Efeito terapêutico de Cistanche Deserticola na defecação em modelo de rato de constipação senil
Mar 27, 2022
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Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Abstrato
FUNDO
A constipação é uma das doenças funcionais gastrointestinais crônicas. Afeta seriamente a qualidade de vida. Cistanche deserticola (C. deserticola) pode tratar a constipação obviamente, mas seu mecanismo não foi esclarecido. Supomos que seu mecanismo melhorou a motilidade intestinal ao estimular as células intersticiais de Cajal (ICC). A ativação do receptor C-kit na superfície do ICC está intimamente relacionada à função do ICC, e as vias de sinalização do fator de células-tronco (SCF)/C-kit desempenham um papel importante nele. Para investigar o mecanismo de como C. deserticola trata a constipação, este estudo teve como objetivo estabelecer um modelo de constipação em ratos e explorar o papel da via de sinalização SCF/C-kit no tratamento.
MIRAR
Explorar as vias de sinalização SCF/C-kit no papel de C. deserticola no tratamento da constipação por um modelo de rato de constipação.
MÉTODOS
Quarenta e oito ratos 8-mo-velho Sprague-Dawley foram divididos em 4 grupos pelo método de peso aleatório: grupo normal (n=12), grupo modelo (n=12), grupo C. deserticola (n=12) e grupo de bloqueadores (n=12). O grupo normal recebeu por gavagem salina normal; o grupo modelo recebeu loperamida por gavagem; o grupo bloqueador recebeu loperamida e C. deserticola por gavagem, e STI571 foi injetado intraperitonealmente. Durante o tratamento, o peso, grânulos fecais e qualidade fecal foram registrados a cada 10 dias. No dia 20 após a indução do modelo, os tecidos do cólon de cada grupo foram removidos. A coloração com hematoxilina e eosina foi utilizada para observar as alterações patológicas. Os níveis de expressão dos genes SCF, C-kit e Aquaporin foram detectados por imuno-histoquímica, Western blotting e reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real. As mitocôndrias epiteliais colônicas e as células caliciformes foram observadas por microscopia eletrônica de transmissão.
RESULTADOS
Em comparação com o grupo normal, à medida que o tratamento progrediu, o peso dos ratos nos grupos modelo e bloqueador diminuiu significativamente, o peso das fezes diminuiu e a qualidade das fezes ficou seca (P < {{0}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" reverteu="" a="" diminuição="" do="" peso="" corporal="" e="" do="" peso="" das="" fezes="" e="" melhorou="" a="" qualidade="" das="" fezes.="" a="" análise="" histopatológica="" indicou="" que="" o="" epitélio="" da="" mucosa="" colônica="" no="" grupo="" modelo="" estava="" incompleto="" e="" o="" arranjo="" das="" glândulas="" estava="" irregular="" ou="" danificado.="" o="" tratamento="" com="" c.="" deserticola="" melhorou="" a="" integridade="" e="" continuidade="" das="" células="" epiteliais="" e="" o="" arranjo="" regular="" das="" glândulas.="" os="" agentes="" bloqueadores="" inibiram="" os="" efeitos="" de="" c.="" deserticola="" a="" imunohistoquímica="" e="" a="" reação="" em="" cadeia="" da="" polimerase="" quantitativa="" em="" tempo="" real="" mostraram="" que="" a="" expressão="" de="" scf="" e="" c-kitprotein="" ou="" genes="" no="" tecido="" colônico="" do="" grupo="" modelo="" estava="" diminuída="" (p="">< 0,05),="" enquanto="" o="" tratamento="" com="" c.="" deserticola="" aumentou="" a="" expressão="" de="" proteínas="" ou="" genes="" (p="">< 0,05).="" western="" blotting="" mostrou="" que="" a="" expressão="" de="" aquaporina="" apq3="" estava="" aumentada,="" enquanto="" a="" expressão="" de="" cx43="" diminuiu="" no="" grupo="" modelo.="" o="" tratamento="" com="" c.="" deserticoinibiu="" a="" expressão="" de="" apq3="" e="" promoveu="" a="" expressão="" de="" cx43.="" a="" microscopia="" eletrônica="" de="" transmissão="" mostrou="" que="" as="" mitocôndrias="" do="" epitélio="" colônico="" no="" grupo="" modelo="" estavam="" inchadas="" e="" dispostas="" desordenadamente,="" e="" as="" microvilosidades="" eram="" esparsas.="" a="" condição="" foi="" melhor="" no="" grupo="" c.="" deserticola.="" camundongos="" tratados="" com="" bloqueador="" sti571="" confirmaram="" que="" o="" bloqueio="" da="" via="" scf/c-kit="" inibiu="" a="" melhora="" da="" constipação="" por="" c.="">
CONCLUSÃO
C. deserticola melhorou a defecação em ratos com constipação, e a via de sinalização SCF/C-kit, que é um elo chave da função ICC, desempenhou um papel importante no tratamento.
