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Efeitos da Cistanche deserticola sobre amorfologiae histoquímica de testículos e epidídimos em camundongos

Wang Dejun, Sheng Shuqing, Liang Hong

【Resumo】 Objetivo: Observar os efeitos daCistanche deserticolasobre a morfologia e histoquímica detestículoeepidídimoEm ratos. Métodos: Trinta camundongos machos Kunming foram selecionados e divididos aleatoriamente em grupo de medicação Ⅰ, grupo Ⅱ e grupo controle. Deu o estômago comCistanche deserticoladecocção (4g·kg -1·d-1 e 8g·kg -1·d-1), e o grupo controle foi gavage com soro fisiológico. Três semanas depois, os camundongos foram sacrificados e osespermacontagem no sêmen foi determinada. Indicadores morfológicos como viabilidade, velocidade de corrida e conteúdo de frutose no plasma seminal. Observação histoquímica detestículoeepidídimosuccinato desidrogenase e reação de lipase não específica. Resultados: Os indicadores acima do grupo droga foram superiores aos do grupo controle. Conclusão: sugere queCistanchedeserticolatem o efeito de fortalecer o yang e nutrir o rim.

Cistanche deserticolaé listado como uma planta da família Dang. É um tônico cegamente valioso, que tem os efeitos de nutrir o rim, fortalecer o yang, fortalecer o fígado e o rim e nutrir a essência e o qi. [1]Cistanche deserticolaé a droga mais frequentemente usada nas prescrições para nutrir o rim e fortalecer o yang no passado. É também uma das famosas drogas tônicas, perdendo apenas para o ginseng [2]. Para explorar melhor o mecanismo deCistanchedeserticola, observamos a morfologia e histoquímica dotestículoeepidídimode camundongos no grupo medicação e no grupo controle.

Cistanche deserticola

1 Material e métodos

1.1 Materiais

Medicamento:Cistanchedeserticolafoi produzido em Alexa, Mongólia Interior, e foi identificado pelo Instituto de Controle de Drogas da Mongólia Interior, que está em conformidade com os regulamentos da Farmacopeia Nacional. ImprensaCistanchedeserticolaextrato: água=100g: 400ml, deixe de molho por 30min, aqueça e ferva, depois frite por 30min em fogo morno, despeje a solução medicinal e frite novamente na proporção de 100g:200ml. Concentrar as duas decocções para o equivalente a 1g de droga bruta por mililitro para uso.

Animais: camundongos Kunming, 30 machos, pesando 25g -30g. Fornecido pelo Centro Animal da Escola de Medicina da Universidade de Yangzhou.

Cistanchedeserticola pode melhorar a qualidade do esperma nutrindotestículo e epidídimo

1.2 Método

Os animais experimentais foram divididos aleatoriamente em grupos Ⅰ e Ⅱ, com 10 animais em cada grupo. Eles foram dadosCistanchedeserticoladecocção por gavagem, e a dosagem diária foi de 4g/kg e 8g/kg, respectivamente. O grupo controle (10 ratos) recebeu o mesmo volume de solução salina normal por gavagem. É administrado uma vez por dia durante 3 semanas consecutivas. 24 horas após a última administração, os animais foram sacrificados.

1.2.1 Observação ao microscópio Pegue o mouseepidídimo[3], colocar em 10ml de soro fisiológico 37 graus, devidamente cortado em pedaços, banho morno por 10 minutos, obterespermasuspensão e registre aespermadensidade como visto ao microscópio de acordo com o método de contagem de glóbulos brancos (D),espermaviabilidade (A),espermataxa de deformidade (T) eespermavelocidade de corrida (V).

1.2.2 Determinação do teor de frutose: pegue sêmen de camundongo usando o método de cor de resorcinol [4], espectrofotômetro a 50 nm de comprimento de onda colorimétrico, use frutose padrão para desenhar uma curva padrão após o mesmo tratamento, determine o teor de frutose no sêmen.

