Coagulação, Receptores Ativados por Protease e Doença Renal Diabética: Lições de Camundongos Deficientes em ENOS

Contato:joanna.jia@wecistanche.com/WhatsApp: 008618081934791

Coagulação, Receptores Ativados por Protease e Doença Renal Diabética: Lições de Camundongos Deficientes em eNOS

Yuji Oe,1 Mariko Miyazaki1 e Nobuyuki Takahashi2

1Divisão de Nefrologia, Endocrinologia e Medicina Vascular, Escola de Pós-Graduação da Universidade de Tohoku

Medicina, Sendai, Miyagi, Japão

2Divisão de Farmacologia Clínica e Terapêutica, Escola de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas da Universidade de Tohoku e Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Sendai, Miyagi, Japão

A disfunção endotelial do óxido nítrico sintase (eNOS) é conhecida por exacerbar a progressão e o prognóstico da doença renal diabética (DRD). Um dos mecanismos pelos quais isso é alcançado é que baixos níveis de eNOS estão associados à hipercoagulabilidade, o que promove lesão renal. Na cascata de coagulação extrínseca, o fator tecidual (fator III) e os fatores de coagulação a jusante, como o fator ativo X (FXa), exacerbam a inflamação por meio da ativação dos receptores ativados por protease (PARs). Recentemente, foi demonstrado que a ausência ou redução da expressão de eNOS em camundongos diabéticos, como modelo de DKD avançada, aumenta os níveis de fator tecidual renal e as expressões de PAR1 e 2 em seus rins. Além disso, a inibição farmacêutica ou deleção genética de fatores de coagulação ou PARs melhorou a inflamação na DKD em camundongos sem eNOS. Nesta revisão, resumimos a relação entre eNOS, coagulação e PARs e propomos uma nova opção terapêutica para o manejo de pacientes com DKD.

Palavras-chave: glomeruloesclerose diabética; fator Xa; inflamação; fator tecidual

Tohoku J. Exp. Med., 2021 setembro, 255 (1), 1-8.

Extrato de Cistanche pode ajudar muito bem com doenças renais

O número de pacientes com doença renal diabética (DRD) está aumentando em todo o mundo (de Boer et al. 2011; Kainz et al. 2015; Ogurtsova et al. 2017). A DKD é uma das principais causas de mortalidade em pacientes com complicações diabéticas (Afkarian et al. 2013). Além disso, a DKD é pró-agressiva e é a principal causa de doença renal terminal que requer terapia de substituição renal (Gregg et al. 2014; Liyanage et al. 2015). No Japão, a nefropatia diabética é responsável por mais de 39% dos novos pacientes em diálise (Nitta et al. 2020). Portanto, o desenvolvimento de novas opções terapêuticas é necessário para o manejo de pacientes com DKD.

Há um interesse crescente no papel do sistema de coagulação na patogênese da DKD. A hipercoagulabilidade está associada à DKD (Goldberg 2009; Domingueti et al. 2016). Um nível elevado de fibrinogênio no sangue mostrou estar associado à baixa taxa de filtração glomerular estimada, alta proteinúria e lesão histológica grave, e foi um preditor da progressão para doença renal terminal (Dalla Vestra et al. 2005; Pan et al. al. 2018; Zhang et al. 2018). Alguns estudos mostraram uma correlação entre o nível de D-dímero, um produto de degradação da fibrina, e disfunção renal na DKD (Domingueti et al. 2018; Pan et al. 2018). A hipercoagulabilidade na DKD é provavelmente determinada por múltiplos fatores. Por exemplo, o sistema renina-angiotensina-aldosterona ativa o fator tecidual (TF, fator III) e aumenta os eventos trombóticos (Dielis et al. 2005). Caso contrário, hiperglicemia, dislipidemia, inflamação ou disfunção endotelial estão envolvidas no estado pró-trombótico sob a patogênese da DKD (Goldberg 2009).

A disfunção endotelial está presente na DKD que progride para complicações microvasculares (Goldberg 2009; Nakagawa et al. 2011). A produção prejudicada de óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) ou atividade reduzida da eNOS (por exemplo, fosforilação prejudicada da eNOS) é uma marca registrada da disfunção endotelial na DKD (Nakagawa et al. 2011; Cheng et al. 2012). Mostramos que uma perda de expressão de eNOS estava ligada à elevação do nível de TF e da atividade do sistema de coagulação extrínseca (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a), que está intimamente associada a eventos trombóticos em pacientes com insuficiência renal crônica doenças (Kolachalama et al. 2018).

proteases de coagulação, como fator ativo FVII (FVIIa), fator ativo (FXa) e trombina, que estão presentes na cascata de coagulação extrínseca, mediam a lesão tecidual por meio de um mecanismo dependente de receptor ativado por protease (PAR) (Madhusudhan et al. 2016; Posma et al. 2019). Nesta revisão, resumimos os achados obtidos em camundongos diabéticos sem eNOS e discutimos a relação entre a via de coagulação-PAR, os níveis de eNOS e a patogênese da DKD.

Via de Receptores Ativados por Fator Tecidual/Protease

O fator tecidual (TF), conhecido como fator III, é uma proteína transmembrana de 47 kDa que interage com o fator VII (FVII) (Grover e Mackman 2018). O complexo TF/FVIIa é um ativador da cascata de coagulação extrínseca e catalisa a ativação de FX e FIX. O FXa e o cofator V ativado (FVa) formam um complexo protrombótico que gera trombina. Finalmente, a trombina converte o fibrinogênio em fibrina, resultando na formação de trombos (Grover e Mackman 2018). O TF é expresso em células musculares lisas vasculares e fibroblastos adventícios. Sob condições inflamatórias, sua expressão é induzida em células endoteliais ou células circulantes, como monócitos (Østerud e Bjørklid 2006).