Palavras-chave:Cistanche deserticola; Constipação senil; Fatores de células-tronco; C-kit
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INTRODUÇÃO
A constipação senil (CS) é uma das doenças crônicas funcionais gastrointestinais comuns em pacientes geriátricos, que induz ou agrava eventos cerebrovasculares e outras doenças e afeta seriamente a qualidade de vida da população idosa[1,2]. etiologia e patogênese da SCare calor gastrointestinal, deficiência de Yin e Jin e desidratação intestinal [3,4], enquanto Cistanche deserticola (C. deserticola) pode aquecer os rins e relaxar os intestinos. a melhora da motilidade e o tratamento do SC são claros, mas seu mecanismo não foi esclarecido[5,6]. As células Cajal intersticiais (ICCs) são um tipo especial de células mesenquimais no trato gastrointestinal. A ativação do receptor C-kit na superfície das ICCs está intimamente relacionada à proliferação, diferenciação e função celular. Os ICCs participam da patogênese de muitas disfunções motoras gastrointestinais[7,8]. A ativação do C-kit depende da ligação de seu ligante fator de células-tronco (SCF)[9]. Investigar o efeito e mecanismo de ação de C. deserticola em SC, este estudo teve como objetivo estabelecer um modelo de SC em ratos induzidos por loperidol para explorar o papel da via de sinalização SCF/C-kit no tratamento da constipação por C. deserticola.
MATERIAIS E MÉTODOS
Materiais experimentais
Animais experimentais:Os animais experimentais foram 48 ratos Sprague Dawley machos 8-mo-velhos pesando 500-550 g; todos comprados da Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd. Ratos foram criados no laboratório de animais da Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., recebendo luz diurna e noturna, comida e bebida normais. Todos os procedimentos seguiram as diretrizes de gestão emitidas pelo Comitê de Ética do Hospital de Medicina Tradicional Chinesa de Chongqing.
Reagentes primários:Os reagentes primários incluíram loperamida (Sigma, St. Louis, MO, Estados Unidos), C. deserticola de Hubei Jurui Medicina Tradicional Chinesa DecoctionCo. Ltd., STI571 da Chinese Selleck Co. Ltd., e SCF, C-kit, conexina 43 (Cx43), aquaporina 3 (AQP3) e anticorpos -actina (Abcam, Cambridge, MA, Estados Unidos), PrimeScript II 1st Strand cDNA Kit de síntese e Premix Taq™ (Ex Taq™ Versão 2.0)(Takara Co. Ltd., Japão).
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Métodos
Preparação e agrupamento do modelo SC:Para evitar a influência de fatores de confusão, como peso corporal, nos resultados experimentais, os ratos foram agrupados aleatoriamente pelo método de agrupamento aleatório em blocos. Quarenta e oito ratos foram alimentados adaptativamente por 1 semana, e os ratos foram numerados em ordem de peso de leve a pesado. De acordo com a ordem de peso corporal, os ratos foram divididos em 12 zonas (o peso dos ratos em cada zona foi semelhante), com 4 ratos em cada zona. As 12 zonas foram divididas em 4 grupos de 12 (normal, modelo, C. deserticola e bloqueador). Os ratos do grupo modelo receberam loperamida (0.0625/100 g, 10 mL/kg) por gavagem. A primeira dose de gavagem foi dobrada e a droga foi administrada às 10:00 todos os dias, uma vez ao dia por 20 dias consecutivos. O grupo normal recebeu a mesma quantidade de solução salina normal por gavagem. Além disso, o grupo modelo foi tratado com C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) por gavagem. O grupo bloqueador recebeu C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 mL/kg) por gavagem e STI571 (25 mg/mL, 1 mL/kg) por injeção intraperitoneal. Durante o experimento, o peso corporal, peso das fezes e condição das fezes foram registrados a cada 10 dias. Nenhuma morte acidental ocorreu em nenhum dos ratos. Vinte dias depois, os ratos foram mortos e o tecido colônico foi removido para exame e preservação do nitrogênio líquido. As peças restantes foram fixadas e embutidas.
