Efeito benéfico de Thymelaea Hirsuta na degeneração das ilhotas pancreáticas, fibrose renal e danos no fígado

Sanae Abid, Hassane Mekhfifi, Abderrahim Ziyyat, Abdekhaleq Legssyer, Mohammed Aziz e Mohamed Bnouham

Laboratório de Biorecursos, Biotecnologia, Etnofarmacologia e Saúde, Departamento de Biologia, Faculdade de Ciências,

University Mohamed Ist, Bd: Mohamed VI, BP: 717, Oujda 60000, Marrocos

Contato:joanna.jia@wecistanche.com/WhatsApp: 008618081934791

Objetivo. Em Marrocos, plus ymelaea hirsute (T. hirsute) (Thymelaeacea) é uma planta medicinal muito utilizada para tratar e prevenir a diabetes. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito antidiabético a médio prazo do extrato aquoso (AqTh) e da fração acetato de etila (EaTh) de Th e investigar seu suposto efeito protetor na degeneração das ilhotas pancreáticas, nefropatia diabética e danos hepáticos em estreptozotocina (STZ) -ratos diabéticos. Métodos. O diabetes experimental em ratos foi induzido por uma única injeção intraperitoneal de 50 mg/kg de STZ. Durante o período de tratamento (4 semanas), 200 mg/kg de AqTh e 50 mg/kg de EaTh foram administrados oralmente diariamente a ratos diabéticos com STZ. Um grupo de parâmetros incluindo glicemia de jejum, parâmetros bioquímicos e inibição da glicosidase intestinal foi estudado. Além disso, o estudo histológico do pâncreas,rim, fígado e aorta também foi realizado. Resultados. Ao final do tratamento, tanto o AqTh quanto o EaTh normalizaram a glicemia de jejum para 1,08 e 1,25 g/l, respectivamente. AqTh também reduziu a creatinina urinária e HbAc1. O EaTh apresentou atividade inibitória contra a -glicosidase intestinal, enquanto o AqTh não apresentou esse efeito inibitório. Além disso, a coloração com hematoxilina e eosina do pâncreas mostrou que AqTh ou EaTh previne a degeneração das células das ilhotas pancreáticas. Como semprerim, a coloração tricrômica de Masson mostrou prevenção significativa derenalfibrose em ratos diabéticos tratados com AqTh ou EaTh. Por outro lado, a coloração com hematoxilina e eosina do fígado mostrou que AqTh e EaTh previnem danos no fígado. Conclusão. Concluímos que a administração a médio prazo de AqTh e EaTh exerce um efeito anti-hiperglicêmico significativo em ratos diabéticos com STZ, possivelmente através da inibição da glicosidase intestinal e proteção contra danos às células das ilhotas pancreáticas. Além disso, o tratamento com AqTh e EaTh previne nefropatia e complicações hepáticas em ratos diabéticos com STZ.

Cistanche Herbapode tratarfibrose renal

Introdução

Diabetes mellitus é a doença endócrina mais comum. A incidência desta doença está aumentando a uma taxa alarmante (4-5 por cento) [1]. O diabetes tipo 2 (DM2) não insulinodependente não tratado ou não controlado pode causar diversas complicações, como doenças cardiovasculares e nefropatia diabética, podendo levar ao diabetes tipo 1 insulinodependente (DM1).

A nefropatia diabética é uma das complicações importantes do diabetes, e é a principal razão para o aumento do número de pacientes com doença terminalrenaldoença (ESRD) [2], que requeremrimdiálise ourimtransplante para que o paciente viva.

Portanto, o manejo do diabetes está se tornando muito importante para evitar seus graves desfechos metabólicos, como a nefropatia.

Atualmente, o tratamento do diabetes envolve o controle da dieta, exercícios, uso de insulina e/ou hipoglicemiantes, e também o uso de plantas medicinais como medicina alternativa complementar. Várias plantas medicinais têm demonstrado um efeito anti-hiperglicêmico crucial com efeitos colaterais mínimos [3-5], Por esse motivo, a Organização Mundial da Saúde (OMS) chamou grande atenção para o uso racional de medicamentos tradicionais e naturais para o tratamento do diabetes [6].

No Marrocos, mais de 100 plantas medicinais são usadas para tratar e prevenir o diabetes [7-10]. A atividade anti-hiperglicêmica e antidiabética de numerosos extratos e produtos dessas plantas (Ammi visnaga Lam., Globularia alum, Nigella sativa e Olea europaea var.) foi confirmada[9].