Os receptores ativados por protease (PARs) são membros da superfamília de receptores acoplados à proteína G, compreendendo quatro proteínas PAR (PAR1-4). Os PARs sofrem clivagem por proteases na extremidade N-terminal e são ativados após a ligação a um novo N-terminal contendo um ligante amarrado. Os quatro membros dos PARs (PAR1-4) são ativados por proteases de coagulação específicas: o complexo TF e FVIIa ativa PAR2, o fator Xa ativa PAR1 e PAR2 e a trombina ativa PAR1, PAR3 e PAR4 (Camerer et al. 2000; Coughlin 2005; Rothmeier e Ruf 2012; Zhao et al. 2014). A relação entre TF, proteases de coagulação e PARs é mostrada na Fig. 1.

Os PARs são amplamente expressos nas células renais e estão envolvidos na fisiopatologia da lesão renal. Ambos PAR1 e PAR2 são expressos em células endoteliais glomerulares, células mesangiais e células tubulares renais derivadas de humanos ou camundongos; PAR2, PAR3 e PAR4 são expressos em podócitos humanos; PAR1, PAR3 e PAR4 são expressos em podócitos murinos (Tanaka et al. 2005; Vesey et al. 2005; Madhusudhan et al. 2012; Dong et al. 2015; Madhusudhan et al. 2016).

Embora os efeitos nocivos ou protetores dos PARs na lesão renal tenham sido demonstrados, dados acumulados sugerem que os PARs exacerbam a inflamação estimulando a produção de citocinas e quimiocinas (Rothmeier e Ruf 2012; Isermann 2017; Posma et al. 2019). Consistente com esse achado, os agonistas de PAR1 e PAR2 promovem a expressão de mediadores inflamatórios, como proteína quimiotática de monócitos 1 (MCP1) e inibidor do ativador de plasminogênio-1 (PAI-1), e pró-fibróticos moléculas em células tubulares endoteliais, mesangiais e renais (Vesey et al. 2005; Vesey et al. 2013; Ellinghaus et al. 2016; Waasdorp et al. 2016; Oe et al. 2019). Em estudos in vivo, a falta de PAR1 ou a presença de inibidores de PAR1 reduziu a inflamação em modelos de glomerulonefrite crescente ou lesão renal obstrutiva (Cunningham et al. 2000; Waasdorp et al. 2019; Lok et al. 2020). Da mesma forma, os efeitos terapêuticos da inibição de PAR2 em lesões renais foram acompanhados por uma redução na inflamação nos rins (Hayashi et al. 2016; Du et al. 2017; Han et al. 2019; Watanabe et al. 2019).

Polimorfismos endoteliais de óxido nítrico sintase em DKD

A óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) é uma das três isoformas da NOS e contribui para a produção de NO no endotélio vascular (Walford e Loscalzo 2003). NO produzido pela eNOS no endotélio vascular

Fig. 1. Relação entre fatores de coagulação e receptores ativados por protease (PARs).

Na cascata de coagulação extrínseca, o fator tecidual (TF) e o complexo FVII ativo (FVIIa) ativam o receptor 2 ativado por protease (PAR2), o FX ativo (FXa) ativa tanto PAR1 quanto PAR2, e a trombina tem como alvo PAR1, PAR3 e PAR4. A clivagem da sequência N-terminal de PARs por proteases de coagulação revela uma nova sequência N-terminal que atua como um ligante amarrado e promove inflamação.

desempenha um papel crucial na regulação do relaxamento vascular, anti-inflamação e prevenção da formação de trombos (Walford e Loscalzo 2003). A expressão prejudicada da eNOS está associada ao desenvolvimento de DKD. Metanálises recentemente conduzidas em humanos revelaram que G894T (rs1799983), C-786T (rs2070744) e íntron 4b/4a ​​(rs869109213) em genes eNOS (NOS3) estão intimamente associados com o desenvolvimento de DKD (Dellamea et al. 2014; Zhang et al. 2015; Dong et al. 2018). Destas variantes, o papel do polimorfismo G894T (Glu298Asp) na função da eNOS foi bem caracterizado. A produção reduzida de NO ou acúmulo de nitrito foi indicada em células CHO transfectadas com 298Asp em comparação com aquelas com 298Glu (Noiri et al. 2002). Coletivamente, esses resultados indicam que a redução da produção de NO pela disfunção da eNOS é importante para a progressão da DKD em humanos.

Camundongos diabéticos sem eNOS como modelo de nefropatia diabética humana

O estabelecimento de modelos pré-clínicos confiáveis ​​que se assemelham à DKD humana é essencial para o estudo de novas opções terapêuticas. Com base nas evidências que mostram uma associação entre o polimorfismo da eNOS e a DKD, vários estudos demonstraram que os modelos knock-out da eNOS de DM tipo I e tipo II são alguns dos modelos de sucesso que mimetizam a DKD humana (Brosius et al. 2009; Azushima et al. 2018). Foi demonstrado que camundongos diabéticos induzidos por estreptozotocina sem eNOS desenvolvem albuminúria grave, expansão mesangial, espessamento da membrana basal glomerular e hialinose arteriolar, assemelhando-se à DKD humana (Nakagawa et al. 2007). Da mesma forma, camundongos diabéticos tipo II (DB/DB) sem eNOS apresentaram glomeruloesclerose grave e albuminúria (Zhao et al. 2006).

TF elevado em camundongos diabéticos sem eNOS

O NO inibe a formação de trombos e a agregação plaquetária (Walford e Loscalzo 2003). Como a formação de trombos glomerulares foi observada em camundongos diabéticos sem eNOS (Nakagawa et al. 2007), a expressão prejudicada de eNOS provavelmente está associada ao aumento da coagulação dependente de TF. A associação entre eNOS e TF na DKD foi abordada em nossos relatórios anteriores (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a; Oe et al. 2016) (Fig. 2).