Análise histopatológica:Os ratos em jejum durante a noite foram anestesiados por injeção intraperitoneal com 7 por cento de hidrato de cloral (5 mL/kg) no dia seguinte. O abdome foi aberto para separar o tecido colônico e foram removidos 8-10 mm do cólon. O conteúdo intestinal foi removido por agitação suave em polibutilenosuccinato pré-resfriado e fixado por 24 h em solução fixadora de paraformaldeído a 4%. Foi realizada inclusão em parafina convencional. Cortes de tecido (5 μm) foram removidos para coloração de hematoxilina e eosina, e a morfologia histopatológica foi observada ao microscópio.
Detecção da expressão de SCF e C-kit por coloração imuno-histoquímica:Os tecidos parafínicos examinados pela histopatologia acima foram seccionados, reidratados com etanol gradiente desparafinado com xileno seccionado, o antígeno remediado por calor e selados por 1h com soro de cabra à temperatura ambiente. Os anticorpos primários SCF e C-kit foram adicionados gota a gota e os tecidos foram mantidos durante a noite a 4 graus. Após a lavagem com polibutilenosuccinato, a peroxidase de rábano foi descartada para marcar o anticorpo secundário, enxaguada com polibutileno succinato por 5 min, gota 2,4-solução cromogênica de ácido diaminobutírico, re-corar com hematoxilina, desidratação de álcool de gradiente reverso, transparente por xileno e um neutro vedação de resina. Microscopicamente, os núcleos eram azul-púrpura, e os produtos do resultado positivo eram partículas amarelo-acastanhadas ou amarelas.
Detecção de expressão de mRNA de C-kit em tecido colônico por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (RT-qPCR):O tecido colônico de rato congelado foi moído por um homogeneizador e 1 mL de RNAiso Plus foi adicionado. O RNA total do tecido colônico foi extraído pelo método do clorofórmio/isopropanol, e a qualidade do RNA foi detectada por eletroforese em gel. Depois de ser identificado por um gerador de imagens de gel Bio-Rad, 1 ug de RNA foi revertido em cDNA por Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. De acordo com o banco de dados NCBI Gene ID: 64030, a região CDS do gene C-kit foi encontrada e combinada com NCBI Primer-Blast design Sequência de primer, que foi sintetizada por Sangon Biotech Co. Ltd, sequência de primer C-kit sense strand 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', antisense strand 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - fita sentido de actina 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', fita anti-sentido 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. A amplificação por PCR foi realizada em um instrumento Bio-RadCFX90 Real-Time PCR. As condições para o ensaio de PCR foram desnaturação inicial a 95 graus por 5 min, 30 ciclos de 95 graus por 30 segundos, 60 graus por 30 segundos e 72 graus por 1 minuto seguido por uma extensão final a 72 graus por 10 minutos. 2-ΔΔCt (ΔCt=valor Ct - -actin Ctvalue) foi usado para analisar a expressão gênica relativa.