T. hirsuta é uma planta medicinal tradicionalmente utilizada para a prevenção e gestão da diabetes, no nordeste de Marrocos [8]. Estudos farmacológicos anteriores demonstraram o efeito anti-hiperglicêmico agudo do AqTh e EaTh [11-13]. No entanto, o efeito antidiabético de médio prazo desses dois extratos de T. hirsuta ainda não foi estabelecido. Portanto, o objetivo do presente estudo é avaliar pela primeira vez a atividade antidiabética de médio prazo do AqTh e EaTh e investigar seu suposto efeito protetor na degeneração das ilhotas pancreáticas, nefropatia diabética, esteatose hepática e complicações da aorta na STZ- ratos diabéticos induzidos.

2. Materiais e métodos

2.1. Produtos Químicos e Reagentes.

O Glucose Autokit foi adquirido da BioSystems (Espanha). A STZ foi adquirida da Sigma Aldrich (China). Acarbose (Glucor 50) foi obtida da Bayer Schering Pharma (Casablanca, Marrocos). A sacarose foi adquirida da Prolabo (grupo Rhone-Poulenc) (EEC). O pentobarbital foi obtido da CEVA Sante Animale (LaBallasti`ere). Anthrone (C14H10O) foi adquirido através da Organics. A cera de paraffiffin foi adquirida à FlukaChemika (Suíça). A eosina (C20H6Br4Na2O5) foi obtida de Riedel-de Haen (Seelze), e a hematoxilina foi obtida de BDH Chemicals Ltd. (Poole England). O ácido fucsina foi adquirido da Acros Organics (NewJersey, EUA), o ácido fosfomolibdico foi adquirido da Sigma-Aldrich (PF, Steinheim) e o verde claro foi adquirido da Sigma-Aldrich (MO, EUA).

2.2. Animais.

Ratos Wistar de ambos os sexos, pesando inicialmente 150-250 g (8-9 semanas), foram obtidos no biotério do Departamento de Biologia da Faculdade de Ciências (Oujda, Marrocos). O estudo foi realizado ao longo dos "Princípios de Cuidados com Animais de Laboratório" [14]. Eles foram mantidos em condições laboratoriais padrão (ciclo claro/escuro de 12/12 h e temperatura de 23 mais 2 graus com 3 ratos por gaiola com acesso a comida e água. Para coletar urina e determinar a ingestão de água e comida, os ratos foram mantidos em gaiolas metabólicas.

2.3. Indução de Diabetes.

Após jejum de 14 h, os ratos foram injetados intraperitonealmente com uma dose única de STZ (50 mg/kg PC), preparada em tampão de citrato de sódio fresco e frio (0,1 M de ácido cítrico e 0,1 M de citrato trissódico dihidratado) em PH4,5, para induzir diabetes [15]. Após 1 semana, ratos com glicemia de jejum de 1,26-2 g/l foram considerados diabéticos tipo 2 e foram incluídos no estudo.

2.4. Preparação de Amostra de Planta.

T. hirsuta foi adquirido em um mercado tradicional em Oujda (Marrocos Oriental) e foi autenticado por um botânico do Departamento de Biologia (Faculdade de Ciências, Oujda, Marrocos), e um espécime de comprovante (HUMPOM137) foi depositado na seção de plantas de o Herbarium University Mohamed Premier de Oujda, Marrocos (HUMPO).

As partes aéreas de T. hirsuta foram primeiro limpas e lavadas com água e depois secas a 40 graus durante a noite no forno. Para preparar AqTh, 140 g de partes aéreas de T. hirsuta foram infundidos em 2 L de água destilada por 3 horas. O rendimento de AqTh foi de 4,53%. O EaTh foi preparado conforme descrito em nosso estudo anterior [13].

2.5. Design experimental.

Os ratos foram divididos aleatoriamente em cinco grupos (5 ou 6 ratos por grupo): ratos controles normais (administrados apenas com água destilada), ratos controle diabéticos (administrados apenas com água destilada), ratos diabéticos tratados com 10 mg /kg PC de acarbose (droga hipoglicemiante padrão), ratos diabéticos tratados com 50 mg/kg de EaTh e ratos diabéticos tratados com 200 mg/kg PC de AqTh. As doses ideais foram determinadas com base em nossos estudos anteriores [13] e em testes preliminares. Todos os ratos foram tratados uma vez por dia durante 4 semanas. O peso corporal foi registrado diariamente. A ingestão de água e alimentos e o volume de urina foram monitorados antes e após o tratamento, e a glicosúria foi medida ao final do tratamento. A glicemia de jejum foi examinada antes do tratamento (semana 0) e após 1, 2, 3 e 4 semanas de tratamento. A inibição da -glicosidase, in vivo, foi estudada no dia anterior ao sacrifício dos ratos. Após as 4 semanas de tratamento, todos os animais foram anestesiados com 50 mg/kg de pentobarbital, após 14 h de jejum. Em seguida, o sangue foi coletado, por punção cardíaca, e imediatamente centrifugado a 3000 tour/min por 10 min. *O soro foi então armazenado a -20 graus até a análise bioquímica (colesterol total e triglicerídeos). orim, fígado, aorta, coração e pâncreas foram removidos, pesados ​​(rimfígado e coração) e depois fixados (rim, fígado, aorta e pâncreas) em formalina a 10% para o estudo histológico. Uma amostra de fígado foi armazenada a -20 graus para ensaio de conteúdo de glicogênio.