1.2.3 Observação da seção de tecido: Pegue o mousetestículoeepidídimo, fixar com formalina 4, embebida em parafina, corte, coloração HE, observar o estado histológico ao microscópio de luz.

1.2.4 Observação histoquímica: Pegue o mousetestículoeepidídimo, fixar em formalina 4, congelar seção, observar as alterações da succinato desidrogenase SDH e da lipase não específica NSE [5].

2 Resultados

2.1 O efeito de Cistanche deserticola na densidade espermática, viabilidade, velocidade de corrida e taxa de deformidade no sêmen

Tabela 1 O efeito deCistanchedeserticolasobreespermaD, A, T, V (x ± SD N=10)

2.2 O efeito de Cistanche deserticola no conteúdo de frutose no sêmen de camundongo

Tabela 2 Alterações do teor de frutose no sêmen de camundongo (mg/100ml x ±SD)

O conteúdo de frutose no grupo medicação foi significativamente maior do que no grupo controle, P<>

2.3 Observação histomorfológica

Grupo controle: O envelope testicular é liso e completo, e os túbulos seminíferos podem ser vistos na seção transversal dos túbulos seminíferos. 4 a 5 camadas de espermatogônias e espermatócitos,espermacélulas, eespermaem diferentes estágios de desenvolvimento estão dispostos de forma ordenada, formando uma variedade de morfologia de imagens de epitélio seminífero. As células de Sertoli podem ser vistas e sua morfologia é normal. Existem poucas células no interstício dotestículo, e algumas células intersticiais estão em um estado semelhante ao fibroblasto, com mais vacúolos no citoplasma, coloração leve e acúmulo de gotículas lipídicas e pigmento. A espessura da membrana basal ao redor dos túbulos seminíferos é de cerca de 6-8um

Grupo de medicação: Os túbulos seminíferos estão intactos, com uma espessura de cerca de 10 ~ 14um, e há células semelhantes a músculos lisos no meio. A aparência dos túbulos seminíferos é relativamente regular, com todos os níveis de células espermatogênicas em arranjo ordenado, cerca de 6 a 8 camadas. As espermatogônias estão localizadas na base, a cromatina é de granulação fina e a coloração é profunda. Existem 1-2 áreas levemente coradas no núcleo com nucléolos óbvios. O número de espermatócitos primários aumentou e seu tamanho é de cerca de 17um de diâmetro. O esperma parece um girino, com a cabeça voltada para a membrana basal e coloração profunda. As células do estroma testicular são distribuídas em aglomerados, o número aumenta e os vasos sanguíneos são abundantes

2.4 O efeito de Cistanche deserticola na succinato desidrogenase (SDH) e na lipase não específica (NSE) em testículos e epidídimos de camundongos

2.4.1 Succinato desidrogenase (SDH): Existem reações de SDH no citoplasma das células espermatogênicas em todos os níveis, dentre as quais as espermatogônias são mais fortes e as células mesenquimais têm uma reação forte (Tabela 3). As partículas positivas para SDH estão espalhadas nas células epiteliais do tubo epididimário, com mais áreas supranucleares. A resposta SDH do grupo medicação foi mais forte do que a do grupo controle.

2.4.2 Lipase não específica (NSE):testículoeepidídimotêm partículas de reação positivas, especialmente células do estroma testicular, e as células de suporte são fortemente positivas. O número de partículas positivas na superfície basal das células epiteliais do ducto epidídimo no grupo de medicação aumentou (ver Tabela 3).

Tabela 3 Comparação da intensidade da reação deCistanchedeserticolapara SDH e NSE do mousetestículoeepidídimo

3 Discussão

Neste experimento, a decocção deCistanchedeserticolafoi usado para gavage camundongos machos a 4g/kg e 8g/kg por 2 a 3 semanas. oespermacontagem e viabilidade dos camundongos aumentou significativamente, oespermavelocidade de corrida aumentou e oespermataxa de deformidade foi A queda. De acordo com a observação histomorfológica, a função espermatogênica dotestículono grupo medicação foi aprimorado, o microambiente do tubo epididimal foi melhorado e o teor de frutose aumentou. Estudos histoquímicos mostraram que SDH e NSE são fortemente positivos.

