Extrato de pétala de rosa (Rosa Gallica) exerce efeitos de clareamento da pele e anti-rugas

Contato: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Young-Ran Song,1,* Won-Chul Lim,1,* Ahram Han,1 Myung-hee Lee,1 Eun Ju Shin,1Kwang-Min Lee,1,2 Tae-Gyu Nam,1 e Tae-Gyu Lim1, 3

ABSTRATO

Procuramos investigar o efeito de extratos depétalas de rosa gallica(RPE) emClareamento da peleeanti-rugasatividade. A atividade da tirosinase foi atenuada pelo tratamento com EPR, concomitante à redução do acúmulo de melanina no melanoma humano B16F10. O tratamento da pele facial de voluntários em um ensaio clínico com uma formulação contendo EPR aumentou significativamente o brilho da pele (valor L*). O mecanismo subjacente responsável foi determinado como associado à ativação da proteína quinase ativada por mitógeno (MAPK). Além disso,EPRexibidoanti-rugasatividade de formação de fibroblastos dérmicos humanos suprimindo o nível de metaloproteinase de matriz (MMP)-1. Estudo in vivo, o RPE também inibiu o nível de MMP -1 estimulado por ultravioleta solar pela regulação c-Jun. No geral, nossos achados indicam que o EPR evocaClareamento da pelee atividade anti-rugas regulando a sinalização intracelular, apoiando sua utilidade como ingrediente para clareamento da pele e produtos cosméticos anti-rugas.

PALAVRAS-CHAVE: melanina, MMP-1, Rosa gallica, Clareamento da pele, formação de rugas

Extrato de Cistanche: clareamento da pele

INTRODUÇÃO

Embora o envelhecimento da pele tenha uma taxa basal geneticamente determinada, é um processo complexo e multifatorial que pode ser acelerado por vários fatores ambientais. , e temperaturas extremas.2 Destes, a exposição solar ultravioleta (SUV) (em particular, ultravioleta B [UVB]) é a principal causa do fotoenvelhecimento da pele, marcado por hiperpigmentação (superprodução de melanina) eformação de rugas.3 A radiação SUV estimula a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS)/espécies reativas de nitrogênio e danos no DNA, levando a vários processos relacionados ao envelhecimento nas células da pele, como inflamação, remodelação da matriz extracelular (MEC), morte celular e hiperpigmentação.4Melanina (pigmentação preta ou marrom) protege a pele dos danos induzidos por UV.5 No entanto, a produção desregulada ou excessiva de melanina na pele pode resultar em distúrbios de hiperpigmentação, incluindo cloasma, sardas e lentigos senis.6 Arbutina e ácido kójico, que foram desenvolvidos para tratar esses doenças, são conhecidas por apresentar risco para câncer de intestino ou câncer de fígado, respectivamente.7 Por esta razão, tem havido interesse na utilização de materiais naturais que são excelentes na inibição da produção de melanina sem efeitos colaterais graves. A melanogênese é estimulada pela tirosinase, que desempenha um papel crucial na etapa inicial determinante da velocidade da via biossintética da melanina, e esta enzima é estabilizada e ativada por TRP-1 e TRP 2.8 A transcrição dessas proteínas melanogênicas é modulada pelo fator de transcrição associado à microftalmia (MITF). A exposição UV ativa o promotor MITF e induz a expressão do gene da tirosinase, resultando no acúmulo de melanina nos melanócitos. Além disso, as proteínas quinases ativadas por mitógenos (MAPKs), que consistem na quinase regulada por sinal extracelular (ERK), quinase c-Jun-N-terminal (JNK) ep38, levam ao controle transcricional da melanogênese.8 Em particular, ERK e JNK são conhecidos por regular negativamente a expressão de MITF,9 enquanto que p38 MAPK induz a decomposição proteassômica de enzimas melanogênicas. A MAPK p38 fosforilada, por sua vez, ativa a expressão de MITF e enzimas melanogênicas.10