Detecção do nível de expressão proteica de Cx43 e AQP3 no tecido colônico por Western blotting:Cerca de 1 cm de tecido colônico congelado foi coletado e lisado com líquido de pirólise forte RIPA (100 μL). O tecido foi homogeneizado com um homogeneizador de vidro 20 vezes e transferido para um tubo de centrífuga de 1,5 mL. O sobrenadante foi extraído após centrifugação a 12.000 rpm a 4 graus por 5 min, e a concentração de proteína total no sobrenadante foi determinada pelo método BCA. Removemos 25 ug de proteína desnaturada para realizar eletroforese em gel de dodecil sulfato de sódio-poliacrilamida e, em seguida, transferimos as proteínas no gel para membrana de fluoreto de polivinilideno a uma corrente constante de 200 mA, em seguida, selada por 5% de leite desnatado confinando líquido por 2 h em temperatura ambiente. Os anticorpos primários correspondentes foram diluídos com fluido de vedação, incubados a 4 graus durante a noite, depois lavados a resistência da membrana e adicionados segundos anticorpos. Após a adição do fluido ECL, eles foram colocados sob o medidor de exposição para o teste por uma análise de densidade óptica.
Microscopia eletrônica de transmissão:Retiramos cerca de 1 cm de tecido colônico proximal, fixamos em glutaraldeído a 2,5 por cento por 24 h, desidratamos com acetona graduada, embutimos em Epon812 e cortamos seções ultrafinas de 50 nm em ultramicrótomo. Os cortes foram corados com acetato de dióxido de urânio e líquido de tingimento de citrato de chumbo em temperatura ambiente por 10 min. Observamos vilosidades colônicas, mitocôndrias de células epiteliais e células caliciformes sob um microscópio eletrônico de transmissão Philips Tecnai-10.
Análise estatística
O software SPSS 19.0 foi utilizado para análise dos dados e o software GraphPad Prism8.4 foi utilizado para plotagem dos resultados. O teste de Shapiro-Wilk foi utilizado para teste de normalidade. Os dados com distribuição normal foram representados por média ± DP. Itens de erro foram usados para representar a média ± DP da hemoglobina após o tratamento. O teste t de Student foi utilizado para comparação entre dois grupos. A análise de variância foi utilizada para comparação entre vários grupos. O método de Student-Newman-Keuls foi usado para comparação entre múltiplos grupos em pares, e o teste de Dunnett foi usado para medir as diferenças entre cada grupo experimental e grupo controle em sequência. conduzido. Se o teste de esfericidade mostrou P > 0.{{10}}5, a análise de variância de dados de medição repetida foi usada. Se P < 0,05,="" foi="" tomada="" a="" equação="" de="" estimativa="" generalizada.="" os="" dados="" que="" não="" obedeceram="" a="" uma="" distribuição="" normal="" foram="" representados="" por="" m="" (p25,="" p75),="" e="" o="" teste="" de="" soma="" de="" postos="" de="" kruskal-wallis="" h="" foi="" usado="" para="" comparação="" entre="" os="" grupos.="" o="" teste="" do="" χ2="" foi="" usado="" para="" comparação="" entre="" os="" grupos="" quando="" os="" dados="" eram="" dados="" não="" ordenados,="" e="" o="" teste="" do="" χ2="" de="" pearson="" foi="" usado="" se="" a="" proporção="" de="" células="" com="" frequência="" teórica="">< 5="" fosse="">< 20="" por="" cento="" .="" se="" a="" proporção="" de="" células="" com="" frequência="" teórica="">< 5="" fosse="" maior="" ou="" igual="" a="" 20="" por="" cento,="" foi="" utilizado="" o="" teste="" exato="" de="" fisher.="" p="">< 0,05="" foi="" usado="" para="" determinar="" se="" a="" diferença="" era="" estatisticamente="">
Figura 1 Alterações histopatológicas colônicas.