Expressão reduzida ou falta de eNOS aumenta a atividade renal de TF em camundongos Akita diabéticos

Caracterizamos a expressão de TF em camundongos Akita diabéticos (Ins2Akita/plus), um modelo de DM tipo I, com vários níveis de expressão de eNOS (eNOS plus/plus, eNOS plus/- e eNOS-/-) (Wang et al. 2011a ). Descobrimos que a gravidade da DKD estava associada à redução da expressão da eNOS. A excreção urinária de albumina, glomeruloesclerose e redução da taxa de filtração glomerular foram exacerbadas na seguinte ordem: eNOS plus / plus ; Ins2Akita/ mais < enos="" mais="" ;="" ins2akita/="" mais="">< enos-/-;="" ins2akita/="" mais="" .="" curiosamente,="" a="" expressão="" e="" atividade="" de="" tf="" renal="" foram="" aumentadas="" em="" enos="" mais="" ;="" ins2akita/plus="" e="" enos-/-;="" camundongos="" ins2akita/plus="" comparados="" com="" aqueles="" em="" enos="" plus/plus;="" ratos="" ins2akita/plus.="" a="" deposição="" de="" fibrina="" glomerular="" também="" foi="" notável="" em="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/plus="" e="" enos-/-="" ;="" ratos="" ins2akita/plus.="" além="" disso,="" a="" expressão="" de="" mrna="" de="" tf="" renal="" foi="" correlacionada="" com="" a="" gravidade="" da="" doença,="" excreção="" urinária="" de="" albumina="" e="" expressão="" de="" citocinas="" inflamatórias="">

Anticorpos Neutralizantes Contra TF Melhoram a Inflamação em Rins Diabéticos em

Ratos Knockout eNOS

Um aumento na coagulação dependente de TF está associado ao aumento da inflamação (Witkowski et al. 2016). A inibição do sistema de coagulação dependente de TF melhorou doenças inflamatórias, como sepse induzida por LPS (Pawlinski et al. 2010). Para elucidar a relação causal entre inflamação e TF na DKD, examinamos o efeito de curto prazo de anticorpos neutralizantes contra TF na inflamação dos rins diabéticos em camundongos deficientes em eNOS (Li et al. 2010). Os resultados mostraram que a administração de anticorpos anti-TF reduziu marcadamente os níveis de expressão renal de genes relacionados à inflamação e fibrose, como Tnfa, Ccl2, Tgfb e Col4 mRNA em rins de camundongos por quatro dias após a neutralização de TF.

Inibidor de FXa da coagulação melhora a lesão renal em camundongos diabéticos sem eNOS

A coagulação FXa, localizada a jusante de TF/VIIa, também contribui para a inflamação através das vias dependentes de PAR. Seu papel na DKD foi demonstrado em vários modelos animais. Sumi et al. (2011) demonstraram que fondaparinux, um inibidor de FXa, reduziu os níveis de proteína urinária, hipertrofia glomerular e deposição de fibrina em camundongos DB/DB. O efeito terapêutico da inibição de FXa em camundongos DKD sem eNOS foi demonstrado por nosso grupo (Oe et al. 2016). Edoxabana (50 mg/kg/dia), um inibidor oral de FXa, foi administrado a eNOS-/-; Camundongos Ins2Akita/plus por três meses, e os resultados mostraram melhora das lesões histológicas, como proliferação da matriz mesangial. Os níveis de expressão de genes inflamatórios nos rins foram reduzidos pelo edoxaban (Tabela 1). FXa ativa tanto PAR1 quanto PAR2. Para elucidar o mecanismo de lesão renal mediada por FXa, demonstramos que os efeitos anti-inflamatórios dos inibidores de FXa são semelhantes aos encontrados em camundongos PAR2-/- e camundongos PAR2-/- com inibidores de FXa . Esses achados sugeriram que o FXa provavelmente causou inflamação por meio de um mecanismo PAR{16}}dependente na DKD. Em contraste, edoxaban não melhorou a lesão glomerular em eNOS plus/plus; Camundongos Ins2Akita/plus, sugerindo que o efeito terapêutico da inibição de FXa foi associado à hipercoagulabilidade dependente de eNOS em camundongos diabéticos tipo I.

Outros fatores de coagulação na DKD

Como a trombina tem como alvo o PAR1, que progride a inflamação vascular (Chen e Dorling 2009), a trombina provavelmente exacerba a DKD. No entanto, os papéis protetores ou prejudiciais da trombina na patogênese da DKD foram demonstrados; a trombina de baixa dose (50 pM) é evitada, enquanto a trombina de alta dose (20 nM) agrava a apoptose induzida por glicose em podócitos (Wang et al. 201lb). Os efeitos de inibidores de trombina, como a dabigatrana, em camundongos diabéticos sem eNOS devem ser elucidados no futuro.

O fibrinogênio está envolvido em vários estados inflamatórios. Curiosamente, a redução parcial ou a ausência de fibrinogênio foi benéfica para modelos de isquemia-reperfusão renal ou fibrose renal obstrutiva (Sorensen et al.2011; Craciun et al, 2014). Como a deposição de fibrina glomerular é aumentada em camundongos diabéticos sem eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al.2010; Wang et al.201la), elucidar seu papel na patogênese da DKD merece mais pesquisas.

Tabela 1. Efeitos do fator tecidual (TF), fator de coagulação Xa (FXa) e inibição do receptor ativado por protease (PAR) em camundongos com doença renal diabética (DKD) com expressão de eNOS reduzida ou ausente.

