Estudo comparativo do teste de limite microbiano e critérios de peças de decocção de TCM entre a farmacopeia dos Estados Unidos, farmacopeia européia, farmacopeia japonesa e farmacopeia chinesa

RESUMO

OBJETIVO:Para comparar a diferença de teste de limite microbiológico e critérios deDecocção do TCMPeças entre 43 edição da Pharmacopeia dos Estados Unidos (USP43), 1 0. 0 edição da farmacopeia européia (ep1 0.} 0), 17 edição da pharmacopeia japonesa (JP17) e 2 {18 {18}}), (CHP2020), e para fornecer referência para a revisão e melhoria dos padrões microbiológicos para peças de decocção de TCM na China. METHODS:The differences in the microbial enumeration tests method (including sampling and sample preparation,selection of bacteria and culture medium,count of microorganisms and heat-resistant bacteria,etc.),tests for specified microorganisms(including sample pretreatment,enrichment, separation and identification,etc.)and microbial related limit criteria were compared among USP43,EP10.0,JP17 and CHP2020. Resultados e conclusões: Em termos de exame microbiológico das peças de decocção do TCM, USP43, Ep10.0, JP17, tiveram suas próprias disposições independentes. O CHP2020 acrescentou "Regra Geral 1108". Em termos de itens de inspeção, além da contagem total de bactérias aeróbicas e da contagem total de leveduras e moldes combinados, o CHP2020 e o EP10.0 forneceram três métodos para a inspeção de bactérias de controle (bactérias gram-negativas resistentes biliares, Escherichia coli, Salmonella). Com base, o JP17 suplementou o teste de Staphylococcus aureus; no entanto, o USP43 adicionou o método de teste de Clostridium e apresentou o conceito de avaliação de risco de microorganismos censuráveis; o CHP2020 também adicionou um novo método para contar bactérias resistentes ao calor. Em termos de critérios de limite microbiano, o USP43 foi o mais detalhado na classificação das peças de decocção do TCM, que eram mais rigorosas que EP10.0 e JP17; O CHP2020 não havia estabelecido um limite unificado para a inspeção de bactérias de controle de peças de decocção do TCM. O CHP2020 revisou o "padrão de limite microbiano para extratos de TCM e peças de decocção de TCM", mas não era perfeito em comparação com a farmacopeia dos Estados Unidos, Europa e Japão. Sugere -se que, de acordo com a situação atual de contaminação microbiana e controle de peças de decocção do TCM, o teste de limite microbiano e os critérios de produtos relacionados ao TCM em farmacopeia devem ser gradualmente melhorados, e o nível limite microbiano dos produtos correspondentes deve ser razoavelmente refinado.

Palavras -chavePeça de decocção do TCM;Farmacopeia; Teste de limite microbiano; critérios de limite; estudo comparativo

Medicamentos de ervas chinesessão produtos que podem ser usados ​​diretamente na prática clínica do TCM após o processamento de medicamentos à base de plantas chineses. A maioria deles é derivada de plantas, animais ou minerais naturais e geralmente carrega um grande número de microorganismos [1-2]. O processo de processamento da maioria dos medicamentos à base de plantas chineses é simples (como limpeza, fritura etc.), e a esterilização é incompleta, o que leva aos microorganismos patogênicos residuais [3-4]]. Além disso, durante o transporte e armazenamento, o contato com operadores e ambientes externos não limpos também aumenta a possibilidade de os medicamentos fitoterápicos chineses serem contaminados por microorganismos patogênicos, afetando assim sua segurança [5]. A contaminação microbiana de medicamentos à base de plantas chineses não recebeu atenção suficiente e há uma falta de pesquisa sobre as mudanças nas populações microbianas durante o processamento, o que levou à falta de avaliação de segurança microbiana dos medicamentos à base de plantas chinesas. Muitos microorganismos patogênicos potenciais (como bactérias resistentes ao calor e toxinas bacterianas) não foram efetivamente controladas, aumentando o risco de pacientes imunocomprometidos usando medicamentos fitoterápicos chineses [6]. Embora a edição de 2015 da Farmacopeia Chinesa (Volume 1) inclua uma variedade de métodos de identificação e inspeção para a análise das propriedades físicas e químicas dos medicamentos fitoterápicos chineses, os métodos de inspeção específicos e os padrões limitados para microorganismos relacionados estão ausentes há muito tempo. Ao mesmo tempo, nas regras gerais da edição de 2015 da Farmacopeia Chinesa (Volume 4), exceto para medicamentos fitoterápicos chineses que são importados diretamente, não são especificados itens de inspeção microbiana para outras formas de medicamentos fitoterápicos chineses [7].

