Por que o cistanche é benéfico para a doença de Alzheimer?

Contato: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Gao Cong, Wang Chuanshe, Wu Guanzhong, Hu Mei, Tu Pengfei

(1. Departamento de Farmacologia, Universidade Farmacêutica da China, Nanjing 210009, Jiangsu; 2. Centro de Pesquisa Moderna para Medicina Tradicional Chinesa, Universidade de Pequim, Pequim 100083; 3. Escola de Medicina Básica, Universidade de Pequim, Pequim 100083; 4. Escola de Farmácia , Universidade de Pequim, Pequim 100083)

O envelhecimento da população tornou a busca de medicamentos seguros e eficazes para a prevenção e tratamento dedoença de Alzheimerum tema quente na pesquisa de drogas. Nos últimos anos, a medicina chinesa tem feito grandes progressos no tratamento dedoença de Alzheimercom o método de nutrir o rim e a medula como esteio, e também nutrir o coração e o baço.Cistanchefoi publicado pela primeira vez em Shennong Ben Cao Jing. Tem os efeitos de nutrir o yang do rim, nutrir a essência e o sangue e hidratar os intestinos. Atualmente é amplamente utilizado no tratamento de demência senil, impotência, constipação habitual e outras doenças [1, 2]. Estudos mostraram que tem os efeitos de anti-demência, anti-oxidação, anti-hipóxia, anti-radiação e melhora da função imunológica. O principal componente são os glicosídeos feniletanoides [3-6]. Os glicosídeos totais de cistanche são extraídos e refinados dos caules carnudos e secos de Cistanche tubulosa (Sch renk) R.Wight. lateral) 44,3 por cento. Este experimento estuda os efeitos dos glicosídeos totais de cistanche na aprendizagem ememóriacomprometimento em ratos com demência vascular, trombose e agregação plaquetária em ratos normais, e fornece uma base para o seu desenvolvimento como um nootrópico e uma nova droga para a prevenção e tratamento dedoença de Alzheimer.

Efeitos protetores do cistanche emdoença de Alzheimer

1. Materiais

1.1 Animais

Ratos SD, machos, pesando 470-570 g, fornecidos pela Shanghai Xipu Ma-Bikai Experimental Animal Co., Ltd., número do certificado: Hudong Qualified No. 152.

1.2 Medicamentos e reagentes

O glicosídeo de cistanche, Extrato de Cistanche tubulosa, contendo 90,7 por cento de glicosídeos totais de álcool fenetílico, echinacoside 44,3 por cento, pó marrom escuro, pelo Centro de Pesquisa Moderna de Medicina Tradicional Chinesa, Universidade de Pequim Fornecido pela Sala de Química, o número do lote é 980601. Comprimidos de Piracetam, produzidos pela Yixing Pharmaceutical Factory, número do lote 980521. Comprimidos com revestimento entérico de aspirina, produzidos pela Nanjing No. 2 Pharmaceutical Factory, o número do lote é 000402. Cada medicamento é preparado com água destilada antes do uso. Heparina Sódica, um produto da China Medical (Grupo) Shanghai Chemical Reagent Co., Ltd., número de lote F000128. Pentobarbital de sódio, importado pela China National Pharmaceutical (Group) Shanghai Chemical Reagent Company, número do lote 971104. Difosfato dissódico de adenosina (ADP), um produto da Dongfeng Biochemical Technology Co., Ltd., Instituto de Bioquímica de Xangai, Academia Chinesa de Ciências, lote número 9305122, foi preparado como uma solução estoque de 1 mg/mL antes do uso e armazenado em uma geladeira. Quando usado, foi diluído 3 vezes com tampão fosfato.

Cistanche pode prevenir e tratar a doença de Alzheimer

1.3 Aparelho

MG-3 Labirinto elétrico tipo Y, produzido pela Zhangjiagang Teaching and Experimental Apparatus Factory. SPA-4 Medidor de agregação plaquetária multifuncional, produzido pela Shanghai Keda Testing Instrument Factory.

2. Métodos

2. 1 Preparação e detecção de modelo de demência vascular induzida por isquemia-reperfusão cerebral focal de rato

2.1.1 Agrupamento e administração: Os ratos foram divididos aleatoriamente em 6 grupos de acordo com seu peso corporal, que foi o grupo de operação simulada, o grupo modelo, o grupo controle positivo (piracetam 300 mg/kg) e o totalglicosídeos de Cistanche. Grupo de dose média e baixa (200, 100, 50 mg/kg). Cada grupo foi administrado em administração, 0,5 mL/100 g, uma vez ao dia. O grupo de operação simulada e o grupo modelo receberam um volume igual de água destilada por 30 dias consecutivos.