cistiteporfunção renal

2.6. Estimativa da Glicemia em Jejum.

Durante o período de tratamento, a glicemia de jejum foi quantificada semanalmente. Após 14 h de jejum, o sangue foi retirado das veias da cauda, ​​sob anestesia leve com éter, utilizando microcapilares. Em seguida, foi centrifugado a 5000 ×g por 10 min, e a glicemia foi estimada no soro usando um kit de glicose comercial (BioSystems, Espanha) baseado no método da glicose oxidase peroxidase [16].

2.7. -Inibição da glicosidase, estudo in vivo.

No dia anterior ao sacrifício, os ratos privados de alimento por 14 h foram usados ​​para monitorar a inibição da -glicosidase, in vivo. 30 min antes da carga oral de sacarose (2 g/kg), cada grupo foi administrado pela dose correspondente ao seu tratamento. O sangue foi coletado, da veia da cauda, ​​usando microcapilares, imediatamente antes da administração da dose teste (-30 min), imediatamente antes da carga de sacarose (0 min) e aos 30, 60 e 120 min após a carga de sacarose. Após centrifugação a 5000 ×g/10 min, o nível de glicose no plasma foi determinado pelo método da glicose oxidase peroxidase [17].

2.8. Extração e determinação de glicogênio hepático.

Amostras pesadas de tecidos hepáticos ({{0}},3–0,5 g) de todos os grupos foram usadas para extrair glicogênio de acordo com Ong e Khoo[18]. As amostras de fígado foram primeiro esmagadas, homogeneizadas com 2 ml de hidróxido de potássio a 30 por cento (KOH) e fervidas a 100 graus/30 min. Então, para precipitar o glicogênio, a mistura foi tratada duas vezes com 4 ml de etanol a 95 por cento, e de cada vez, a mistura foi armazenada a 4 graus/30 min. Após centrifugação a 3000 rondas/min/15 min, o sedimento foi lavado com 8 ml de etanol a 95 por cento e depois centrifugado a 3000 rondas/min/15 min. O glicogênio obtido foi solubilizado em 1 ml de água destilada. A concentração de glicogênio foi monitorada usando um reagente anthrona. A densidade óptica foi lida a 625 nm.

2.9. Ensaios Bioquímicos.

A glicosúria foi medida por um Autokit comercial (BioSystems, Espanha) baseado no método da glicose oxidase peroxidase. A hemoglobina glicosilada (HbA1c) foi estimada usando um kit comercial (Cal-tech diagnostics, INC, EUA), e o colesterol foi determinado usando kits de ensaio comerciais (SGM-Italia, Roma, Itália). Triglicerídeos e creatinina urinária foram estimados usando kits de ensaio comerciais (Bio Sud Diagnostic SRL, Ricerca, Itália).

2.10. Histopatologia.

Após 3 ± 1 dia de fixação em formol a 10%, o pâncreas,rim, fígado e tecidos da aorta foram lavados com água destilada por 20 min. Em seguida, foram desidratados com título de etanol crescente (30 por cento por 30 min, 70 por cento por 30 min, 95 por cento por 30 min e 2 × 100 por cento por 60 min, respectivamente). Após uma etapa de iluminação em tolueno (2 × 120 min), os órgãos foram incluídos pela mistura parafintolueno (1V/1V) por 90 min, depois por parafina (2 ×120 min). Finalmente, os órgãos foram incluídos em parafina antes de serem seccionados a 7 μm (micrótomo Leitz 1512). Os cortes de pâncreas e fígado foram corados com hematoxilina e eosina.Rime cortes de aorta foram corados com tricrômio de Masson para mostrar fibrose/colágeno.

