sugere que o QA atua através de NMDARs no cérebro [9]. BBB atua como uma barreira protetora e limita a neurotoxicidade do QA.

No entanto, as evidências indicam maior acúmulo patológico de QA em diversos distúrbios neurodegenerativos.

No cérebro, a quinolinato fosforibosiltransferase (QPRT) cataboliza QA em NAD+ e dióxido de carbono. A atividade do QPRT é máxima no bulbo olfatório e mais baixa no córtex, hipocampo e estriado, onde o QA pode exercer ação neurotóxica em grande medida nessas regiões do cérebro. Essas áreas do cérebro são afetadas negativamente por numerosos distúrbios neurodegenerativos, como DA, DP, DH e esquizofrenia, que levam ao declínio cognitivo grave [9, 10].

Neste estudo, o QA foi administrado diretamente através da via ICV para superar a restrição da BBB em ratos adultos. O DSM é um flavonóide natural bioativo que demonstrou efeitos terapêuticos contra lesão cerebral traumática [16], amnésia induzida por escopolamina [17], psicose induzida por apomorfina e cetamina [18] e estresse leve crônico e imprevisível [19].

O DSM é capaz de melhorar o metabolismo da glicose, a sinalização da insulina e as complicações diabéticas, e pode prevenir o esgotamento de energia e as consequências adversas implicadas em distúrbios neurodegenerativos [14, 15].

O controle de qualidade proíbe a função mitocondrial e as vias respiratórias aeróbicas produtoras de energia nas regiões do cérebro afetadas negativamente por distúrbios neurodegenerativos [5].

Assim, no presente estudo, ratos administrados com QA-ICV no primeiro dia foram expostos ao tratamento com DSM por 21 dias consecutivos, e parâmetros bioquímicos e funções comportamentais foram avaliados.

estresse idonitrosativo e depreciação dos níveis de antioxidantes endógenos por QA-ICV na fração mitocondrial do homogeneizado de todo o cérebro. Estudos anteriores também indicam aumentos dependentes e independentes de NMDAR nos radicais livres e deterioração inflamatória por QA em animais experimentais [5, 9, 10].

Em experimentos atuais, o QA aumentou a peroxidação lipídica e os nitritos totais no cérebro. Os radicais livres e as modificações subsequentes nas biomoléculas celulares, como lipídios, proteínas e DNA, estão subjacentes às principais alterações patogênicas nos distúrbios neurodegenerativos.

Peróxidos lipídicos, como malondialdeído (MDA), 4-hidroxi 2-nominal (4-HNE), isoprostanos e acroleína são aldeídos altamente tóxicos que se acumulam prontamente na forma de bioadutos e são resistentes a mecanismos de remoção autofágicos e outros [37, 38].

Um aumento patogênico nesses adutos insolúveis viola a integridade da célula, o que leva à perda da homeostase interna, vazamento de componentes internos e morte celular [38].

Além disso, um aumento nos nitratos está diretamente correlacionado com o nível de liberação de óxido nítrico no cérebro dos ratos. A administração de QA-ICV no primeiro dia instigou uma escalada notável nos nitratos nos cérebros dos ratos. O óxido nítrico é um neurotransmissor gasoso que participa da modulação sináptica e da potencialização de longo prazo, agindo de maneira retroativa por meio de NMDARs [39, 40].

O óxido nítrico é biossintetizado pela nitricóxido sintase (NOS-neuronal) em resposta à ativação de NMDARs pós-sinápticos. Um influxo de íons de cálcio através de NMDARs pós-sinápticos ativa NOS neuronal, levando à geração de óxido nítrico que estimula a liberação pré-sináptica de glutamato na sinapse.

No entanto, a ativação excessiva do NMDAR e o resultante influxo intracelular evidente de íons de cálcio e biossíntese de óxido nítrico levam a um aumento nas espécies reativas de oxigênio (ROS), como alcoxil (RO_), superóxido (O•−2) , peroxil (RO2·), radicais hidroxila (OH•) e peróxido de hidrogênio (H2O2) e espécies reativas de nitrogênio (RNS), como anidrido nitroso (N2O3), peroxinitrito (ONOO−) e dióxido de nitrogênio (•NO2) [41–43].