COA de um medicamento chinês da empresa de biotecnologia da China

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Medicina chinesaé chamadoremédio à base de plantasNa Europa, medicina bruta no Japão e suplementos nutricionais nos Estados Unidos.

Embora seu conceito não seja exatamente o mesmo que o dos medicamentos fitoterápicos chineses no meu país [{{0}}], o farmacopeia europeu 1 0. {{}}} (Ep10.0) [10] o patrimônio japonês 17 (JP17) [11] e o pharmacopoia japonês 17 (JP17) [11] [11] e o pharmacopoia 17 (JP17) [11] e o Pharmacopoia JapaneSeia 17 (JP17) [11] [11] e os Estados Unidos [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10] [10) e os Estados Unidos [JP17) [11] e os Estados Unidos [10] [10] [10] [10] [10) e os Estados Unidos [JP17) [11] e os Estados Unidos [10] Métodos de inspeção microbiana e padrões limitados para produtos relacionados (medicamentos à base de plantas, medicamentos grosseiros ou suplementos nutricionais). A edição de 2020 da Farmacopeia Chinesa (CHP2020) (volume 4) [13] adicionou o "Método de teste de limite microbiano para peças de medicina de ervas chinesas" (Regra Geral 1108), mas os padrões de limite microbiano relevantes ainda são incompletos e não há um regulamento limitado unificado e claro sobre os padrões microbianos para a decocção do tipo de regulação chinesa. This paper compares the differences between USP43, EP10.0, JP17 and ChP2020 in terms of microbial test methods and limit standards for Chinese herbal medicine pieces, understands the revision direction of the microbial standards for Chinese herbal medicine pieces, and discusses the necessity of establishing microbial limits for Chinese herbal medicine pieces according to their risk levels, in order to provide a reference for the revision and improvement of relevant standards for microbial control of Chinese peças de medicina de ervas.

1 contagem microbiana de medicamentos fitoterápicos chineses

After comparing the microbial testing methods related to Chinese herbal medicines in EP10.0, JP17, USP43 and ChP2020, the author found that although the first three pharmacopoeias have been internationally coordinated and integrated in the microbial testing of non-sterile products, the three have their own independent chapters on the inspection of microorganisms in Chinese herbal Medicamentos, como Ep10.0 "2.6.12" e "2.6.31", JP17 "5.02", USP43 "2021" e "2022", enquanto o CHP2020 adicionou "Princípio Geral 1108" para a detecção de microorganismos nos medicamentos fitos chineses. Em termos de teste de itens, os quatro farmacopeias especificam os métodos de inspeção para a contagem microbiana aeróbica total (TAMC) e a contagem total de leveduras e moldes combinados (TYMC). As principais diferenças são refletidas na amostragem e amostragem, espécies bacterianas e meio de cultura e métodos de contagem microbiana. Consulte a Tabela 1 para obter detalhes.

1.1 Amostragem e amostragem

Os medicamentos fitoterápicos chineses são de vários tipos, com diferentes formas, texturas e tamanhos. Além disso, a contaminação microbiana é desigual, portanto a representatividade da amostragem e inspeção é crucial [14]. As quatro farmacopeias têm diferenças óbvias nas disposições de "amostragem e amostragem". Entre eles, Ep1 0. JP17 "5.02" [11] estipula quatro métodos de amostragem para medicamentos à base de plantas chineses: (1) para amostras de pequeno volume ou em pó, pegue 50-250 g de amostra e misture; (2) Para amostras de grande volume, pegue 250-500 g de amostra e misture e pique; (3) Para amostras únicas inferiores a 100 g, tome pelo menos 5 ou 500 g, pique e misture; (4) Para amostras na forma de soluções ou preparações, misture -as e coloque amostras diretamente. Tome 10 g ou 10 ml da amostra mista como amostra para inspeção. CHP2020 "Regra Geral 1108" [13] afirma que ", a menos que especificado de outra forma, as amostras de teste devem ser desenhadas de acordo com o método para amostrar materiais medicinais e decocção ('Regra geral 0211'). Para peças de decocagem de grande porte, de que pacote de pacote de pacote é de que são extraídas de cada pacote, de que pacote, de que são as peças de pacote de que são de que as peças pequenas e de pacote de pacote de 5 a 500 g de pacote. volume;