Antes da coloração com hematoxilina e eosina, os cortes foram desparafinizados e incubados em tolueno (2 × 5 min), depois hidratados por redução do título em etanol (100 por cento, 95 por cento e 70 por cento, respectivamente) por 5 min. Em seguida, para coloração de hematoxilina e eosina, após 20 min de lavagem, os núcleos celulares foram corados com imersão em hematoxilina por 5 min, seguido de 15 min de lavagem com água. Para corar o citoplasma, os cortes foram imersos em eosina a 1% por 5 min, depois lavados por 2 min. Após coloração, os cortes foram desidratados com etanol 100% (2 × 1/2 min) e tolueno (2 × 2 min). A coloração tricrômica de Masson, após a hidratação,rim, e os cortes de aorta foram refixados em solução de Bouin por 1 hora/56 graus . Em seguida, após 10 min de lavagem, os cortes foram corados em hematoxilina férrica de Weigert por 2 min. Após 10 min de enxágue, os cortes foram imersos em ácido fucsina por 3 min e, após 10 min de lavagem, foram diferenciados em ácido fosfomolibdico por 15 min. Para corar o colágeno, os cortes foram transferidos diretamente para verde claro por 15 min. Após 2 min de diferenciação em ácido acético a 1 por cento, as seções foram desidratadas em etanol a 95 por cento e 100 por cento por 1 min cada e depois clareadas em tolueno (2 × 1 min) [19–21].

Por fim, os cortes corados nas lamelas foram montados primordiais. Após a secagem, a observação microscópica foi feita utilizando o sistema ocular objetiva 40x do microscópio de luz OlympusTokyo (Japão).

Para determinar o efeito da droga no tecido do pâncreas, foram calculados o número e o diâmetro das células das ilhotas pancreáticas. Para quantificar o colágeno emrimseções, os resultados foram pontuados de zero a três (0: sem colágeno, 1: colágeno fraco, 2: colágeno moderado e 3: colágeno forte) [22]. O efeito do tratamento na aorta foi avaliado medindo-se o diâmetro da aorta, e o dano hepático foi elucidado pelo desenvolvimento de gotículas lipídicas.

2.11. Análise Estatística.

Todos os valores foram expressos como média ± SEM. A análise estatística e comparação de médias foram realizadas utilizando-se o teste de Student não pareado para comparar as médias de dois grupos e o teste de Student pareado para comparar duas médias dentro do mesmo grupo. Para determinar o efeito protetor da droga sobre orinse fígado, utilizou-se o teste do qui-quadrado. valores p<0.05 were="" considered="">

3. Resultados

3.1. Efeito do tratamento medicamentoso na glicemia de jejum em STZ-

Ratos Diabéticos Induzidos. Em ratos controle diabéticos não tratados, foi observada elevação significativa da glicose no sangue em jejum em comparação com ratos controle normais. O tratamento com 200 mg/kg de AqTh diminuiu o nível de glicose no sangue a partir da 1ª semana de administração, e esse efeito foi significativo na 3ª (p ​​< 0,001)="" e="" 4ª="" semana="" (p="">< 0,05)="" em="" comparação="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados.="" o="" tratamento="" com="" 50="" mg/kg="" de="" eath="" reduziu="" a="" hiperglicemia="" a="" partir="" da="" 2ª="" semana,="" sendo="" esse="" efeito="" significativo="" (p="">< 0,05)="" na="" 3ª="" e="" 4ª="" semanas.="" na="" 2ª,="" 3ª="" e="" 4ª="" semana,="" o="" efeito="" ea*="" foi="" estatisticamente="" semelhante="" ao="" de="" 10="" mg/kg="" de="" acarbose="" (figura="">

3.2. Efeito de drogas na atividade de -glucosidase, estudo in vivo.

Em ratos normais de controle, a glicose no sangue foi aumentada para 1,48 g/l.3{11}} min após o carregamento de sacarose e então retorna ao valor normal em 120 min enquanto, em ratos diabéticos não tratados, a glicemia foi aumentou para 2,76 g/l em 30 min de carregamento de sacarose para atingir 2,85 g/l em 120 min. 50 mg/kg de EaTh preveniu significativamente (p < 0,05)="" a="" hiperglicemia="" induzida="" pela="" carga="" de="" sacarose="" em="" 30="" e="" 60="" min="" em="" comparação="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados.="" no="" grupo="" aqth="" 200="" mg/kg,="" foi="" demonstrado="" um="" efeito="" anti-hiperglicêmico.="" os="" níveis="" de="" glicose="" no="" sangue="" atingiram="" 2,63="" g/le="" 2,70="" g/l="" em="" 30="" e="" 60="" min,="" respectivamente,="" e="" diminuíram="" para="" 2,21="" g/l="" em="" 120="" min.="" 10="" mg/kg="" de="" acarbose="" preveniu="" significativamente="" (p="">< 0,01)="" a="" hiperglicemia="" induzida="" pela="" carga="" de="" sacarose="" em="" 30,="" 60="" e="" 120="" min="" em="" comparação="" com="" o="" controle="" diabético.="" o="" efeito="" da="" acarbose="" foi="" estatisticamente="" semelhante="" ao="" eaththeffffect="" (figura="">