O RNS modifica proteínas, levando à nitrosilação proteica e à formação de S-glutatióis e nitrosotióis. O óxido nítrico participa do dano vascular (por exemplo, lesão BBB e isquemia) e da resposta inflamatória pela ativação de macrófagos, astrócitos, metaloproteinases de matriz (MMPs) e moléculas de adesão [44, 45].

Os peroxinitritos causam a nitração dos nucleotídeos de guanina, resultando na ruptura da fita simples do DNA, desencadeando a via PARP e também proibindo enzimas de reparo do DNA [46].

O nitricóxido inibe a citocromo c oxidase e, assim, suprime a produção mitocondrial de ATP [39]. Conseqüentemente, o acúmulo excessivo de nitrito pode causar um estado de deficiência de energia no cérebro que garante ainda mais a disfunção das bombas de íons dependentes de ATP, acúmulo de íons de sódio (causando inchaço celular), aumento do influxo de cálcio e hiperexcitabilidade [47]. O aumento dos níveis de cálcio citoplasmático é o principal mecanismo de produção de ROS e RNS e a ativação das vias de morte celular dependentes de cálcio através da ativação de proteases e calpaínas [48].

Nas doenças neurodegenerativas, os radicais livres, o cálcio, a peroxidação lipídica e a mutilação do DNA estão no centro da progressão patogênica das doenças. Em estudos anteriores, a análise dos biomarcadores do estresse oxidativo revelou a amplificação de MDA, 4-HNE e 8-hidroxi-2' -desoxiguanosina (8-OHdG) no líquido cefalorraquidiano , amostras de cérebro e sangue [49, 50].

Nos experimentos atuais, o DSM (50 e 100 mg/kg) anulou significativamente a intensificação desencadeada pelo QA-ICV na peroxidação lipídica e nitritos totais na porção mitocondrial do cérebro.

Relatórios anteriores também comprovam os efeitos antiinflamatórios e atenuantes dos radicais livres do DSM em todo o cérebro de animais experimentais [16–20]. O medicamento padrão, DNP, também atenuou a peroxidação lipídica (TBARS) e os nitritos totais nos cérebros de ratos expostos ao QA-ICV.

As mitocôndrias, os peroxissomos, o retículo endoplasmático e as membranas plasmáticas são os principais locais de biossíntese de ROS e RNS [51]. A respiração celular nas mitocôndrias é o principal gerador de ERO, como superóxido e radicais hidroxila. Os peroxissomos são o centro central para a geração de peróxido de hidrogênio.

O ânion superóxido adquire um elétron do oxigênio molecular e se transforma em peróxido de hidrogênio por meio da reação de Fenton. Posteriormente, esse peróxido de hidrogênio é metabolizado pela catalase em água e oxigênio, ou pode gerar radicais hidroxila.

O H2O2 também pode gerar radicais hidroxila tóxicos através da reação de Haber-Weiss. O ânion superóxido, ao reagir com o óxido nítrico, pode formar peroxinitritos [52, 53]. Esses radicais livres desencadeiam poros de transição de permeabilidade mitocondrial (mPTP), levando ao vazamento do citocromo c, degeneração mitocondrial e morte celular.

O complexo mitocondrial I é a porta de entrada para a entrada de elétrons do NADH na cadeia respiratória. Os complexos I e II podem gerar ânions superóxido em resposta excedente a uma proporção NADH / NAD + mais alta, levando a um local FMN (mononucleotídeo de flavina) abreviado no complexo I e elétron A contribuição para a coenzima Q reduzida pela succinato desidrogenase (SDH) está associada a uma alta força protonmotriz, levando ao transporte reverso de elétrons (54). QA é um inibidor bem reconhecido das funções mitocondriais [5].

Neste estudo, o QA-ICV causou a inibição das taxas do complexo mitofragmentar cerebral I e ​​II em ratos. .e As aberrações induzidas por QA nas funções da cadeia de transporte de elétrons mitocondriais podem ser a principal causa da mutilação oxidativa no cérebro de ratos. No entanto, o DSM (50 e 100 mg/kg) ressuscitou as atividades do complexo cerebral I e ​​II em ratos desafiados com QA-ICV.

O tratamento com DNP também mostrou melhora significativa nas funções dos complexos I e II nas mitocôndrias cerebrais contra a citotoxicidade do QA-ICV. Uma análise dos níveis de antioxidantes revelou que o tratamento com DSM durante 21 dias consecutivos atenuou o declínio induzido por QA-ICV em antioxidantes endógenos, como GSH, GPx, SOD e catalase.