Proteínas da MEC como colágeno, elastina e proteoglicanos estão presentes na matriz dérmica, o que confere força e resiliência à pele.11 Durante o processo de envelhecimento da pele, ocorrem alterações na matriz dérmica, incluindo mudanças nas proporções de colágeno, levando à formação de rugas. Além disso, a irradiação UV também desencadeia a decomposição da colagenase, durante a qual o estresse oxidativo gerado facilita a expressão de metaloproteinase de matriz proteolítica (MMPs) que reduz a síntese de colágeno e acelera a degradação do colágeno.2 O estresse oxidativo estimula várias vias biológicas relacionadas ao fotoenvelhecimento, bem como quinases citoplasmáticas e MAPKs.4 MAPKs. simulam a proteína ativadora 1 (AP-1; c-Fos/c-Jun), um fator de transcrição que aumenta ainda mais o nível de MMPs.12 Essas proteínas são as principais responsáveis ​​pela degradação do colágeno.7 Das MMPs, a MMP-1 é conhecida como importante enzima envolvida na quebra da MEC pela decomposição do colágeno tipo I, componente chave na derme.3 Assim, a inibição da MMP-1 tem sido considerada uma estratégia viável para a terapia antienvelhecimento da pele.

A espécie Rosa (R.) está incluída na família Rosaceae e o gênero Rosa é uma das plantas mais amplamente distribuídas. São importantes culturas comerciais utilizadas para jardinagem, decoração e perfumaria. Como flores comestíveis, as pétalas também são comumente usadas como ingredientes em alimentos funcionais por causa de sua cor, sabor rico e elevado valor nutricional. hemostasia.13,14 As propriedades fisiológicas observadas podem ser atribuídas à abundância de fitoquímicos, incluindo compostos fenólicos, flavonóides e antocianinas.15 De fato, alguns estudos demonstraram funcionalidades biológicas contendo forte ação antioxidante, antimicrobiológica, antiinflamatória e antialérgica .15–17 Recentemente, relatamos que o extrato de etanol de pétala de rosa provoca potencial anti-inflamatório na pele.18 Além disso, as condições ideais de extração de pétalas de rosa com efeito antienvelhecimento na pele foram investigadas para aplicações industriais.19 No entanto, apesar de sua ampla disponibilidade, as potenciais propriedades antienvelhecimento dos extratos de pétalas de rosa (RPEs) forsk incare permanecem mal compreendidos. Neste estudo, avaliamos as potenciais aplicações deEPRem cuidados com a pele e seus mecanismos moleculares responsáveis.

benefício cistache: Anti-envelhecimento

MATERIAIS E MÉTODOS

Reagentes

As pétalas de rosa foram compradas da Turquia através da GN Bio (Gyeonggi-do, Coréia). A solução MTS (CellTiter 96 Aqueous OneSolution Cell Proliferation Assay) foi adquirida da Promega (Madison, WI, EUA). Anti-tirosinase policlonal, anti-b-actina, anti-ERK, anti-MKK4 e anti-JNKforam adquiridos da Santa Cruz Biotechnology (CA, EUA). Anti-fosfo-MEK monoclonal (Ser217/221), anti-MEK, anti-fosfo-MKK4, anti-fosfo-MKK3/6, anti-fosfo ERK, anti-fosfo-JNK, anti-MKK3, anti-fosfo-p38, anti-p38 e anti-fosfo-c-Jun foram adquiridos de Tecnologia CellSignaling (Danvers, MA, EUA). O anti-MMP monoclonal-1 e o colágeno anti-tipo I foram obtidos da R&D Systems (Minneapolis, MN, EUA) e Ab cam (Cambridge, Reino Unido), respectivamente. Hormônio alfa-estimulante de melanócitos (a-MSH), cogumelotirosinase e l-3,4-diidroxifenilalanina (l-DOPA) foram obtidos da Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EUA).

