PRAT 2 Cistanches Deserticola PhG-RE através da inibição do mecanismo de apoptose ERS para proteger a apoptose das células miocárdicas do estresse do retículo endoplasmático induzido por H2O2-
Mar 02, 2022
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4. Discussão
Doenças cardiovasculares, como lesão de I/R, podem induzir ERS por estresse oxidativo, sobrecarga de cálcio e formação de radicais livres de oxigênio. Nessas condições, o RE não consegue dobrar e processar proteínas corretamente, levando ao acúmulo de proteínas mal dobradas ou desdobradas no retículo endoplasmático, que então induz o desdobramento.
resposta proteica (UPR). A UPR é uma resposta celular ao estresse que inicialmente inibeapoptose, mas em última análise o celebra.
Estudos confirmaram que a ERS é parcialmente responsável por isquemia e anóxia podem exacerbar doenças cardíacas [6, 7]. Os fatores apoptóticos, GRP78, Caspase 12, CHOP e JNK, são participantes importantes na ocorrência da doença [8-11]. Neste estudo, pesquisamos o antagonismo e mecanismos relacionados de PhG-RE em células H9c2apoptosede ERS induzido por H2O2-. Usando 100 μmol mL−1 de H2O2 como indutor, um modelo ERS foi estabelecido em células H9c2. Para garantir a validade e precisão do modelo, o ativador de estresse do retículo endoplasmático específico tapsigargina (TG) foi usado para determinar se PhG-RE protege as células contra infecções induzidas por ERS.apoptose. O inibidor de ERS 4-PBA também foi usado para determinar se PhG-RE produz um efeito semelhante ao de 4-PBA em combater efetivamente oapoptosecausada pelo ERS induzido por H2O2-.
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Neste estudo, tanto o H2O2 quanto o TG ativador de ERS causaramapoptosemediando ERS nas células. A LDH, uma enzima astável presente no citoplasma, deixa a célula quando ocorre a ruptura da célula. Portanto, o dano celular pode ser determinado medindo o vazamento de LDH no meio. A viabilidade celular e o vazamento de LDH representam o nível de dano às células H9c2 e podem ser usados para avaliar o efeito protetor do pré-tratamento com PhG-RE nas células. A exposição ao PhG-RE reduziu efetivamente a apoptose celular induzida por TG e H2O2, melhorou a sobrevivência e reduziu a liberação de LDH. Este achado mostra que PhG-RE desempenha um papel semelhante ao do 4-PBA na proteção das células. Este resultado indica que PhG-RE pode proteger as células contra lesões induzidas por ERS eapoptose.
Em células normais que não estão sob estresse, o GRP78, que está associado ao ERS, liga-se a várias proteínas transmembranares do ER na superfície celular e está em um estado inativo e estável. Quando o ERS ocorre pela primeira vez, as proteínas desdobradas induzem a UPR, que promove a dissociação das proteínas transmembranares do GRP78. Após a dissociação, o GRP78 se liga a proteínas desdobradas ou mal dobradas para combater o ERS por meio de uma expressão proteica aumentada [12-14]. À medida que o ERS progride, a função do retículo endoplasmático é severamente danificada,
Além disso, devido aos efeitos pró-apoptóticos da UPR, a pró-caspase-12 é liberada eapoptoseé iniciado. A pró-caspase liberada-12 é clivada em sua forma ativa, Caspase-12. Uma razão importante para o ERS iniciar a apoptose é que a Caspase-12 é ativada pelo ERS [17]. JNK, outro elemento que induzapoptose, é ativado pelo complexo IRE-1- TRAF2-ASK1, que é gerado durante a apoptose. A família Caspase a jusante, que desempenha um papel pró-apoptótico, também é ativada.
Com base na tecnologia de detecção de genes e proteínas, este estudo examinou o mecanismo pelo qual o PhG-RE protege as células do miocárdio. Quando ocorre estresse do RE, o fator de transcrição CHOP pode causar a liberação de Cyt C eapoptose-fatores indutores (AIFs), que resulta em apoptose celular [18–20]. Além disso, a proteína de membrana ER altamente conservada IRE1 pode ser fosforilada e induzir a apoptose celular ativando uma via alternativa através de TRAF2- eapoptosetransdução de sinal mediada por quinase reguladora de sinal 1 (ASK1) [21]. O pré-tratamento com PhG-RE reduziu a expressão de mRNA de GRP78, CHOP e Caspase-12 durante o estresse de ER em células induzidas por H2O2-, bem como a expressão de mRNA induzida por TG de GRP78, JNK, e Caspase-12. O pré-tratamento com PhG-RE teve um efeito antagônico nos aumentos induzidos por H2O2- e TG nos níveis de expressão das proteínas GRP78, CHOP, p-JNK e Caspase-12. Esses resultados mostram que o PhG-RE desempenha um papel semelhante ao do inibidor de ERS 4-PBA na proteção de células miocárdicas e no combate à apoptose induzida por ERS, reduzindo a expressão de mRNA e proteína de fatores associados à apoptose induzida por ERS. Embora não tenha havido alteração significativa na proteína JNK, esse achado é consistente com a literatura que mostra que JNK funciona por meio de sua ativação
forma, p-JNK. O diagrama da Figura 7 mostra osinalização, o que pode explicar claramente como PhG-RE funciona para proteger as células miocárdicas contra induzida por ERSapoptose.
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5. Conclusões
A lesão de isquemia-reperfusão miocárdica é a principal causa de lesão miocárdica exacerbada. Como outro fator indutor da doença miocárdica, a ERS tem sido um novo foco de pesquisa que visa melhorar os efeitos e a eficácia do tratamento da doença miocárdica. Este estudo explorou ainda mais o papel do PhG-RE na proteção das células miocárdicas e mostrou que a proteção miocárdica mediada pelo PhG-RE estava fortemente relacionada à regulação da apoptose induzida por ERS. No entanto, como a doença miocárdica é causada por múltiplos fatores, mais estudos precisarão ser realizados sobre os efeitos do PhG-RE.
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Disponibilidade de dados
Os dados usados para apoiar os achados deste estudo estão disponíveis com o autor correspondente mediante solicitação.
Conflitos de interesse
Os autores declaram não ter conflitos de interesse.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo Programa de Desenvolvimento Tecnológico da Província de Jilin (número de concessão: 20160101032JC).
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