Expressão de PAR1 e PAR2 em camundongos diabéticos sem eNOS

A expressão aumentada de PARs está associada a uma lesão renal. Nós e outros demonstramos que os níveis de expressão de Par1 e/ou Par2 mRNA foram aumentados em modelos animais com nefropatia diabética, lesão renal induzida por adenina, fibrose renal obstrutiva e lesão renal induzida por cisplatina (Chung et al. 2013; Hayashi et al. 2016; Oe et al. 2016; Watanabe et al. 2019). Além disso, os níveis de proteína PAR2 glomerular foram aumentados em camundongos DB/DB, um modelo de DM tipo II (Sumi et al. 2011). Demonstramos a associação entre a expressão de PAR e a deficiência de eNOS em camundongos diabéticos (Oe et al. 2016). O nível de expressão do mRNA Par1 foi significativamente maior em eNOS−/−; camundongos Ins2Akita/ plus do que em eNOS−/−; Camundongos Ins2Akita/ plus e não DM. Da mesma forma, a expressão de Par2 foi significativamente maior em eNOS−/−; Camundongos Ins2Akita/ plus do que em camundongos não DM. Em contraste, os níveis de mRNA de Par4 não diferiram entre os genótipos. A falta de eNOS exacerba a inflamação na DKD (Wang et al. 2011a). Como as citocinas pró-inflamatórias aumentam os PARs (Nystedt et al. 1996), a inflamação elevada causada pela falta de eNOS provavelmente induz a expressão renal de Pars na DKD. Coletivamente, os resultados de nossos estudos sugeriram que os níveis de expressão de PAR1 e PAR2, semelhante ao caso de TF, estavam aumentados em rins diabéticos quando a eNOS estava ausente (Fig. 2).

A deleção de PAR2 melhorou a lesão renal diabética em camundongos com eNOS reduzido

Nós e outros abordamos o papel do PAR2 na DKD em estudos anteriores. A deleção de Par2 não afetou a lesão glomerular em camundongos Akita de tipo selvagem diabéticos (Ins2Akita/plus) com eNOS (Oe et al. 2016). Além disso, camundongos diabéticos induzidos por STZ sem PAR2 apresentaram albuminúria reduzida em comparação com camundongos diabéticos do tipo selvagem, mas aumentaram a expansão mesangial (Waasdorp et al. 2017). Coletivamente, esses resultados demonstram que não há efeitos terapêuticos ou efeitos terapêuticos leves da inibição de PAR2 na lesão renal nos modelos inicial e leve de DKD. Em contraste, demonstramos os efeitos da deficiência de PAR2 na DKD em camundongos Akita diabéticos com expressão reduzida de eNOS (eNOS mais /-; Ins2Akita/ mais )(Oe et al. 2016). A falta de PAR2 reduziu significativamente os níveis de excreção urinária de albumina, expansão mesangial e espessura do GBM. Os níveis de expressão de genes pró-inflamatórios e relacionados à fibrose, incluindo Tnfa, Tgfb e Col4, também foram reduzidos em rins de camundongos. Esses achados sugerem que o PAR2 é patogênico não no início, mas na lesão glomerular diabética relativamente avançada causada pela deficiência de eNOS (Tabela 1).

Bloqueio duplo de PAR1 e PAR2 em camundongos diabéticos com eNOS reduzido

Demonstramos que PAR1 e PAR2 contribuem cooperativamente para a patogênese da DKD (Mitsui et al. 2020). Neste estudo, camundongos Akita machos diabéticos tipo I heterozigotos para eNOS (Ins2Akita/ plus ; eNOS plus /-) foram usados ​​como modelo de DKD. Esses camundongos foram tratados com veículo, antagonista de PAR1 (E5555, 60 mg/kg/dia), antagonista de PAR2 (FSLLRY, 3 mg/kg/dia) ou E5555 mais FSLLRY por 4 semanas. A administração isolada do antagonista de PAR1 ou PAR2 atenuou a lesão glomerular, como expansão mesangial e deposição de colágeno IV, em comparação com a administração do veículo. Efeitos terapêuticos sinérgicos da inibição de PAR1 e PAR2 foram observados, e a razão albumina urinária para creatinina foi significativamente reduzida quando PAR1 e PAR2 foram bloqueados com E5555 mais FSLLRY em comparação com a administração do veículo. Além disso, o bloqueio duplo de PAR1 e PAR2 por E5555 mais FSLLRY melhorou sinergicamente a lesão histológica, incluindo expansão mesangial, infiltração de macrófagos glomerulares e deposição de colágeno tipo IV. Os níveis de expressão de genes relacionados à inflamação e fibrose nos rins também foram reduzidos (Tabela 1).

Nós nos concentramos nos efeitos pró-inflamatórios dos agonistas de PAR1 e PAR2 em células endoteliais humanas (Mitsui et al. 2020). Os resultados mostraram que a estimulação com agonistas de PAR1 e PAR2 aumentou sinergicamente os níveis de expressão de MCP1 e PAI1 mRNA. O efeito do agonista de PAR1 foi bloqueado por um inibidor de NF-κB, enquanto o do agonista de PAR2 foi bloqueado por inibidores de NF-kB e MAPK. Coletivamente, PAR1 e PAR2 contribuem cooperativamente para a inflamação vascular e DKD através de diferentes vias de sinalização (Fig. 3).

Conclusão

Nesta revisão, focamos na relação entre a via de coagulação da protease-PAR e a deficiência de eNOS em camundongos diabéticos. A baixa produção de eNOS está ligada à hipercoagulabilidade e aumento da sinalização PAR, que são prejudiciais na DKD. Esses achados podem indicar seus papéis patológicos na fase avançada ou tardia da DKD (por exemplo, com insuficiência renal e/ou proteinúria maciça). Os inibidores orais de FXa são amplamente utilizados para prevenir a trombose (Patel et al. 2011; Robertson et al. 2015). Seu uso no tratamento da DKD é uma opção promissora. Além disso, alguns antagonistas de PAR1, incluindo atopaxar e vorapaxar, podem ser usados ​​na terapia antiplaquetária para prevenir a síndrome coronariana aguda

Fig. 3. Funções distintas de PAR1 e PAR2 na inflamação vascular e na doença renal diabética (DKD).