Preparação de RPE

As pétalas de rosa (10 g) foram secas ao ar, moídas e misturadas com 1000 mL de etanol a 70 por cento (v/v) e extraídas a 70 C por 3 horas usando um extrator soxhlet. O produto foi então filtrado através de papel de filtro No. 2 (Whatman, Maidstone, Reino Unido). O solvente foi continuamente concentrado a vácuo e o resíduo foi liofilizado usando um liofilizador.

Ensaio de atividade de tirosinase de cogumelo in vitro

O ensaio enzimático foi realizado medindo a formação de DOPAcromo como descrito anteriormente.20 Em resumo, 40 lLofEPRamostra (12,5, 25, 50 e 100 LG/mL) foi diluída para 20 l de tampão PBS. Após adição de 20 lL de tirosinase de cogumelo (0,02 mg/mL), a incubação foi realizada por 30 min. O substrato l-DOPA foi adicionado à mistura contendo a enzima e então incubado por 15 min. O produto dopa-cromo foi então medido a 475 nm. Arbutina e vitamina C foram utilizadas como controle positivo.

Extrato de Cistanche reduz a atividade da tirosinase

Cultura de células

Células B16F10 de melanoma murino e fibroblastos dérmicos humanos primários (HDFs) foram obtidos do Korean Cell LineBank (Seul, Coréia) e ScienCell Research Laboratories (Carlsbad, CA, EUA), respectivamente. Ambas as células foram mantidas em meio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) (GIBCO Invitrogen, Auckland, Nova Zelândia) suplementado com 10 por cento (v/v) de soro fetal bovino (FBS) e 1 por cento de estreptomicina-penicilina (GIBCO Invitrogen) a 37 C e 5 por cento de incubadora de CO2.

Ensaio de viabilidade celular

O ensaio MTS foi usado para medir a proliferação induzida por RPE de células B16F10 de melanoma humano. Em resumo, as células foram semeadas e cultivadas com DMEM contendo 10 por cento de FBS e 1 por cento de antibióticos em 96-placas de poços. As células foram então privadas de soro por 12 h e adicionadas comEPRamostras (50–1000 LG/mL) por 24 h. Subsequentemente, solução de MTS a 10 por cento incluindo metossulfato de fenazina foi tratada nas células por 1 h. O grau de células viáveis ​​foi medido a 490 nm.

Ensaio de produção de melanina

A formação de melanina em células B16F10 de melanoma humano foi avaliada conforme relatado anteriormente.20 Em resumo, as células (8 · 103 células/poço) foram cultivadas em placas de seis poços em 2 mL de DMEM. No dia seguinte, as células foram pré-tratadas com RPE (100 e 200 lg/mL) por 1 h antes de a-MSH 100 nM ser adicionado e depois incubado por 72 h. A melanina extracelular foi investigada a 495 nm.

Análise de Western Blot

Amostras de proteínas de células B16F10, HDFs e tecido de pele humana foram lisadas com tampão RIPA [20 mM Tris-HCl (pH 7,5) 150 mM NaCl, 1 mM Na2EDTA 1 mM EGTA 1 por cento NP-40 1 por cento desoxicolato de sódio 2,5 mM de sódio pirofosfato 1 mM b glicerofosfato 1 mM Na3VO4 1 lg/ml leupeptina] e quantificado por Pierce BCA Protein Assay Kit. As proteínas foram separadas por géis de acrilamida de dodecil sulfato de sódio a 10% com base no peso molecular e depois transferidas para membranas de nitrocelulose. As membranas foram bloqueadas com solução de albumina sérica bovina 1 h por 1 h e incubadas com o anticorpo primário indicado a 4°C por 12 h. Após reação com anticorpo secundário conjugado com peroxidase de rábano por 1 h, a intensidade da expressão da proteína foi visualizada usando um leitor de quimioluminescência (UVITEC Cambridge).