3.3. Efeito da droga

Tratamento sobre peso corporal, alimentação e ingestão de água. O ganho de peso corporal de ratos diabéticos não tratados foi significativamente (p < {{0}}.05)="" diminuído="" em="" comparação="" com="" ratos="" normais.="" aqth="" impediu="" significativamente="" (p="">< 0.05)="" a="" queda="" de="" peso="" corporal="" em="" comparação="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados.="" ratos="" tratados="" com="" eath="" e="" acarbose="" não="" alteraram="" significativamente="" (p=""> 0.05) o ganho de peso corporal em comparação com ratos diabéticos não tratados. No final do tratamento, a ingestão de água não mudou em ratos diabéticos não tratados, grupo AqTh, EaTh e acarbose em comparação com os dados antes do tratamento, enquanto a ingestão de alimentos foi significativamente aumentada em ratos diabéticos e ratos tratados com AqTh, EaTh e acarbose (p < 0,05,="" p="">< 0,05,="" p="">< 0,05,="" a="" dp="">< 0,01,="" respectivamente)="" em="" comparação="" com="" antes="" da="" administração="" do="" medicamento="" (tabela="">

3.4. Efeito do tratamento medicamentoso nos parâmetros urinários.

Após o período de tratamento de {{0}}semanas, a creatinina urinária e a glicosúria aumentaram significativamente (p < 0.05="" ep="">< 0,001,="" respectivamente)="" em="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados="" quando="" comparados="" com="" ratos="" normais.="" a="" administração="" oral="" de="" aqth="" diminuiu="" significativamente="" (p="">< 0,05)="" a="" creatinina="" urinária="" em="" comparação="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados,="" mas="" nenhuma="" diferença="" significativa="" foi="" observada="" na="" glicosúria="" quando="" comparado="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados.="" o="" tratamento="" com="" eath="" preveniu="" o="" aumento="" da="" creatinina="" urinária="" em="" comparação="" com="" ratos="" normais;="" no="" entanto,="" eath="" não="" alterou="" significativamente="" a="" glicosúria.="" por="" outro="" lado,="" o="" efeito="" aqth="" e="" eath="" na="" creatinina="" urinária="" e="" na="" glicosúria="" foi="" estatisticamente="" semelhante="" ao="" de="" 10="" mg/kg="" de="" acarbose.="" por="" fim,="" não="" houve="" diferença="" significativa="" no="" volume="" urinário="" ao="" comparar="" os="" dados="" antes="" e="" após="" o="" tratamento="" com="" aqth,="" eath="" ou="" acarbose="" (tabela="">

3.5. Efeito do tratamento medicamentoso nos parâmetros bioquímicos.

Após o período de tratamento de {{0}}semanas, a HbA1c aumentou significativamente (p < 0,05),="" em="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados,="" quando="" comparados="" a="" ratos="" normais.="" a="" administração="" oral="" de="" aqth="" preveniu="" a="" elevação="" de="" hba1c="" em="" comparação="" com="" ratos="" normais.="" ao="" final="" do="" período="" de="" tratamento,="" a="" quantidade="" de="" glicogênio="" hepático="" estava="" significativamente="" diminuída="" (p="">< 0,05)="" em="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados="" quando="" comparados="" a="" ratos="" normais.="" os="" tratamentos="" aq*="" e="" ea*="" não="" mostraram="" efeito="" significativo="" no="" glicogênio="" hepático="" em="" comparação="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados,="" enquanto="" o="" tratamento="" com="" acarbose="" não="" alterou="" a="" quantidade="" de="" glicogênio="" hepático="" em="" comparação="" com="" ratos="" normais.="" finalmente,="" os="" resultados="" de="" colesterol="" total="" e="" triglicerídeos="" mostram="" que="" não="" há="" alteração="" significativa="" após="" o="" tratamento="" com="" aqth,="" eath="" ou="" acarbose="" em="" comparação="" com="" ratos="" normais="" e="" diabéticos="" (tabela="">

3.6. Efeito do Tratamento Medicamentoso no Peso do Órgão.

A Tabela 4 mostra o fígado,rim, e peso do coração no final do período de tratamento. Os resultados indicam querimo peso aumentou significativamente em ratos diabéticos não tratados em comparação com ratos normais. O tratamento com 200 mg/kg de AqTh ou 50 mg/kg de EaTh não alterou o peso do fígado, rim e coração quando comparado a ratos diabéticos não tratados, enquanto há uma elevação significativa no peso do fígado e do coração de ratos tratados com acarbose em comparação com ratos diabéticos não tratados .