Em células endoteliais humanas, o agonista PAR1 aumenta a expressão de quimiocinas e citocinas pela via de sinalização NF-κB, enquanto o agonista PAR2 as aumenta pelas vias de sinalização NF-κB e MAPK. PAR1 e PAR2 sinergicamente causam inflamação vascular por vias distintas na DKD.

(Goto et al. 2010; Tricoci et al. 2012). Além disso, há um progresso notável no desenvolvimento de antagonistas de PAR2 (Lim et al. 2013; Cheng et al. 2017; Jiang et al. 2018), e eles podem ser novas opções terapêuticas para tratar pacientes com DKD.

Agradecimentos

Este estudo foi apoiado pela Gonryo Medical Foundation. Gostaríamos de agradecer à Editage (https://www.editage.com) pela edição em inglês.

Conflito de interesses

Os autores declaram não haver conflito de interesses.

Referências

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. & de Boer, IH (2013) Doença renal e risco aumentado de mortalidade no diabetes tipo 2. Geléia. Soc. Nephrol., 24, 302-308.

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018) Modelagem de nefropatia diabética em camundongos. Nat. Rev. Nephrol., 14, 48-56.

Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki, M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA , Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K., et ai. (2009) Modelos de camundongos de nefropatia diabética. Geléia. Soc. Nephrol., 20, 2503-2512.

Camerer, E., Huang, W. & Coughlin, SR (2000) Ativação dependente de fator tecidual e fator X do receptor 2 ativado por protease pelo fator Vila. Proc. Nacional Acad. Sci. EUA, 97, 5255-5260.

Chen, D. & Dorling, A. (2009) papéis críticos para a trombina na inflamação aguda e crônica. J. Thromb. Hemost., 7 Supl 1, 122-126.

Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. & Harris, RC (2012) A melhoria da atividade endotelial de óxido nítrico sintase retarda a progressão da nefropatia diabética em camundongos DB/DB. Kidney Int., 82, 1176-1183.

Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P., et ai. (2017) Insight estrutural na modulação alostérica do receptor ativado por protease 2. Nature, 545, 112-115.

Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD & Muruve, DA (2013) A transativação do receptor ativado por proteinase-2 do receptor do fator de crescimento epidérmico e das vias de sinalização do receptor do fator de crescimento transformador contribui para a fibrose renal. J. Biol. Chem., 288, 37319-37331.

Coughlin, SR (2005) Receptores ativados por protease na hemostasia, trombose e biologia vascular. J. Thromb. Hemost., 3, 1800-1814.

Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL, Bijol, V., Humphreys, BD & Vaidya, VS (2014) A depleção farmacológica e genética do fibrinogênio protege da fibrose renal. Sou. J. Fisiol. Renal Physiol., 307, F471-484.

Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Holdworth, SR & Tipping, PG (2000) O receptor 1 ativado por protease medeia a inflamação renal mediada por células dependente de trombina na glomerulonefrite crescente. J. Exp. Med., 191, 455-462.

Dalla Vestra, M., Mussap, M., Gallina, P., Bruseghin, M., Cernigoi, AM, Saller, A., Plebani, M. & Fioretto, P. (2005) Marcadores de fase aguda de inflamação e glomerular estrutura em pacientes com diabetes tipo 2. Geléia. Soc. Nephrol., 16 Supl 1, S78-82.

de Boer, IH, Rue, TC, Hall, YN, Heagerty, PJ, Weiss, NS & Himmelfarb, J. (2011) Tendências temporais na prevalência da doença renal diabética nos Estados Unidos. JAMA, 305, 2532-2539.

Dellamea, BS, Pinto, LC, Leitão, CB, Santos, KG & Canani, LH (2014) Polimorfismos do gene da sintase do óxido nítrico endotelial e risco de nefropatia diabética: uma revisão sistemática e meta-análise. BMC Med. Genet., 15, 9.

Dielis, AW, Smid, M., Spronk, HM, Hamulyak, K., Kroon, AA, ten Cate, H. & de Leeuw, PW (2005) O paradoxo protrombótico da hipertensão: papel da renina-angiotensina e calicreína- sistemas de cinina. Hipertensão, 46, 1236-1242.

Domingue, CP, Dusse, LM, Carvalho, M., de Sousa, LP, Gomes, KB & Fernandes, AP (2016) Diabetes mellitus: a ligação entre estresse oxidativo, inflamação, hipercoagulabilidade e complicações vasculares. J. Complicações do Diabetes, Coagulação, eNOS e DKD 7

30, 738-745.

Domingue, CP, Fóscolo, RB, Dusse, LMS, Reis, JS, Carv- também, MDG, Gomes, KB & Fernandes, AP (2018) Associação de diferentes biomarcadores de função renal com níveis de D-dímero em pacientes com diabetes tipo 1 mellitus (biomarcadores renais e D-dímero no diabetes). Arco. Endocrinol. Metab., 62, 27-33.

Dong, J., Peng, Y., Wang, Y. & Zhang, Y. (2018) Os papéis dos polimorfismos do gene endotelial óxido nítrico sintase no diabetes mellitus e suas complicações vasculares associadas: uma revisão sistemática e meta-análise. Endócrino, 62, 412-422.

Dong, W., Wang, H., Shahzad, K., Bock, F., Al-Dabet, MM, Ranjan, S., Wolter, J., Kohli, S., Hoffmann, J., Dhople, VM, Zhu, C., Lindquist, JA, Esmon, CT, Gröne, E., Gröne, HJ, et al. (2015) A proteína C ativada melhora a lesão de isquemia-reperfusão renal restringindo a micção pública da proteína de ligação à caixa Y-1. Geléia. Soc. Nephrol., 26, 2789-2799.

Du, C., Zhang, T., Xiao, X., Shi, Y., Duan, H. & Ren, Y. (2017) O receptor ativado por protease-2 promove a inflamação epitelial tubular renal inibindo a autofagia via a via de sinalização PI3K/Akt/mTOR. Bioquímica. J., 474, 2733-2747.