Assuntos e tratamentos

A habilidade deEPRmelhorar o rostoClareamento da pele was assessed in a double-blind clinical trial in 10 women (>20anos). A formulação básica foi preparada usando água purificada, ácido poliacrílico, 1,2-hexanodiol e hidróxido de sódio. O RPE foi adicionado a uma concentração de 0,05 por cento (v/v). Durante um período de suplementação de 6-semanas, os sujeitos aplicaram a fórmula EPR em um lado do rosto e o outro lado do rosto foi tratado uma vez ao dia com apenas a formulação base como controle. Durante o período de teste, os voluntários foram proibidos de usar outros cosméticos.

Avaliação da condição da pele

A condição da pele foi avaliada de acordo com o protocolo operacional padrão do Instituto de Ciências Dermatológicas da Coréia (Seul, Coréia) e foi realizada a 22 C – 2 Can e 50 por cento – 5 por cento de umidade. Após lavar o rosto por 30 min, o estado da pele de cada sujeito foi investigado usando Skin ColorCatch (Delfin Technologies, Kuopio, Finlândia) e os comentários foram coletados. Os escores foram determinados pelo valor L* (brilho) e medidos imediatamente antes do teste e 3 e 6 semanas depois.

Irradiação SUV

A irradiação do SUV foi realizada combinando lâmpadas ultravioleta A (UVA) e UVB (Q-Lab Corporation, Cleveland, OH, EUA); suas luzes emitem a 340 nm, que imita a luz solar ideal emitida entre 365 e 295 nm. A proporção de UVA para UVB produzida por esta lâmpada foi de 94,5 por cento e 5,5 por cento, respectivamente. HDFs e tecido equivalente de pele humana em meio sem soro foram estimulados por irradiação de SUV a 23 e 46 kJ/m2 usando uma lâmpada UVB, respectivamente.

Preparação de amostra de pele humana

Cortes de pele abdominal foram obtidos de uma paciente do sexo feminino, caucasiana (Biopredic International, Saint Gregoire, França). Em resumo, as amostras de tecido foram coletadas do abdome após cirurgia plástica de acordo com a Lei Francesa L.1245-2 CSP. Este estudo seguiu todos os princípios estabelecidos na Declaração de Helsinque. O tecido da pele foi incubado em meio adequado de FBS a 10 por cento fornecido pela Biopredic International a 37 C sob 5 por cento de CO2 por 10 dias em que o meio foi trocado a cada 2 dias. Durante o período de corrida, o tecido também foi exposto com umEPRamostra 1 h antes da irradiação de SUV de 46 kJ/m2 duas vezes ao dia. Ao final do tratamento, o tecido foi usado para análise imuno-histoquímica (IHQ) ou análise de immunoblot.

Observação IHC

A análise do IHC foi conduzida pela agência de pesquisa contratada ABION (Seul, Coréia). O tecido da pele foi embebido em 10 por cento de formaldeído, desidratado através de um gradiente de concentração de etanol e embebido em cera de parafina. A peroxidase endógena da seção foi inativada com 0,3 por cento de H2O2 por 15 min e depois incubada com um anticorpo anti-MMP-1 (R&D Systems, Inc., EUA, Canadá) por uma hora. os cortes foram incubados com anticorpos secundários por 20 min. Os cortes foram corados com reagente de detecção DAB (3,30-diaminobenzidina) (K3468; DAKO, Glostrup, Dinamarca) e observados e fotografados em microscópio de luz (BX40; Olympus, Tóquio, Japão).

Análise estatística

Todos os experimentos foram realizados pelo menos três vezes e os dados foram expressos como média – desvio padrão. A significância estatística foi avaliada pelo teste t de Student no programa SPSS (Chicago, IL, EUA) e as diferenças significativas foram expressas como P <>