3.7. Observação Histopatológica

3.7.1. Alterações do Pâncreas.

A observação microscópica de células das ilhotas pancreáticas de ratos normais mostra uma aparência histológica normal com grande diâmetro e alta densidade de granulação (Figura 3). Em ratos diabéticos não tratados, redução significativa do diâmetro e número de células das ilhotas (p < 0.001="" ep="">< 0.01,="" respectivamente)="" )="" foi="" observado.="" tratamentos="" com="" 200="" mg/kg="" de="" aqth="" impediram="" significativamente="" a="" redução="" do="" diâmetro="" e="" do="" número="" de="" células="" da="" ilhota="" de="" langerhans="" (p="">< 0,01="" ep="">< 0,05,="" respectivamente).="" ao="" mesmo="" tempo,="" 50="" mg/kg="" de="" eath="" protegeu="" significativamente="" (p="">< 0,05)="" o="" diâmetro="" e="" o="" número="" de="" células="" contra="" redução.="" o="" tratamento="" com="" 10="" mg/kg="" de="" acarbose="" evitou="" significativamente="" (p="">< 0,05)="" a="" redução="" do="" número="" de="" células="" das="">

3.7.2. Alterações Renais.

As marcas de coloração de Masson nas fibras de colágeno azul/verde, nos núcleos marrons, no citoplasma das fibras musculares vermelhas e nas células sanguíneas laranja. Colágeno tubulointersticial mínimo foi observado no grupo normal (Figura 4). Um aumento significativo (p < 0.01)="" de="" colágeno="" tubulointersticial="" foi="" detectado="" em="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados.="" tratamento="" com="" 20{{10}}="" mg/kg="" aqth="" e="" 50="" mg/kg="" de="" eath="" preveniram="" significativamente="" (p="">< 0,001="" ep="">< 0,05,="" respectivamente)="" o="" colágeno="" tubulointersticial="" em="" comparação="" com="" ratos="" diabéticos="" não="" tratados,="" mas="" o="" tratamento="" com="" 10="" mg/kg="" de="" acarbose="" não="" alterou="" significativamente="" (p=""> 0,05) esse colágeno tubulointersticial. Por outro lado, o colágeno dos glomérulos foi observado em 33,3 por cento dos ratos normais. Em ratos diabéticos, o colágeno glomérulo foi detectado em todos os ratos (100 por cento). O tratamento com 200 mg/kg de AqTh reduziu significativamente (p < 0,05)="" o="" colágeno="" dos="" glomérulos="" para="" 40="" por="" cento,="" mas="" ea*="" e="" acarbose="" não="" (figura="">

3.7.3. Alterações hepáticas.

O exame de cortes corados com hematoxilina e eosina mostrou que os ratos normais tinham uma aparência histológica normal. Em ratos diabéticos não tratados, foi observada uma importante alteração degenerativa no tecido hepático. Gotículas lipídicas apareceram em todos os ratos (100 por cento). O tratamento com 200 mg/kg de AqTh e 50 mg/kg de EaTh atenuou significativamente (p < 0,05)="" esse="" efeito.="" o="" percentual="" de="" proteção="" foi="" de="" 60="" e="" 50="" por="" cento,="" respectivamente.="" no="" entanto,="" o="" tratamento="" com="" 10="" mg/kg="" de="" acarbose="" não="" atenuou="" esse="" dano="" hepático="" (figura="">

3.7.4. Alterações da Aorta.

A observação microscópica de luz mostra que ratos diabéticos não tratados tinham diâmetro da aorta normal em comparação com ratos normais. O tratamento com 200 mg/kg de AqTh, 50 mg/kg de EaTh ou 10 mg/kg de acarbose não alterou significativamente o diâmetro da aorta em comparação com ratos normais e diabéticos (Figura 6).

4. Discussão

Neste estudo, demonstramos pela primeira vez o efeito antidiabético da administração de T. hirsuta a médio prazo (4 semanas) e sua prevenção derenale complicações hepáticas em ratos diabéticos induzidos por STZ.