RESULTADOS
Condições Gerais
Um dia após a gavagem de loperamida em comparação com o grupo normal, o peso corporal e o peso das fezes no grupo modelo diminuíram significativamente (P <{0}},05), mas="" não="" houve="" diferença="" significativa="" na="" qualidade="" das="" fezes="" pontuação="" (p=""> 0,05). O tratamento com C. deserticola no grupo modelo retardou a diminuição do peso corporal e do peso das fezes (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Histopatologia do cólon
A coloração com hematoxilina e eosina do tecido colônico de ratos é mostrada na Figura 1. No grupo normal, as vilosidades intestinais estavam intactas, a mucosa intestinal estava intacta e contínua, as células e glândulas estavam dispostas regularmente. Mucosa e submucosa não estavam infiltradas por células inflamatórias e a estrutura tecidual era normal. No grupo modelo, as vilosidades e mucosas intestinais foram amplamente destruídas, as vilosidades locais foram descamadas e frouxamente arranjadas e parte da estrutura glandular desapareceu. No grupo C. deserticola, a coloração histopatológica foi menor que a do grupo modelo, mas houve necrose em algumas células caliciformes. Após injeção intraperitoneal no grupo bloqueador, comparado ao grupo C.deserticola, ainda houve perda local das vilosidades intestinais, e houve fratura e perda da mucosa intestinal.
Figura 2 Expressão do fator de células-tronco e razão de densidade óptica relativa em tecido colônico por detecção imuno-histoquímica.
Detecção da expressão do fator de células-tronco e da proteína C-kit por coloração imuno-histoquímica
A coloração imuno-histoquímica mostrou que SCF e C-kit foram expressos no cólon do grupo controle. Comparado com o grupo controle, a expressão de SCF e C-kit no grupo modelo foi significativamente diminuída (P < 0.05).="" comparado="" com="" o="" grupo="" modelo,="" a="" expressão="" de="" scf="" e="" c-kit="" no="" grupo="" c.="" deserticola="" foi="" significativamente="" aumentada="" (p="">< 0.05).="" não="" houve="" diferença="" na="" expressão="" de="" scf="" e="" c-kit="" entre="" os="" grupos="" bloqueador="" e="" modelo="" (p="">< 0,05,="" figuras="" 2="" e="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Esses resultados indicaram que a expressão de C-kit ajustada por C. deserticola participou na melhora da constipação, e os bloqueadores inibiram a eficácia de C. deserticola.
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Western blotting
Western blotting mostrou que a proteína AQP3 foi expressa em um nível baixo no grupo controle normal, enquanto estava significativamente aumentada no grupo modelo em comparação com o grupo controle (Figura 5) (P < 0.05)="" .="" a="" expressão="" da="" proteína="" aqp3="" foi="" diminuída="" após="" o="" tratamento="" com="" c.="" deserticola,="" e="" o="" efeito="" inibitório="" de="" c.deserticola="" sobre="" a="" expressão="" de="" aqp3="" foi="" inibido="" pelo="" tratamento="" com="" bloqueador="" (p="">< 0,05).="" a="" expressão="" de="" cx43="" foi="" oposta="" à="" de="" aqp3.="" esses="" resultados="" sugerem="" que="" o="" efeito="" farmacológico="" de="" c.="" deserticola="" em="" ratos="" com="" sc="" foi="" alcançado="" promovendo="" a="" expressão="" de="" cx43="" e="" inibindo="" a="" expressão="" de="" aqp3="" (figuras="">
Microscopia eletrônica de transmissão
Após a indução de loperamida, inchaço mitocondrial e autofagia ocorreram em algumas das células epiteliais da mucosa colônica no grupo modelo. O número e o comprimento das microvilosidades intestinais diminuíram e ocorreu picnose de células caliciformes (Figura 8). Após o tratamento com C. deserticola, o número de microvilosidades intestinais aumentou. As microvilosidades foram organizadas ordenadamente e a estrutura estava completa. As células caliciformes têm menor comprimento, morfologia irregular das mitocôndrias e grave picnose das células caliciformes.
Figura 3 Expressão de C-kit e razão de densidade óptica relativa em tecido colônico por detecção imuno-histoquímica.
DISCUSSÃO
A constipação é comum na população idosa e é um dos sintomas comuns que afetam o estado de saúde e a qualidade de vida dos idosos[10,11]. Em termos da medicina tradicional chinesa, Bai et al[12] acreditavam que a patogênese básica da SC era a disfunção da função de condução do intestino grosso, insuficiência corporal senil, perda gradual das funções hepáticas e renais, falta de qi e sangue e perda de fluido corporal , o que levou a fezes secas, resultando em constipação[13]. A SC exerce pressão sobre os pacientes e suas famílias em muitos aspectos, sendo importante explorar sua patogênese.