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RESULTADOS

O RPE suprime a produção de melanina através da inibição da tirosinase

A tirosinase é a única enzima limitante da taxa de melanogênese presente nas células da pele humana.8 Nos melanócitos, a DOPA é produzida a partir da tirosina pela tirosinase, que é posteriormente oxidada em dopaquinona na via de síntese da melanina.7 Neste estudo, um ensaio de tirosinase de cogumelo foi usado para determinar a atividade anti-melanogenica deEPR. Conforme dado na Figura 1A, o RPE provocou um efeito inibitório significativo dependente da dose na atividade da tirosinase e o efeito inibitório em 50-100 lM de RPE foi maior do que o de arbutina e vitamina C. Esses resultados foram confirmados pela avaliação do efeito do RPE na secreção de melanina e expressão de tirosinase em células de melanoma B16F10 tratadas com a-MSH. Os queratinócitos secretam a-MSH para proteger a pele contra a exposição excessiva aos raios UV, o que induz a ativação dos melanócitos para produzir melanina.5 Foi confirmado que o tratamento com a-MSH induziu a expressão de tirosinase e a produção de melanina nos melanócitos (Fig. 1B, C). No entanto, a expressão de tirosinase em células B16H10 induzidas por a-MSH foi suprimida de forma dose-dependente pelo tratamento com RPE (Fig. 1B), consistente com os resultados descritos anteriormente. Além disso, o RPE (100 e 200 LG/mL) reduziu significativamente o teor de melanina que foi aumentado em melanócitos estimulados com a-MSH (Fig. 1C). Além disso, confirmamos que o extrato não induziu citotoxicidade celular em concentrações de £1000 LG/mL em células B16F10 (Fig. 1D).

RPE regula negativamente a expressão de MITF induzindo a ativação de MAPK em células de melanoma B16F10

Várias vias de sinalização podem mediar a formação da pigmentação da melanina. A melanogênese é controlada por MAPKs que são categorizadas em três subtipos que consistem em ERK, JNK ep38, e os ativadores upstream MEK, MKK4 ou MKK3/6, regulando transcricionalmente a expressão de MITF e tirosinase.21 A fosforilação de p38 MAPK regula a melanogênese por estimulação a degradação proteassômica de enzimas melanogênicas.6 ERK é conhecido por regular negativamente a expressão de MITF e melanogênese através da fosforilação de mais de 160 proteínas.10 Além disso, JNK está envolvido na proliferação e apoptose de células cancerosas e também controla a melanogênese pela regulação negativa da expressão de MITF.

Para esclarecer o mecanismo responsável pela atividade biológica deEPR, investigamos o efeito do RPE na via de sinalização MAPK por meio da análise de Western blot. Conforme fornecido na Figura 2, o tratamento com RPE também mostrou fosforilar o MEK-ERK, MKK4/7-JNK e MKK3/6- Vias de p38 MAPK em células B16F10. Além disso, a fosforilação de MAPKKs-MAPKs foi significativamente melhorada com o aumento das concentrações de RPE. Além disso, observamos que o RPE reduziu a expressão de MITF. Esses resultados sugerem que o RPE inibe a expressão de MITF e tirosinase pela ativação das vias de sinalização MAPK.

EPR provoca um efeito de clareamento da pele na pele humana

Neste estudo, o efeito deEPRsobre o brilho da pele humana foi confirmado em um ensaio clínico duplo-cego. Cada indivíduo recebeu a aplicação de duas formulações diferentes, uma com 0.05 por cento (v/v) RPE e outra sem RPEon cada metade de seus rostos uma vez por dia durante 6 semanas. O brilho da pele avaliado pelo valor L* foi avaliado usandoSkinColorCatch (Delfin Technologies). Conforme dado na Figura 3, o brilho da pele na presença de tratamento com a formulação contendo RPE a 0,05 por cento (v/v) foi significativamente aumentado em comparação com os controles. O tratamento com EPR por 3 semanas resultou em um aumento significativo nos valores de L*, e o efeito aumentou ainda mais à medida que o tempo de tratamento continuou.