Impressão digital de um medicamento chinês da empresa de biotecnologia da China

1.2 Seleção de cepas e mídia de cultura

Em termos de seleção de tensão, o USP43 lista cinco microorganismos, incluindo Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 8739, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans atcc 1 0 231 e Aperegils Teste [12]. EP10.0 and JP17 replaced Escherichia coli with Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, and gave the above-mentioned strains the equivalent strain numbers of the National Collections of Industrial, Food and Marine Bacterial (NCIMB), the Collection de L'Institut Pasteur of Institut Pasteur (CIP), and the NITE Biological Resource Center (NBRC). Esta disposição é consistente com a proposta de coordenação do Conselho Internacional de Harmonização (ICH) [10-11].
As cepas de CHP2 0 20 são as mesmas que as de Ep10.0 e JP17, mas apenas as cepas de CMCC são permitidas [13].
Em termos de seleção de meios de cultura, além de usar a mídia de cultura TSA e a mídia de cultura da SDA como mídia de cultura de contagem convencional, considerando que os medicamentos herbais chineses geralmente contêm uma grande quantidade de substâncias insolúveis e uma alta probabilidade de contaminação bacteriana e fúngica, os fatores acima podem afetar os resultados da contagem de TAMC e TMYC. O JP17 também estipula que uma certa concentração de TTC pode ser adicionada ao meio de cultura da TSA para distinguir colônias bacterianas e outras impurezas; Se o crescimento dos fungos afetar os resultados da contagem de TAMC da amostra, a anfotericina B poderá ser adicionada ao meio de cultura da TSA para inibir o crescimento fúngico; Se os fungos se espalharem e crescerem em meios de cultura SDA contendo antibióticos, Rose Bengala poderá ser adicionada para inibir a propagação do fenômeno [11]. O CHP2020 estipula que, quando a contagem do TYMC é afetada pelo crescimento bacteriano, os meios de cultura SDA contendo antibióticos (como cloranfenicol, gentamicina) ou outros meios de cultura seletivos (como o meio de ágar de sódio de rosa bengala) podem ser usados ​​[13].
No entanto, nem o USP43 nem o EP1 0. 0 menciona explicitamente os requisitos relevantes.

1.3 Método de contagem microbiana

Em termos de métodos de contagem microbiana, Ep1 0. 0 e JP17 especificam quatro métodos de contagem, ou seja, método de filtração da membrana, método de contagem de placas (vazamento, revestimento) e método MPN [10-11]; O USP43 não especifica o método de contagem de placas (derramamento) [13], enquanto o CHP2020 especifica apenas o método de contagem de placas (derramamento) [13]. Como o método MPN tem baixa precisão e não é extremamente confiável para a contagem de fungos, o método MPN é adequado apenas para situações em que outros métodos de contagem não são aplicáveis ​​e só podem ser usados ​​para contagem de TAMC. Em termos de aplicabilidade do método, uma investigação de aplicabilidade de método deve ser realizada antes do teste. O USP43 exige que a taxa de recuperação da contagem de bactérias aplicável seja superior a 70%[12], e os outros três farmacopeias adotam o requisito de um fator de recuperação de 2 [{12}}, 13].
Os requisitos para a temperatura cultural da contagem de TAMC e a contagem de TYMC são consistentes em cada farmacopeia, mas os regulamentos sobre o tempo de cultura e a faixa apropriada de contagem de colônias são um pouco diferentes.

1.4 Bactérias resistentes ao calor contagem

Os medicamentos à base de plantas chineses geralmente são aquecidos antes do consumo. Embora o aquecimento possa reduzir o bioburden da amostra e reduzir o risco de patogenicidade, o aquecimento não pode matar as bactérias resistentes ao calor nos medicamentos fitoterápicos chineses. Também pode levar facilmente à deterioração e acumulação de biotoxinas do produto. Portanto, o CHP2020 adicionou um item de contagem de bactérias resistentes ao calor, que é definido como "o termo geral para microorganismos detectados pelo método total de contagem aeróbica após ser colocado em um banho de água (98-100}) por 30 minutos" [13]. Este método visa a decocção medicamentos fitoterápicos chineses do tipo decocção e avalia os microorganismos residuais nesses medicamentos à base de plantas chineses após o tratamento do tratamento; Os outros três farmacopeias não incluem métodos relevantes.