2.1.2 Preparação do modelo [7]: No 16º dia de administração, os ratos foram anestesiados com hidrato de cloral 360 mg/kg IP. Corte a pele do pescoço no meio do caminho, separe os músculos do pescoço direito, libere a artéria carótida comum e a artéria carótida externa, ligue e corte os ramos da artéria carótida externa. Separe a artéria carótida interna até que a artéria do processo pterigopalatino seja exposta. Prenda a artéria carótida comum com um clipe arterial, faça uma incisão na artéria carótida externa, insira uma linha de pesca de carbono com uma cabeça redonda romba e um diâmetro de 0,28 mm da artéria carótida externa do rato na artéria carótida interna e entrar no crânio até que seja ligeiramente resistência quando todo o suprimento de sangue da artéria cerebral média é bloqueado. Após 40 minutos de isquemia, a linha de pesca foi retirada, a artéria carótida externa foi ligada, a artéria carótida comum foi reconectada, desinfetada e suturada, impenicilina foi usada para prevenir infecção. No grupo de operação simulada, apenas a artéria carótida externa foi separada e ligada, a linha de pesca não foi inserida e a artéria carótida comum não foi pinçada.

2.1.3 Teste de aprendizagem e memória [8]: No 7º dia após a operação, o labirinto elétrico tipo Y é usado para aprender ememóriatreinamento e teste. O experimento foi realizado em um ambiente silencioso e escuro. Os ratos foram colocados em um braço (área de partida fixa) e foram aclimatados à luz por 2 minutos e, em seguida, receberam um choque elétrico. Um sinal luminoso é colocado no braço esquerdo, que é uma zona segura, e o braço direito tem uma corrente elétrica sem luz, que é uma zona perigosa. A intensidade do choque elétrico é baseada na capacidade do rato de correr após receber o choque elétrico, e a voltagem é 50-60 V. É correto que os ratos escapem para a área segura após um choque elétrico, e é errado fugir para a área perigosa. Após cada treino, permaneça na área segura por 30 s para consolidar omemória. Ao treinar novamente, descanse por 10 segundos sob as luzes da área de partida, repita 10 vezes, registre os tempos corretos e errados e calcule a taxa de resposta correta. Cada treinamento foi realizado 1 hora após a administração e a medição continuou por 4 dias. Em seguida, os braços esquerdo e direito são usados ​​alternadamente como área segura para medir por 4 dias, registrar os tempos corretos e incorretos e calcular a taxa de resposta correta.

Taxa de resposta correta=um número de respostas corretas/número de sessões de treinamento.

2. 2 Trombose e detecção de bypass arteriovenoso em ratos [8]

Os ratos foram divididos aleatoriamente em 5 grupos de acordo com seu peso corporal, ou seja, o grupo modelo, o grupo controle positivo (aspirina 100 mg/kg) e os glicosídeos totais de cistanche, dose média e baixa (200 , 100, 50 mg/kg). Cada grupo recebeu em administração, 0,5 mL/(100 g), e o grupo modelo recebeu um volume igual de água destilada por 7 dias consecutivos. Após a última administração, pentobarbital sódico IP 45 mg/kg foi anestesiado, fixado em decúbito dorsal e separou a artéria carótida comum direita e a veia jugular externa esquerda. Pese um fio de seda cirúrgica nº 4 de 7 cm de comprimento e coloque-o na seção central de três seções de tubo de polietileno. Faça o fio de seda em contato com o sangue com 6 cm de comprimento. Encha o tubo de polietileno com 50 U/mL de solução salina normal de heparina. Após inserir a extremidade venosa na veia jugular externa esquerda, injete com precisão 50 U/kg de solução salina heparinizada da extremidade arterial para anticoagulação e, em seguida, insira a extremidade arterial na artéria carótida comum direita. A derivação arteriovenosa foi aberta 1 h após a administração e o fluxo sanguíneo foi interrompido 15 min após a abertura. O fio de seda foi rapidamente retirado e colocado sobre um papel de pesagem. A massa úmida foi pesada com balança analítica eletrônica para calcular a taxa de inibição do trombo.

Taxa de inibição de trombose=(massa de trombo no grupo modelo - massa de trombo no grupo de medicação) / massa de trombo no grupo modelo × 100 por cento .