O RPE previne a degradação do colágeno através da inibição de MAPK-MMP-1 em HDFs

A irradiação UV gera estresse oxidativo e, portanto, desencadeia a decomposição do colágeno induzindo a ativação de MMPs.2 A MMP-1 é um fator importante no processo de fotoenvelhecimento porque cliva especificamente o colágeno tipo I.3 A expressão de MMP-1 é mediada por MAPKs como ERK, p38 MAPK e JNK, aumentando subsequentemente a ativação do fator de transcrição AP-1.22 Como uma subunidade de AP-1, c-Jun também é induzida em resposta à ativação de MAPKs estimulada por radiação UV .23 Procuramos investigar se oredutor de rugaso efeito do RPE foi determinado pelo grau de supressão da transdução de sinalização upstream mediada por MMP-1 e MMP-1-em HDFs irradiados por SUV. Também foi avaliado o nível de expressão do colágeno tipo I que reflete a quantidade de colágeno sintetizado nas células. Conforme indicado na Figura 4A, B, a irradiação de SUV resultou na redução da expressão do tipo Icollagen e aumento da expressão de MMP-1 em HDFs. No entanto, a expressão dos níveis de colágeno tipo I reduzidos pela irradiação com SUV foi recuperada drasticamente pelo tratamento com RPE, que também atenuou significativamente os níveis aumentados de expressão de MMP-1 induzidos pela irradiação com SUV. Além disso, o efeito de RPE na fosforilação induzida por SUV de AP-1 e MAPKs foi examinado para elucidar as vias de sinalização envolvidas na expressão mediada por SUV de MMP-1. Os resultados mostraram que o aumento da fosforilação de c-Jun em HDFs induzidos por SUV foi marcadamente suprimido porEPRde uma maneira dependente da dose (Fig. 4C). Além disso, o RPE inibiu a fosforilação induzida por SUV de MEK ERK, MKK4/7-JNK e MKK3/6-p38 (Fig. 4D-F). Esses resultados sugerem que o RPE alivia a degradação do colágeno induzida por SUV, suprimindo a expressão de MMP{10}} por meio da regulação negativa das vias de sinalização de AP{11}} e MAPKs upstream em HDFs.

O RPE reduz a expressão de MMP-1 induzida por SUV regulando negativamente a sinalização AP-1 e MAPKK-MAPK no tecido da pele humana

Para confirmar ainda mais as propriedades anti-fotoenvelhecimento do RPEin vivo, pré-tratamos amostras de tecido de pele humana por 1 h, seguida de 46 kJ/m2 de irradiação de SUV. Conforme indicado na Figura 5A, a expressão de MMP-1 foi marcadamente aumentada pela exposição ao SUV, enquantoEPRo tratamento suprimiu os níveis de expressão de MMP-1 induzidos por SUV. Além disso, a análise de coloração IHC revelou o efeito protetor do EPR na espessura epidérmica pela exposição ao SUV, indicando o nível de expressão de MMP-1 no tecido cutâneo. A expressão de MMP-1 no modelo de pele humano tratado com SUV foi visivelmente aumentada, enquanto o tratamento com RPE reduziu a expressão de MMP-1 induzida por SUV (Fig. 5B). AP-1 estimula a expressão de MMP-1,24 e MAPKs são os principais mediadores da expressão de MMP-1 induzida por UV pela regulação da transativação de AP-1.25 Conforme dado na Figura 5C, O RPE inibiu a fosforilação de c-Jun induzida por UV no tecido da pele humana, indicando a regulação negativa da ativação transcricional de AP-1 pelo RPE. Além disso, o RPE suprimiu a fosforilação induzida por SUV de MEK-ERK, MKK4/7-JNK e MKK3/6-p38 (Fig. 6). Coletivamente, esses resultados sugerem que o RPE suprime a produção de colágeno induzida por SUV nas células dérmicas e nos tecidos da pele.

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DISCUSSÃO

Muitas das cultivares de rosas ornamentais que existem hoje são usadas há muito tempo para fins alimentícios e medicinais. De fato, vários compostos bioativos de interesse estão presentes na planta rosa, incluindo compostos fenólicos.26 Anteriormente, relatamos a atividade antiinflamatória da pele deEPRusando células epidérmicas de camundongo, nas quais o RPE reduziu a expressão de COX-2 induzida por UV, inibindo a via de sinalização MAPK.