C. deserticola tem a função de tonificar o Yang do rim, beneficiar o sangue e regular a imunidade do organismo[14]. C. deserticola e decocção de ervas chinesas contendo C. deserticola têm sido amplamente utilizados no tratamento da constipação, e o efeito clínico é notável. Du et al[15] encontraram em um modelo de rato com deficiência de Yang e constipação que C. deserticola melhorou a amplitude de contração do cólon isolado, fortaleceu a contratilidade do trato intestinal e retornou o nível de hormônios gastrointestinais ao normal. Além disso, a fibra dietética de C. deserticola, um subproduto do processamento de C. deserticola, melhora a capacidade de retenção de água das fezes e tem a vantagem de baixa dose e bom efeito na nutrição dos intestinos e na defecação[16]. Nosso estudo descobriu que o tratamento com C. deserticola melhorou a umidade fecal e a histopatologia colônica de ratos com constipação.
Os ICCs são encontrados em todo o trato intestinal e desempenham um papel vital no controle neural do movimento intestinal como marca-passos e transmissão nervosa intestinal[17]. C-kit[18]. O sistema SCF/C-kit é crucial no desenvolvimento de ICCs. A via de sinalização SCF/C-kit foi analisada durante o tratamento de constipação de transferência lenta em ratos por acupuntura[19]. A eletroacupuntura no ponto de Tianshu aumentou o número de ICCs de cólon em camundongos tratados com ACK2-, aumentou a expressão de proteínas SCF e C-kit e reverteu o fenótipo de ICC. A prescrição para revigorar o qi e o baço pode aumentar a expressão de ICC no tecido colônico e regular a expressão de C-kit e SCF mRNA, melhorando assim os sintomas de constipação[20]. Em nosso estudo, imuno-histoquímica mostrou que C. deserticola aumentou significativamente a expressão de SCF e proteína C-kit em um modelo de rato de SC, e RT-qPCR mostrou que C. deserticola aumentou significativamente a expressão de C-kitmRNA. O bloqueador de C-kit inibiu a regulação positiva da expressão de SCF e C-kit induzida por C. deserticola.
O conteúdo de água fecal e o transporte de água no cólon estão intimamente relacionados aos AQPs, que desempenham um papel importante no metabolismo da água intestinal [21]. Em um estudo de ratos com constipação de transporte lento, a decocção Defecation melhorou significativamente os sintomas de constipação, regulando a absorção intestinal de água através da regulação negativa de AQP3 e AQP4 [22]. Em um modelo de constipação funcional em ratos, o mecanismo de tratamento de Oral Xiaofu Tongjie Fluid para constipação funcional pode ser realizado regulando a expressão de polipeptídeo intestinal vasoativo e AQP3 no cólon [23]. Gapjunctions desempenham um papel essencial na mediação da contração sincrônica das células musculares lisas. Cx43 é a proteína mais importante durante esse processo[24]. A perda da expressão de Cx43 pode ser parcialmente responsável pela disfunção motora do músculo liso[25]. O reparo da estrutura da rede do sistema nervoso intestinal em ratos com constipação de trânsito lento pode melhorar a expressão de Cx43 etc. e sintomas de constipação[26]. Esses resultados indicam que o aumento A expressão de AQP3 diminui o conteúdo de água fecal, levando à constipação, que pode ser um importante mecanismo de constipação. A expressão de Cx43 pode estar relacionada à contração do músculo liso intestinal e reduzir a ocorrência de constipação. Em nosso estudo, western blotting mostrou que a expressão de Cx43 foi aumentada e a expressão de AQP3 foi inibida pelo tratamento com C.deserticola, o que resultou em aumento da contração do músculo liso e diminuição da absorção de água, e o tratamento com bloqueador reverteu esses efeitos.
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CONCLUSÃO
Em conclusão, C. deserticola pode inibir a expressão de AQP3 e promover a expressão de Cx43 através da via SCF/C-kit, melhorando assim a constipação induzida pela loperamina e reduzindo o dano ao tecido colônico em ratos idosos. Este estudo forneceu uma boa base teórica para o uso clínico de C. deserticola.