2.3 Detecção de agregação plaquetária in vitro em ratos[8]

Os ratos foram divididos aleatoriamente em 5 grupos de acordo com seu peso corporal, ou seja, o grupo controle normal, o grupo controle positivo (aspirina 100 mg/kg) e o grupo administração de glicosídeo total Cistanche (mesma dose acima). A forma de administração é a mesma do item 2.2. Em jejum de 12 h antes da última administração, o sangue foi retirado da aorta abdominal 1 h após a última administração e anticoagulado com citrato de sódio 3,8 por cento (1: 9). Centrifugue por 3 min a /min, aspire o plasma rico em plaquetas superior (PRP) e centrifugue o sangue restante a 3 000 r/min por 10 min. O sobrenadante é o plasma pobre em plaquetas (PPP). Adicione 200 μL de PRP ao tubo turbidimétrico e ajuste o ponto zero com PPP. Após o pré-aquecimento por 5 minutos, adicione 50 μL de solução de ADP para induzir a agregação plaquetária, meça a intensidade da agregação plaquetária e calcule a taxa de inibição da agregação plaquetária.

Taxa de inibição de agregação=(taxa de agregação máxima do grupo normal-taxa de agregação máxima do grupo de administração)/taxa de agregação máxima do grupo normal × 100 por cento 2. 4 Processamento estatístico: Os resultados são todos expressos como x± s, e os dados são comparados com o teste t para comparação entre grupos Realizar processamento estatístico.

Cistanche Prevenção e tratamento da doença de Alzheimer

3. Resultados

3.1 O efeito na aprendizagem e na função de memória de ratos com demência vascular causada por isquemia-reperfusão cerebral focal: os resultados são mostrados na Tabela 1

Nos primeiros 4 dias do teste, a taxa média de resposta correta de cada grupo aumentou dia a dia, e a taxa média de resposta correta de cada grupo atingiu mais de 90% no quarto dia. Nos primeiros 3 dias, a taxa média de resposta correta de cada grupo de dose e o grupo positivo dos glicosídeos totais de Cistanche é maior que a do grupo modelo, e a diferença é significativa (P<0.05, 0.01),="" indicating="" that="" the="">glicosídeos totais de cistanchasão 50, 100, 200 mg/ A administração de kg pode melhorar significativamente a taxa de resposta correta durante o treino de labirinto em ratos com demência vascular com isquemia-reperfusão cerebral focal, ou seja, os glicosídeos totais de Cistanche têm um efeito protetor significativo no aprendizado e disfunção de memória causada pelo modelo. Não houve diferença significativa na taxa média de resposta correta de cada grupo no 4º dia. Depois que os braços esquerdo e direito foram usados ​​como zona de segurança no 5º dia, a taxa média de resposta correta de cada grupo diminuiu significativamente, mas não houve diferença significativa entre os grupos. Posteriormente, a taxa média de acertos de cada grupo aumentou gradativamente, mas não houve diferença significativa na taxa média de acertos entre os grupos. Mostra que os glicosídeos totais de Cistanche só podem restaurar o aprendizado ememóriafunção de ratos com lesão cerebral até certo ponto, e a mudança do método de aprendizagem não afeta a aprendizagem adquirida e a capacidade de memória.

tabela 1Efeito de glicosídeos de distância na função de aprendizagem e memória de ratos com demência vascular induzida por isquemia-reperfusão cerebral focal

3.2 Efeito na trombose de bypass arteriovenoso de rato: os resultados são mostrados na Tabela 2

Comparado com o grupo modelo, o glicosídeo de Cistanche 200 e 100 mg/kg pode inibir significativamente a formação de trombose de derivação arteriovenosa em ratos, mas seus efeitos são significativamente mais fracos do que 100 mg/kg de aspirina.O glicosídeo de cistanche50 mg/kg não tem efeito na formação de trombose de derivação arteriovenosa em ratos. Isso mostra que o glicosídeo de Cistanche tem um certo efeito inibitório na formação de trombose de derivação arteriovenosa em animais inteiros.

Tabela 2 Efeito das distâncias dos glicosídeos na trombose do shunt arteriovenoso de ratos (n= 10)

Comparado com o grupo de modelos: * P<0. 05="" *="" *="" p=""><0. 01="" *="" p=""><0. 05="" *="" *="" p=""><0. 01="" vs="" model="">

3. 3 Efeito na agregação plaquetária induzida por ADP em ratos: os resultados são mostrados na Tabela 3

Em comparação com o grupo normal, a administração de glicosídeos totais de Bossicacistache200, 100, 50 mg/kg podem inibir significativamente a agregação plaquetária induzida pelo ADP in vitro em ratos, e a taxa de inibição do grupo de 200 mg/kg é a mais alta, chegando a 59,48 por cento .