SOD, catalase e antioxidantes dependentes de tiol, como GSH e GPx, são a primeira linha de defesa contra a mutilação oxidativa. SOD e catalase desintoxicam ânions superóxidos e H2O2, respectivamente, e GPx e GSH estão envolvidos na remoção de H2O2 e na quebra de peróxidos lipídicos (MDA, 4- HNE, etc.) em seus respectivos álcoois, particularmente nas mitocôndrias e no citoplasma [ 55]. No presente estudo, os regimes de DSM (50 e 100 mg/kg) ou DNP aumentaram as ações antioxidantes nos cérebros de ratos que foram submetidos à neurotoxicidade do QA-ICV.

A neuroproteção por DSM e DNP foi evidente na análise de coloração H&E do hipocampo e regiões corticais de cérebros de ratos. O tratamento QA-ICV causou mudanças marcantes na arquitetura celular destacadas por picnose, inchaço das células e formação de bolhas na membrana plasmática. Estas alterações patogênicas foram atenuadas pelos tratamentos com DSM e DNP em grupos separados de ratos. No protocolo atual, o DSM (100 mg/kg) apresentou melhora significativa nos parâmetros bioquímicos contra QA-ICV e também atenuou a mutilação celular patológica evidente na análise histológica em comparação ao DSM (50 mg/kg). Portanto, esses achados retrataram os efeitos dependentes da dose do DSM no modelo de neurodegeneração em ratos QA-ICV.

Na análise semanal, um declínio significativo na massa corporal média (g), na ingestão de ração e água foi pragmático em ratos tratados com QAICV. A coordenação motora (teste rotarod) e a marcha (análise da pegada) também foram afetadas negativamente em ratos tratados apenas com QA-ICV.

A atividade locomotora não foi afetada por diversos tratamentos medicamentosos no atual conjunto de experimentos. No entanto, ratos tratados com DSM ou DNP mostraram melhora significativa na coordenação motora e na marcha contra a toxicidade do QA-ICV. O volume corporal (g), a dieta e o consumo de água também foram aumentados pelo DSM ou DNP em grupos separados de ratos tratados com QA-ICV.

Os parâmetros de memória foram avaliados usando os paradigmas NORT (dia 16) e MWM (dias 17-21). Um declínio na capacidade de discriminação de ratos tratados com QAICV no NORT apoiou a perda de memória de trabalho.

Nos ensaios de MWM, o QA-ICV causou um aumento no ELT durante quatro dias de ensaios de treinamento e uma diminuição no TSTQ nos ensaios de recuperação no 5º dia. Esses achados mostraram a depreciação da memória espacial de longo prazo de ratos pelo tratamento com QAICV. Os tratamentos DSM ou DNP atenuaram o declínio do índice de discriminação, TSTQ, e o aumento no ELT em ratos que foram desafiados com QA-ICV no dia 1. ].

O DSM (100 mg/kg) mostrou melhora dose-dependente na memória de trabalho e na memória de longo prazo em comparação ao DSM (50 mg/kg) contra QA-ICV. As descobertas mostraram que o DSM poderia melhorar funções cerebrais como memória, coordenação motora e marcha em ratos no modelo QA-ICV. Diosmina é um glicosídeo aflavonóide que possui uma porção de açúcar (rutinosídeo dissacarídeo) e um grupo aglicona diosmetina. Em vários estudos pré-clínicos, a diosmina é administrada por via parenteral (ip) [17, 56], e há uma urgência iminente para encontrar uma formulação adequada para traduzir melhor os achados pré-clínicos em ambientes clínicos.

A redução do tamanho das partículas e o aumento da área superficial podem ser utilizados para melhorar seu transporte através das barreiras biológicas [57]. Neste contexto, foi tentada uma formulação de diosmina micronizada [58] que apresentasse maior biodisponibilidade e características farmacocinéticas, no entanto, a entrega de diosmina específica ao cérebro ainda é um enorme desafio.