Nossos resultados indicaram que o tratamento de médio prazo com 200 mg/kg de AqTh ou 50 mg/kg de EaTh diminui significativamente a glicemia de jejum em ratos diabéticos tratados com STZ em comparação com ratos diabéticos não tratados com STZ. EaTh mostrou uma atividade inibitória de -glicosidase semelhante quando comparada a 10 mg/kg de acarbose, mas AqTh não inibiu a atividade de -glicosidase após o carregamento de sacarose. Esses resultados indicam que o efeito anti-hiperglicêmico de médio prazo da Ea* está relacionado à inibição da glicosidase intestinal. Assim, este achado confirma nossos resultados anteriores [13] enquanto o efeito antidiabético do Aq* parece estar relacionado a outro mecanismo que não a via da -glicosidase. Além disso, observamos uma redução nos níveis de HbAc1 em ratos diabéticos tratados com Aq* enquanto o tratamento com Ea* não alterou os níveis de HbAc1 quando comparados a ratos diabéticos não tratados. Isso explica por que os inibidores da glucosidase são frequentemente prescritos com outras drogas antidiabéticas no tratamento do diabetes.

O estudo histopatológico dos cortes do pâncreas mostrou que a administração de AqTh e EaTh por 4 semanas aumenta significativamente o diâmetro e o número de células nas ilhotas de Langerhans. Estudos semelhantes provaram que muitos extratos de plantas restauraram significativamente o diâmetro das ilhotas e o número de células em ratos diabéticos [23-25].

Consequentemente, o mecanismo plausível de ação do AqTh no controle do nível de glicose no sangue pode ser o aumento da secreção de insulina pelas células pancreáticas. Assim como outros mecanismos possíveis, o AqTh pode sensibilizar o receptor de insulina à insulina ou estimular as células-tronco das ilhotas de Langerhans no pâncreas de ratos diabéticos induzidos por STZ [25].

Portanto, concluímos que os compostos fitoquímicos anti-hiperglicêmicos presentes na AqTh são diferentes dos da EaTh.

Muitos estudos provaram que metabólitos secundários, como flavonóides, taninos e terpenóides, têm potenciais efeitos inibitórios sobre a alfa-glicosidase [26-28]. Em um estudo anterior de nossa equipe, uma fração rica em polifenóis de T. hirsuta demonstrou um potente efeito antidiabético em ratos diabéticos[29]. Assim, a ação inibitória da -glicosidase da EaTh deve-se provavelmente à presença de flavonóides.

Sabe-se que o diabetes está associado a complicações macro e microvasculares, como a nefropatia. As estatísticas mostraram que de todos os pacientes em diálise, os diabéticos representam 20,6 por cento em 2001 contra 13,1 por cento em 1995 e 6,9 ​​por cento em 1989. A taxa de mortalidade dos pacientes em diálise é insignificantemente maior em diabéticos do que em não diabéticos (241,4/1000 vs. 153,99/1000 pessoa-ano) [30]. A sobrevida média do diabetes tipo 2 em diálise é de aproximadamente 3 anos [31, 32]. A nefropatia diabética é caracterizada pelo acúmulo de algumas proteínas como o colágeno no mesângio glomerular e no espaço tubulointersticial que levam àrenalfibrose e assim por dianterenalfalha [33-35]. Neste estudo, demonstramos que a administração oral a médio prazo de 200 mg/kg de AqTh ou 50 mg/kg de EaTh previne o aumento da creatinina urinária e o colágeno renal tubulointersticial quando comparado a ratos diabéticos não tratados, como mostrado emrimresultados histopatológicos. Esses achados demonstram que AqTh e EaTh podem proteger contra a fibrose renal através da inibição do acúmulo de proteínas da matriz extracelular (MEC). Esses resultados são semelhantes a outros estudos etnofarmacológicos que demonstraram que o alho e a Sclerocaryabirrea melhoram o processo de fibrose renal na nefropatia diabética [36, 37]. O efeito protetor contra o acúmulo de proteína na MEC renal é devido à inibição da proteína quinase B/alvo de mamífero da via de sinalização da rapamicina (PKB/mTOR) [38]. Pesquisas recentes demonstraram que a ativação de PKB causa a ativação de mTORC1 e sua proteína p70S6K a jusante, que são reguladores críticos do crescimento celular, proliferação celular e síntese de proteínas [39, 40].