Tabela 3 Efeito das distâncias de glicosídeos na agregação plaquetária in vitro induzida por ADP

Comparado com o grupo normal: * P<0. 05="" *="" *="" p=""><0. 01="" *="" p=""><0. 05="" *="" *="" p=""><0. 01="" vs="" normal="">

4. Discussão

doença de Alzheimergeralmente pode ser dividido em 4 tipos, a saberdoença de Alzheimer(DA), demência vascular (DV), demência mista (as duas primeiras coexistem) e demência do idoso por doenças sistêmicas. Pesquisas epidemiológicas mostraram que a incidência de DA nos países ocidentais é maior do que a de DV, mas meu país é diferente. De acordo com o censo em 11 cidades, a prevalência de DV é superior à DA[9]. VD é o termo geral para a síndrome demencial causada por danos no tecido cerebral causados ​​por fatores cerebrovasculares. A medicina tradicional chinesa acredita que esta doença se deve principalmente à deficiência do corpo original e à deficiência do original. Com o aumento da idade, a essência e o qi nos rins do corpo tornam-se gradualmente fracos, o mar de medula torna-se fraco e a função das vísceras diminui gradualmente. Por sua vez, produtos patológicos como fleuma e estase sanguínea se acumulam no corpo, a fleuma e a estase sanguínea são obstruídas e os colaterais cerebrais são danificados. Portanto, a característica desta doença é que a deficiência é causada pela deficiência, e deficiência e excesso são misturados. A deficiência renal é a causa raiz do desenvolvimento da doença de Alzheimer. Ligações patológicas básicas.

Cistancheé um medicamento tradicional de reposição e afrodisíaco. Tem os efeitos de nutrir os rins, encher a essência e hidratar os intestinos. A "Matéria Médica" refere-se a ela como o remédio essencial para nutrir a essência e o sangue e nutrir os rins. Apresenta sintomas de fadiga, esquecimento, perda auditiva e enurese causada por deficiência renal. Melhor efeito curativo. Zhu Zhiming e outros analisaram a composição da droga de 46 prescrições compostas para o tratamento da demência senil e descobriram que Cistanche é uma das drogas comumente usadas [1]. Nesta experiência, os ratos foram preparados para o modelo de VD induzido por isquemia-reperfusão cerebral focal no 16º dia de administração, e o treino e teste de aprendizagem e memória começaram no 7º dia após a continuação da administração. Nos primeiros 3 dias do teste, a taxa média de resposta correta do grupo modelo foi significativamente menor do que a do grupo simulado, indicando que a lesão de isquemia-reperfusão cerebral causou disfunção de aprendizagem e memória em ratos modelo; enquanto o total de glicosídeos Cistanche de cada grupo de dose de ratos A taxa média de resposta correta de Cistanche é significativamente maior do que a do grupo modelo, que é equivalente à de ratos no grupo de operação simulada. Mostra que Cistanche tem um efeito preventivo e terapêutico na aprendizagem ememóriacomprometimento de ratos VD. O glicosídeo de Cistanche é o componente afetivo da antidemência.

A patogênese e a patogênese da DV são bastante complicadas e ainda não totalmente compreendidas. Estudos recentes mostraram que os fatores de risco da DV incluem fatores relacionados ao AVC e não AVC, resumidos como hipertensão arterial, doença cardíaca, hiperlipidemia, diabetes, hematócrito, nível de escolaridade, idade, sexo, etc., e sua patogênese é está relacionado a infartos múltiplos, infartos únicos em partes importantes, isquemia da substância branca, etc. [10, 11]. Neste experimento, a qualidade úmida do trombo de derivação arteriovenosa de ratos administrados com glicósidos totais de cistanche ig por 7 dias foi significativamente menor do que a do grupo modelo. A administração in vivo pode inibir significativamente a agregação plaquetária induzida por ADP em ratos in vitro. Combinando os dois resultados experimentais, pode-se verificar que o mecanismo dos glicosídeos totais da cistanche para prevenir e tratar a DV pode estar relacionado à inibição da agregação plaquetária no organismo.

Cistanche paradoença de Alzheimer

Referências

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[9] Wu F Q. Demência cerebrovascular [J]. Adv Card Dis (Progress in Cardiovascular Diseases), 1993, 14(2): 90-92.

[10] Skoon I. S tatus de fatores de risco para demência vascular [J]. Neu roep idem iolo gy, 1998, 17(1): 2-6.

[11] Loeb C. Deterioração mental relacionada a infartos lacunares [J]. Heart Dis Stroke, 1994, 23: 75-81.