Ellinghaus, P., Perzborn, E., Hauenschild, P., Gerdes, C., Heitmeier, S., Visser, M., Summer, H. & Laux, V. (2016) Expressão de pro- genes inflamatórios em células endoteliais humanas: comparação de rivaroxabana e dabigatrana. Pulso. Res.,

142, 44-51.

Goldberg, RB (2009) Citocinas e marcadores de inflamação semelhantes a citocinas, disfunção endotelial e coagulação desequilibrada no desenvolvimento de diabetes e suas complicações. J. Clin. Endocrinol. Metab., 94, 3171-3182.

Goto, S., Ogawa, H., Takeuchi, M., Flater, MD & Bhatt, DL; o J-LANCELOT (Lição Japonesa de Antagonizing the Cellular Effect of Thrombin) Investigators (2010) Estudos de Fase II duplo-cegos, controlados por placebo do antagonista do receptor 1 ativado por protease E5555 (atopaxar) em pacientes japoneses com síndrome coronariana aguda ou doença arterial coronariana de alto risco. EUR. Coração J., 31, 2601-2613.

Gregg, EW, Williams, DE & Geiss, L. (2014) Mudanças nas complicações relacionadas ao diabetes nos Estados Unidos. N. Engl. J. Med., 371, 286-287.

Grover, SP & Mackman, N. (2018) Fator tecidual: um mediador essencial da hemostasia e desencadeador de trombose. Arterioscler. Pulso. Vasc. Biol., 38, 709-725.

Han, Y., Tian, ​​L., Ma, F., Tesch, G., Vesey, DA, Globe, GC, Lohman, RJ, Morais, C., Suen, JY, Fairlie, DP & Nikolic-Paterson, DJ (2019) A inibição farmacológica do receptor ativado por protease-2 reduz a formação de crescente na nefrite sérica nefrotóxica de rato. Clin. Exp. Pharmacol. Fisiol., 46,

456-464.

Hayashi, S., Oe, Y., Fushimi, T., Sato, E., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2016) O receptor 2 ativado por protease exacerba a lesão tubulointersticial renal induzida por adenina em ratos. Bioquímica. Biofis. Res. Com., 483, 547-552.

Isermann, B. (2017) Efeitos homeostáticos da sinalização dependente de protease de coagulação e receptores ativados por protease. J. Thromb. Haemost., 15, 1273-1284.

Jiang, Y., Yau, MK, Lim, J., Wu, KC, Xu, W., Suen, JY & Fairlie, DP (2018) Um potente antagonista do receptor 2 ativado por protease que inibe múltiplas funções de sinalização no câncer humano células. J. Pharmacol. Exp. Ther., 364, 246-257.

Kainz, A., Hronsky, M., Stel, VS, Jager, KJ, Geroldinger, A., Dunkler, D., Heinze, G., Tripepi, G. & Oberbauer, R. (2015) Previsão da prevalência de doença renal crônica em pacientes diabéticos em países da União Européia até 2025. Nephrol. Discar. Transplante., 30 Supl 4, iv113-118.

Kolachalama, VB, Shashar, M., Alousi, F., Shivanna, S., Rijal, K., Belghasem, ME, Walker, J., Matsuura, S., Chang, GH, Gibson, CM, Dember, LM, Francis, JM, Ravid, K. & Chitalia, VC (2018) O eixo do fator tecidual do receptor de hidrocarboneto soluto-aril urêmico se associa à trombose após lesão vascular em humanos. Geléia. Soc. Nephrol., 29, 1063- 1072.

Li, F., Wang, CH, Wang, JG, Thai, T., Boysen, G., Xu, L., Turner, AL, Wolberg, AS, Mackman, N., Maeda, N. & Takahashi, N. (2010) A expressão elevada do fator tecidual contribui para a nefropatia diabética exacerbada em camundongos sem eNOS alimentados com uma dieta rica em gordura. J. Thromb. Hemost., 8, 2122-2132.

Lim, J., Iyer, A., Liu, L., Suen, JY, Lohman, RJ, Seow, V., Yau, MK, Brown, L. & Fairlie, DP (2013) Obesidade induzida por dieta, inflamação adiposa , e disfunção metabólica correlacionada com a expressão de PAR2 são atenuadas pelo antagonismo de PAR2. FASEB J., 27, 4757-4767.

Liyanage, T., Ninomiya, T., Jha, V., Neal, B., Patrice, HM, Okpechi, I., Zhao, MH, Lv, J., Garg, AX, Knight, J., Rodgers, A ., Gallagher, M., Kotwal, S., Cass, A. & Perkovic, V. (2015) Acesso mundial ao tratamento para doença renal terminal: uma revisão sistemática. Lancet, 385, 1975-1982.

Lok, SWY, Yiu, WH, Li, H., Xue, R., Zou, Y., Li, B., Chan, KW, Chan, LYY, Leung, JCK, Lai, KN & Tang, SCW

(2020) O antagonista PAR-1 vorapaxar melhora a lesão renal e a fibrose tubulointersticial. Clin. Sci. (Londres), 134, 2873-2891.

Lv, B., Wang, H., Tang, Y., Fan, Z., Xiao, X. & Chen, F. (2009) A proteína da caixa 1 do grupo de alta mobilidade induz a expressão do fator tecidual em células endoteliais vasculares através da ativação de NF-kappaB e Egr-1. Pulso. Haemost., 102, 352-359.

Madhusudhan, T., Kerlin, BA & Isermann, B. (2016) O papel emergente das proteases de coagulação na doença renal. Nat. Rev. Nephrol., 12, 94-109.

Madhusudhan, T., Wang, H., Straub, BK, Gröne, E., Zhou, Q., Shahzad, K., Müller-Krebs, S., Schwenger, V., Gerlitz, B., Grinnell, BW, Griffin, JH, Reiser, J., Gröne, HJ, Esmon, CT, Nawroth, PP, et ai. (2012) A sinalização citoprotetora pela proteína C ativada requer receptor ativado por protease-3 em podócitos. Sangue, 119, 874-883.