5. Conclusões

No actual cenário terapêutico, onde não existe nenhum medicamento disponível que possa reavivar a evolução patogénica de condições neurodegenerativas, como a DA e a DH, uma mudança para remédios naturais é pragmática. As estratégias terapêuticas atuais concentram-se apenas na melhora sintomática e nenhuma pode reverter a sequência do desenvolvimento da doença. Observamos que a diosmina ressuscitou as funções cognitivas (memória de trabalho e espacial de longo prazo) no modelo de neurodegeneração em ratos QA-ICV. A diosmina melhorou o desempenho sensório-motor e a marcha de ratos frente ao QA-ICV. A melhora observada nas funções comportamentais em ratos QA-ICV tratados com diosmina se deve principalmente à atenuação das disfunções mitocondriais e à mutilação oxidativa do cérebro. Portanto, a diosmina pode ser usada como um agente terapêutico alternativo contra distúrbios neurodegenerativos originados na disfunção mitocondrial. No entanto, investigações adicionais são obrigatórias para prever seu mecanismo neuroprotetor e aplicações em ambientes clínicos.

Disponibilidade de dados

Os dados deste estudo estão acessíveis mediante solicitação adequada do autor correspondente.

Aprovação Ética
.Todo o conjunto de experimentações em animais foi aprovado pela IAEC (Aprovação nº ASCB/IAEC/14/20/145) e foi executado através da implementação das diretrizes éticas em testes em animais emitidas pelo "Committee for Controland Supervision of Experiments on Animals (CPCSEA), GOI, Nova Deli."

Conflitos de interesse

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Referências

[1] T. Heinbockel e B. Antonei: Capítulo Introdutório: .Base Química da Função e Disfunção Neural, Base Neuroquímica da Função e Disfunção Cerebral.

[2] AV Eapen, D. Fernandez-Fern ´ Mendez, J. Georgiou et al., ´"Múltiplos papéis dos receptores NMDA contendo GluN2D na potenciação de curto prazo e potenciação de longo prazo em fatias de hipocampo de camundongos", Neuropharmacology, vol. 201, pág. 108833.2021.

[3] A. Singh, R. Kukreti, L. Saso e S. Kukreti, "Estresse oxidativo: um modulador chave em doenças neurodegenerativas", Molecules,vol. 24, não. 8, pág. 1583, 2019.[4] J. Song, X. Yang, M. Zhang, C. Wang e L. Chen, "O metabolismo do glutamato nas mitocôndrias está intimamente relacionado à doença de Alzheimer", Journal of Alzheimer's Disease, vol. 84, não. 2, pp. 557–578, 2021.

[5] R. Lugo-Huitron, P. Ugalde Muñiz, B. Pineda, J. Pedraza- ´Chaverr´ı, C. R´ıos e V. Perez-de la Cruz, "Ácido quinolínico: ´uma neurotoxina endógena com múltiplos alvos," OxidativeMedicine and Cellular Longevity, vol. 2013, Artigo ID 104024,14 páginas, 2013.

[6] TW Stone e LG Darlington, ".e quinurenina como alvo terapêutico em distúrbios cognitivos e neurodegenerativos", British Journal of Pharmacology, vol. 169, não. 6, pp. 1211–1227, 2013.

[7] VK Sharma, TG Singh, NK Prabhakar e A. Mannan, "Metabolismo da quinurenina e doença de Alzheimer: os alvos e abordagens potenciais", Neurochemical Research, 2022.

[8] DC Maddison e F. Giorgini, ".e caminho da quinurenina e doença neurodegenerativa," Seminars in Cell & Developmental Biology, vol. 40, pp.

[9] Y. Liang, S. Xie, Y. He et al., "Metabólitos da via da quinurenina como biomarcadores na doença de Alzheimer", Disease Markers, vol. 2022, Artigo ID 9484217, 15 páginas, 2022.

[10] GJ Guillemin, "Ácido quinolínico, a neurotoxina inescapável", FEBS Journal, vol. 279, não. 8, pp. 1356–1365, 2012.

[11] MK Arora, A. Kisku e A. Jangra, "Mangiferina melhora os déficits cognitivos induzidos pelo ácido intracerebroventricular-quinolínico, estresse oxidativo e neuroinflamação em ratos Wistar", Indian Journal of Pharmacology, vol. 52, não. 4, pp. 296–305, 2020.

[12] M. Sharifi-Rad, C. Lankatillake, DA Dias, et al., "Impacto dos compostos naturais em distúrbios neurodegenerativos: do pré-clínico ao farmacoterapêutico", Journal of ClinicalMedicine, vol. 9, não. 4, pág. 1061, 2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com