A espermatogênese é um processo complexo de várias fases, incluindo três estágios: mitose das espermatogônias, maturação e divisão dos espermatócitos e metamorfose dos espermatozóides.espermacélulas. Cada estágio tem seu próprio tipo especial de metabolismo. A divisão e a espermatogênese das células espermatogênicas em todos os níveis nos túbulos seminíferos requerem nutrientes adequados e a regulação dos hormônios endócrinos. A medicina tradicional da pátria acredita queCistanchedeserticolatem um bom efeito de nutrir o rim e fortalecer o yang, e pode mostrar efeitos semelhantes a andrógenos e gonadotrofinas para regular a função do eixo da glândula endócrina [6]. Os andrógenos são hormônios essenciais no processo de espermatogênese. oepidídimoé o microambiente para o posterior amadurecimento, desenvolvimento e diferenciação deesperma. Nesse processo,espermadepende do efeito sinérgico do epitélio epididimal. As atividades de secreção, absorção e transporte de material das células epiteliais são usadas principalmente para regular o desenvolvimento e a diferenciação de células epiteliais.espermano lúmen, bem como armazenamento e armazenamento. O microambiente de repouso. O conteúdo de frutose no plasma seminal é um componente importante que reflete a função epididimal, e o conteúdo de frutose no grupo de medicação foi significativamente maior do que no grupo controle. A SDH é uma enzima do sistema succinato oxidase, que se organiza em cadeias nas mitocôndrias. SDH é a primeira enzima neste sistema. Ele existe em todas as células da respiração aeróbica e está firmemente ligado à membrana mitocondrial. É a desidrogenase mais importante. As enzimas são comumente usadas em reações histoquímicas para refletir a condição do ciclo do ácido tricarboxílico e se tornar as enzimas marcadoras. A atividade do NSE está relacionada à hidrólise do colesterol e à síntese de esteroides e é comumente usada para medir a função das células do estroma testicular [7]. O número de drogas com fortes reações positivas de SDH e NSE nos testículos eepidídimodo grupo medicação foi significativamente maior do que no grupo controle, o que comprovou queCistanchedeserticolapode de fato promover a espermatogênese do testículo e melhorar o microambiente doepidídimo. Fornece uma base morfológica confiável para o mecanismo deCistanche deserticolanutrir os rins e efeitos afrodisíacos.

cistanche deserticola melhora a qualidade do esperma

Referências

1. Li Shizhen. Compêndio de Matéria Médica. Pequim: Editora Médica do Povo, 1977: 727-728.

2. Huang Baomin, Li Xinwu. Pesquisa e análise de prescrições antigas para antienvelhecimento e longevidade. Jornal da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Hunan, 1987; 2(7):1- 2.

3. Editado por Li Yikui. Metodologia Experimental da Farmacologia da Medicina Tradicional Chinesa. Xangai: Shanghai Science and Technology Press, 509-511.

4. Luo Jianhua, editor-chefe. Tecnologia de diagnóstico laboratorial de infertilidade. Xuelin Publishing House, 1994:44-46.

5. Chen Xiaomei. Manual de Histoquímica. Pequim: People's Medical Publishing House, 1982: 130.224.

6. He Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen. Estudo sobre o efeito deCistanchedeserticolaem nutrir o rim e fortalecer o yang antes e depois do processamento. Revista Chinesa de Matéria Médica Chinesa, 1996; 21(9): 534-539.

7. Wang Yifei, Wu Jingmei, Qiu Yixuan. Indicadores histoquímicos para medir a função das células intersticiais. Jornal de Biologia Celular, 1980; 2(4): 27-30.