Mitsui, S., Oe, Y., Sekimoto, A., Sato, E., Hashizume, Y., Yamakage, S., Kumakura, S., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. ( 2020) O duplo bloqueio do receptor 1 e 2 ativado por protease melhora aditivamente a doença renal diabética. Sou. J. Fisiol. Renal Physiol., 318, F1067-F1073.

Nakagawa, T., Sato, W., Glushakova, O., Heinig, M., Clarke, T., Campbell-Thompson, M., Yuzawa, Y., Atkinson, MA, Johnson, RJ & Croker, B. ( 2007) Camundongos nocaute da sintase de óxido nítrico endotelial diabético desenvolvem nefropatia diabética avançada. Geléia. Soc. Nephrol., 18, 539-550.

Nakagawa, T., Tanabe, K., Croker, BP, Johnson, RJ, Grant, MB, Kosugi, T. & Li, Q. (2011) Disfunção endotelial como potencial contribuinte na nefropatia diabética. Nat. Rev. Nephrol., 7, 36-44.

Nitta, K., Goto, S., Masakane, I., Hanafusa, N., Taniguchi, M., Hasegawa, T., Nakai, S., Wada, A., Hamano, T., Hoshino, J., Joki, N., Abe, M., Yamamoto, K. & Nakamoto, H.; o Comitê de Registro de Dados Renais da Sociedade Japonesa de Terapia de Diálise (2020) Relatório anual de dados de diálise para 2018, JSDT Renal Data Registry: métodos de pesquisa, dados de instalações, incidência, prevalência e mortalidade. Ren. Substituir. Ter., 6, 41.

Noiri, E., Satoh, H., Taguchi, J., Brodsky, SV, Nakao, A., Ogawa, Y., Nishijima, S., Yokomizo, T., Tokunaga, K. & Fujita, T. (2002 ) Associação do polimorfismo eNOS Glu298Asp com doença renal terminal. Hipertensão, 40, 535-540.

Nystedt, S., Ramakrishnan, V. & Sundelin, J. (1996) O receptor 2 ativado por proteinase é induzido por mediadores inflamatórios em células endoteliais humanas. Comparação com o receptor de trombina. J. Biol. Chem., 271, 14910-14915.

Oe, Y., Fushima, T., Sato, E., Sekimoto, A., Kisu, K., Sato, H., Sugawara, J., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) Protease-activated o receptor 2 protege contra 8 Y induzidos por inibidores de VEGF. Oe et al. lesão endotelial glomerular e podocitária. Sci. Rep., 9, 2986.

Oe, Y., Hayashi, S., Fushima, T., Sato, E., Kisu, K., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2016) Fator de coagulação Xa e receptor ativado por protease 2 como novos alvos terapêuticos para nefropatia diabética. Arterioscler. Pulso. Vasc. Biol., 36, 1525- 1533.

Ogurtsova, K., da Rocha Fernandes, JD, Huang, Y., Linnenkamp, ​​U., Guariguata, L., Cho, NH, Cavan, D., Shaw, JE & Makaroff, LE (2017) IDF Diabetes Atlas: Global estimativas de prevalência de diabetes para 2015 e 2040. Diabetes Res. Clin. Pract., 128, 40-50.

Østerud, B. & Bjørklid, E. (2006) Fontes de fator tecidual. Semin. Pulso. Hemost., 32, 11-23.

Owens, AP, Passam, FH, Antoniak, S., Marshall, SM, McDaniel, AL, Rudel, L., Williams, JC, Hubbard, BK, Dutton, JA, Wang, J., Tobias, PS, Curtiss, LK , Daugherty, A., Kirchhofer, D., Luyendyk, JP, et ai. (2012) A ativação da coagulação dependente do fator tecidual de monócitos em camundongos e macacos hipercolesterolêmicos é inibida pela sinvastatina. J. Clin. Invest., 122, 558-568.

Pan, L., Ye, Y., Wo, M., Bao, D., Zhu, F., Cheng, M., Ni, X. & Fei, X. (2018) Significado clínico dos parâmetros hemostáticos na previsão para diabetes mellitus tipo 2 e nefropatia diabética. Des. Marcadores, 2018, 5214376.

Patel, MR, Mahaffey, KW, Garg, J., Pan, G., Singer, DE, Hacke, W., Breithardt, G., Halperin, JL, Hankey, GJ, Piccini, JP, Becker, RC, Nessel, CC, Paolini, JF, Berkowitz, SD, Fox, KA, et al. (2011) Rivaroxabana versus varfarina na fibrilação atrial não valvar. N. Engl. J. Med.,

365, 883-891. Pawlinski, R., Wang, JG, Owens, AP, Williams, J., Antoniak, S., Tencati, M., Luther, T., Rowley, JW, Low, EN, Weyrich, AS & Mackman, N. ( 2010) O fator de tecido celular hematopoiético e não hematopoiético ativa a cascata de coagulação em camundongos endotoxêmicos. Sangue, 116, 806-814. Posma, JJ, Grover, SP, Hisada, Y., Owens, AP, Antoniak, S., Spronk, HM & Mackman, N. (2019) Papéis das proteases de coagulação e PARs (Receptores Ativados por Protease) em modelos de camundongos de inflamação doenças. Arterioscler. Pulso. Vasc. Biol., 39, 13-24.

Robertson, L., Kesteven, P. & McCaslin, JE (2015) Inibidores orais diretos da trombina ou inibidores orais do fator Xa para o tratamento da trombose venosa profunda. Sistema de banco de dados Cochrane. Rev.,

CD010956.

Rogero, MM & Calder, PC (2018) Obesidade, inflamação, receptor toll-like 4 e ácidos graxos. Nutrientes, 10, 432.