Efeito decistachemelhorarfunção renal

Consequentemente, o manejo do diabetes mellitus com compostos AqTh e EaTh pode ter efeitos úteis sobrerenalfunção em pacientes diabéticos

Evidências sugerem que em ratos diabéticos, foi observada uma alteração complexa nas atividades de enzimas antioxidantes [41]. Essa alteração leva ao dano tecidual e desempenha um papel importante na patogênese das complicações diabéticas. No presente estudo, os resultados histopatológicos do fígado mostram que ratos diabéticos não tratados desenvolvem esteatose hepática caracterizada por gotículas lipídicas. Outros estudos descobriram que o fígado estava necrosado em ratos diabéticos induzidos por STZ [42]. A STZ é considerada um modelo clássico de indução de diabetes porque provoca toxicidade às células pancreáticas e morte celular [43], resultando em hipoinsulinemia e hiperglicemia. A insulina desempenha um importante papel metabólico como supressor da lipólise no tecido adiposo [44]. Assim, a hipoinsulinemia no diabetes leva a um aumento da liberação de ácidos graxos livres (FFAs) na corrente sanguínea [45] e ao influxo de ácidos no fígado. O acúmulo intra-hepático de triglicerídeos ocorre quando o influxo de lipídios para o fígado ultrapassa a capacidade hepática de exportar triglicerídeos para a corrente sanguínea [45] o que causa o desenvolvimento de esteatose hepática como complicação diabética [46].

No presente estudo, os dados histopatológicos mostram que a administração oral a médio prazo de 200 mg/kg de AqTh ou 50 mg/kg de EaTh protege significativamente o fígado sob esteatose por meio da diminuição do acúmulo de gotículas lipídicas. Achados semelhantes foram relatados por Eliza et al. [47]onde Costus speciosus diminuiu o distúrbio hepático. Além disso, outros estudos mostraram que a Camellia oleifera seedameniza a esteatose hepática através da regulação de AGL [48] e a curcumina reduz a esteatohepatite e a deposição de lipídios por ser um antioxidante e exercer funções anti-inflamatórias e de eliminação de radicais livres [49]. No entanto, o tratamento com acarbose não teve essa propriedade protetora do fígado. Isso confirma o efeito colateral dessa droga no fígado [50].

Além disso, T. hirsuta contém esteróis, cumarinas, terpenos, taninos, álcool alifático, lactona, alcanos e alcanóis [51]. Curiosamente, os efeitos anti-hiperglicêmicos e antidiabéticos de AqTh e EaTh podem ser devidos à presença desses fitoquímicos ou outros compostos desconhecidos.

5. Conclusões

Em conclusão, nosso estudo mostrou que a administração a médio prazo de AqTh e EaTh de T. hirsuta teve o potencial de diminuir a glicemia em ratos diabéticos induzidos por STZ. O efeito anti-hiperglicêmico da EaTh pode ser parcialmente explicado pela inibição da atividade da glicosidase intestinal. E a atividade anti-hiperglicêmica do AqTh pode ser atribuída à estimulação da secreção de insulina pelas células das ilhotas pancreáticas. Além disso, AqTh e EaTh mostraram um efeito preventivo crucial contrarenalcomplicações de fibrose e esteatose hepática. Assim, esses achados sugerem que AqTh e EaTh podem ser considerados um tratamento antidiabético oral eficiente. Atualmente, nossos estudos estão focados no isolamento e identificação dos compostos ativos de EaTh e AqTh, que são responsáveis ​​pelo efeito antidiabético do T. hirsuta.

Abreviaturas

AqTh: Extrato aquoso de plus ymelaea hirsuta

DM1: diabetes tipo 1

DM2: diabetes tipo 2

EaTh: Fração de acetato de etila de plus ymelaea hirsuta

MEC: matriz extracelular

ESRD: estágio finalrenaldoença

AGL: Ácido graxo livre

mTOR: alvo mamífero da rapamicina

PKB: Proteína quinase B

STZ: Estreptozotocina

T. hirsuta: plus ymelaea hirsuta

UMPO: Herbarium University Mohamed Premier of

Oujda, Marrocos

OMS: Organização Mundial da Saúde.

Disponibilidade de dados

Os dados usados ​​para apoiar os achados deste estudo estão disponíveis mediante solicitação dos autores.

Conflitos de interesse

Os autores declaram que não há conflitos de interesse.

Agradecimentos

Os autores desejam expressar seu agradecimento a Ramdaoui Karim e Badraoui Mustapha por sua assistência técnica.

cistache bienfaitsporrim

De: ' Efeito benéfico de Thymelaea hirsuta na degeneração das ilhotas pancreáticas, fibrose renal e danos no fígado' Sanae Abid

---Jornal do Mundo Científico