A estreita relação entre inflamação e processo de envelhecimento está bem estabelecida,28 e procuramos investigar essa relação no contexto daClareamento da peleeanti-rugasatividades formativas. Conforme dado na Figura 1, o RPE suprimiu de forma dependente da dose a atividade da tirosinase in vitro e sua expressão em células B16F10. Além disso, o resultado final da pigmentação da pele, produção de melanina, foi inibido pelo tratamento com EPR em células B16F10. O RPE também induziu a fosforilação de MAPKs e seu ativador a montante MAPKKs, seguido por uma diminuição na expressão de MITF (Fig. 2). As MAPKs são conhecidas por serem os principais fatores de sinalização que regulam a melanogênese em melanócitos.21 As vias ERK e JNK estão envolvidas em inúmeras etapas de transdução de sinal e também participam da regulação do MITF, que sequencialmente leva à inibição da tirosinase e da melanogênese.9 Enquanto isso, a ativação da p38 MAPK leva à inibição da síntese de melanina por indução da degradação da proteína tirosinase.6 Em conjunto, esses resultados demonstram que o RPE inibe a melanogênese em células de melanoma B16F10 através da inibição do MITF e da transcrição da tirosinase, e o efeito do RPE ocorre em associação com a ativação das vias de sinalização MAPKK-MAPK.

Para confirmar se oClareamento da pelee as atividades anti-rugas do EPR são válidas para a pele humana, tratamos voluntários com EPR por 6 semanas para avaliar a atividade de clareamento da pele. Também avaliamos o tecido da pele humana ex vivo por 10 dias para avaliar aanti-rugasefeitos de formação. O tratamento com a formulação contendo EPR aumentou significativamente os valores de L*, uma unidade de medida para a brancura da pele (Fig. 3).EPR, com base em uma pesquisa por questionário (dados não mostrados).

A radiação SUV é considerada um fator primário nos processos relacionados ao envelhecimento da pele.4 Neste estudo, o RPE não apenas restaurou a síntese de procolágeno, mas também suprimiu a expressão de MMP-1 induzida por SUV em HDFs (Fig. 4). Além disso, a análise de coloração IHC mostrou que o RPE pode atenuar a expressão de MMP1 induzida por SUV no tecido da pele (Fig. 5B). Além disso, investigamos se fatores de transcrição como MAPK e AP-1são influenciados pelo RPE. Descobrimos que os níveis de proteína estavam elevados em HDF e tecido cutâneo irradiados com SUV, enquantoEPRinibiu significativamente a via MAPKK-MAPK e a ativação de AP-1. Após a exposição ao SUV, as ROS resultantes podem atuar como ativadores de várias vias moleculares, incluindo a via MAPK que ativa a transcrição de AP-1 e fator nuclear-kappaB.29 Essas vias contribuem para a expressão de vários genes, incluindo MMPs, levando à deficiência de colágeno e enrugamento.12 Em um estudo anterior, também demonstramos que o EPR contém altas concentrações de antioxidantes, como antocianinas, polifenóis e flavonoides, proporcionando algum nível de capacidade anti-inflamatória contra a exposição ao UV. mostrado neste estudo pode ser atribuído à sua capacidade antioxidante.

Em conclusão, observamos queEPRapresenta clareamento da pele eanti-rugasenquanto inibe a atividade da tirosinase e a formação de melanina nos melanócitos. As propriedades anti-melanogênicas do RPE podem ser obtidas através da ativação da via de sinalização MAPKK-MAPK. Além disso, o RPE não apenas promove a síntese de procolágeno, mas também inibe a expressão de MMP que é induzida pela exposição de SUV em fibroblastos e tecidos da pele, suprimindo a via MAPKK-MAPK e a ativação de AP-1. Além disso, não foram detectados efeitos negativos associados à estabilidade da formulação nos voluntários. Nossos achados sugerem que o EPR pode ser um biomaterial protetor da pele eficaz, com aplicações no tratamento clínico e/ou cosmético de pigmentação cutânea e rugas.

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