Rothmeier, AS & Ruf, W. (2012) Sinalização do receptor 2 ativado por protease na inflamação. Semin. Imunopatol. , 34 ,133-149.

Samad, F. & Ruf, W. (2013) Inflamação, obesidade e trombose. Sangue, 122, 3415-3422.

Shrestha, C., Ito, T., Kawahara, K., Shrestha, B., Yamakuchi, M., Hashiguchi, T. & Maruyama, I. (2013) O palmitato de ácidos graxos saturados induz a liberação extracelular de histona H3: a possível base mecanicista para inflamação e trombose induzidas por dieta rica em gordura. Bioquímica. Biofis. Res. Com., 437, 573-578. Sörensen, I., Susnik, N., Inhester, T., Degen, JL, Melk, A., Haller,

H. & Schmitt, R. (2011) O fibrinogênio, atuando como mitógeno para fibroblastos tubulointersticiais, promove a fibrose renal. Kidney Int., 80, 1035-1044.

Sumi, A., Yamanaka-Hanada, N., Bai, F., Makino, T., Mizukami, H. & Ono, T. (2011) Papéis da via de coagulação e fator Xa na progressão da nefropatia diabética em DB/ Ratos DB. Biol. Farmácia. Bul., 34, 824-830.

Tanaka, M., Arai, H., Liu, N., Nogaki, F., Nomura, K., Kasuno, K., Oida, E., Kita, T. & Ono, T. (2005) Papel da coagulação fator Xa e receptor 2 ativado por protease na proliferação de células mesangiais humanas. Kidney Int., 67, 2123-2133.

Tricoci, P., Huang, Z., Held, C., Moliterno, DJ, Armstrong, PW, Van de Werf, F., White, HD, Aylward, PE, Wallentin, L., Chen, E., Lokhnygina, Y., Pei, J., Leonardi, S., Rorick, TL, Kilian, AM, et ai. (2012) Antagonista do receptor de trombina vorapaxar em síndromes coronarianas agudas. N. Engl. J. Med., 366, 20-33.

Vesey, DA, Cheung, CW, Kruger, WA, Poronnik, P., Gobe, G. & Johnson, DW (2005) A trombina estimula respostas pró-inflamatórias e proliferativas em culturas primárias de células do túbulo proximal humano. Kidney Int., 67, 1315-1329.

Vesey, DA, Suen, JY, Seow, V., Lohman, RJ, Liu, L., Gobe, GC, Johnson, DW & Fairlie, DP (2013) PAR2-respostas inflamatórias induzidas no epitélio tubular renal humano células. Sou. J. Fisiol. Renal Physiol., 304, F737-750.

Waasdorp, M., de Rooij, DM, Florquin, S., Duitman, J. & Spek, CA (2019) O receptor ativado por protease-1 contribui para lesão renal e fibrose intersticial durante nefropatia obstrutiva crônica. J. Célula. Mol. Med., 23, 1268-1279.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S. & Spek, CA (2016) A deficiência do receptor ativado por protease-1 protege contra a nefropatia diabética induzida por estreptozotocina em camundongos. Sci. Rep., 6, 33030.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S., Spek, CA & Spek, AC (2017) Receptor 2 ativado por protease na nefropatia diabética: uma faca de dois gumes. Sou. J. Trad. Res., 9, 4512-4520.

Walford, G. & Loscalzo, J. (2003) Óxido nítrico em biologia vascular.

J. Thromb. Hemost., 1, 2112-2118.

Wang, CH, Li, F., Hiller, S., Kim, HS, Maeda, N., Smithies, O. & Takahashi, N. (2011a) Uma diminuição modesta na NOS endotelial em camundongos comparável à associada à NOS3 humana variantes exacerba a nefropatia diabética. Proc. Nacional Acad.

Sci. EUA, 108, 2070-2075.

Wang, H., Madhusudhan, T., He, T., Hummel, B., Schmidt, S., Vinnikov, IA, Shahzad, K., Kashif, M., Muller-Krebs, S., Schwenger, V. , Bierhaus, A., Rudofsky, G., Nawroth, PP & Isermann, B. (2011b) A ativação da coagulação baixa, mas sustentada, melhora a apoptose podocitária induzida pela glicose: efeito protetor do fator V Leiden na nefropatia diabética. Sangue, 117, 5231-5242.

Watanabe, M., Oe, Y., Sato, E., Sekimoto, A., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) O receptor 2 ativado por protease exacerba a nefrotoxicidade induzida por cisplatina. Sou. J. Fisiol. Renal Physiol., 316, F654-F659.

Witkowski, M., Landmesser, U. & Rauch, U. (2016) Fator tecidual como ligação entre inflamação e coagulação. Tendências Cardiovasc. Med., 26, 297-303.

Zhang, J., Wang, Y., Zhang, R., Li, H., Han, Q., Wu, Y., Wang, S., Guo, R., Wang, T., Li, L. & Liu, F. (2018) O fibrinogênio sérico prediz ESRD diabético em pacientes com diabetes mellitus tipo 2. Diabetes Res. Clin. Pract., 141, 1-9.

Zhang, Y., Xiao, HQ, Zeng, XT, Zuo, HX & Xu, YC (2015) Associações entre polimorfismos endoteliais de óxido nítrico sintase e risco de nefropatia diabética: uma meta-análise atualizada. Ren. Falha., 37, 312-326.

Zhao, HJ, Wang, S., Cheng, H., Zhang, MZ, Takahashi, T., Fogo, AB, Breyer, MD & Harris, RC (2006) A deficiência endotelial de óxido nítrico sintase produz nefropatia acelerada em camundongos diabéticos. Geléia. Soc. Nephrol., 17, 2664-2669.

Zhao, P., Metcalf, M. & Bunnett, NW (2014) Sinalização tendenciosa de receptores ativados por protease. Frente. Endocrinol. (Lausanne), 5, 67.