Identificando Biomarcadores de Disfunção da Glândula Meibomiana em uma Coorte de Pacientes Afetados por DM Tipo II Parte Ⅰ

Abstrato:

(1) Introdução: A disfunção da glândula meibomiana (MGD) entre pacientes com diabetes mellitus (DM) é uma manifestação comum da síndrome do olho seco (DES).

(2) Métodos: O objetivo deste estudo é identificar parâmetros clínicos e biomarcadores úteis para melhorar o acompanhamento e tratamento desses pacientes. Usamos um questionário de índice de doença da superfície ocular (OSDI), teste de Schirmer I/II, tempo de ruptura do filme lacrimal (TF-BUT), fluoresceína mais lissamina coloração verde, linha de Marx (ML) e morfologia da glândula meibomiana (MGs) usando Sirius® Topographer (CSO, Costruzione Strumenti Oftalmici, Florença, Itália). A análise da amostra de sangue incluiu glicose, hemoglobina glicada, perfil lipídico, cortisol, sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEA-S), androstenediona (ASD) e testosterona.

(3) Resultados: Cortisol e ASD foram positivamente correlacionados com um aumento na tortuosidade do MG, e um nível aumentado de triglicerídeos foi associado a uma redução do comprimento do MG. Os níveis de DHEAS diminuíram com a idade e foram associados à coloração da superfície ocular.

(4) Conclusões: Estudos futuros, talvez incluindo análise de lipídios meibum e níveis de citocinas lacrimais, também podem elucidar ainda mais a conexão entre esses parâmetros, arquitetura MG e função.

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Palavras-chave: disfunção da glândula meibomiana; diabetes melito; hormônios; biomarcadores

1. Introdução

As glândulas meibomianas (MGs) são glândulas sebáceas modificadas dentro da placa tarsal superior e inferior e são distribuídas verticalmente até a margem palpebral. Os MGs são mais abundantes nas pálpebras superiores e são mais longos, armazenando o dobro do número de lipídios em comparação com os MGs da pálpebra inferior [1]. O lipídio secretado pelos MGs é denominado meibum, que é liberado de seus orifícios visíveis logo após a junção mucocutânea ao longo da margem palpebral. Meibum desempenha um papel fundamental na estabilidade do filme lacrimal, reduzindo a evaporação da camada aquosa e protegendo a superfície do olho como uma barreira hidrofóbica [1].

O comprometimento dos MGs leva à disfunção da glândula meibomiana (MGD), uma inflamação crônica que resulta em oclusão do ducto terminal e secreção lipídica modificada. MGD é a razão mais comum para a síndrome do olho seco evaporativo (DES). Os pacientes geralmente sofrem de secura prolongada, queimação e sensação de corpo estranho, e podem ter uma qualidade de vida comprometida [2]. Numerosos estudos sugeriram uma conexão entre MGD e fatores sistêmicos, como deficiência androgênica [3], hiperlipidemia [4] e diabetes mellitus (DM) [5]. Recentemente, descobriu-se que o DM é um fator de risco significativo para o desenvolvimento de DMG [4].

A associação entre DM e o risco de desenvolvimento de DES também é suportada por uma meta-análise recente que considerou mais de 2,5 milhões de pacientes de um total de 17 estudos [6]. Esta associação tem uma lógica patogenética considerando que o MG é uma glândula sebácea modificada e que a estrutura e função da glândula sebácea estão alteradas em indivíduos diabéticos [4,5]. Foi levantada a hipótese de que a produção/resposta alterada de insulina e a hiperglicemia são elementos-chave na patogênese da DMG em indivíduos diabéticos. A insulina é fundamental para o correto metabolismo das glândulas sebáceas; uma deficiência de insulina promoveria disfunção [5].

Além disso, a hiperglicemia é um estímulo para a lipólise nos adipócitos e essa resposta nos MGs pode reduzir a qualidade do meibum [7]. Esses mecanismos patogenéticos são apoiados por evidências recentes que mostram que a insulina pode estimular a proliferação de células epiteliais da glândula meibomiana humana imortalizada (HMGECs), enquanto o alto teor de glicose foi considerado tóxico para HMGECs [5]. A MGD e a perda lacrimal por evaporação associada são seguidas por um aumento da inflamação na superfície do olho com o crescimento de populações bacterianas sustentadas por lipídios anormais como substratos [8]. Também foi descoberto recentemente que o estado inflamatório crônico em pacientes com DGM está relacionado a altas concentrações de citocinas inflamatórias no filme lacrimal [9,10]. Em nosso estudo, examinamos os marcadores séricos e o desenvolvimento de DMG em pacientes com DM.

2. Material e Métodos

Este estudo transversal incluiu pacientes com DM tipo II e sintomas de DGM atendidos no Departamento de Oftalmologia do Hospital A. Fiorini em Terracina (Latina, Itália) nos últimos seis meses. O estudo foi realizado em conformidade com os princípios da Declaração de Helsinque, da Conferência Internacional de Harmonização e das recomendações de Boas Práticas Clínicas. O consentimento informado foi obtido de todos os indivíduos antes do início do estudo. Os critérios de inclusão foram pacientes acometidos por DM tipo II com sintomas de DMG. Os critérios de exclusão incluíram: infecções oculares recentes, alergias sazonais, qualquer história de cirurgia ocular, uso de qualquer medicamento ou colírio conhecido por afetar a superfície ocular, usuário atual ou anterior de lentes de contato, grávida por autorrelato, doença da tireoide, doença autoimune , uso de anticoncepcionais, tabagistas e terapia de reposição hormonal antiandrogênica e menopausa.

Todos os indivíduos foram solicitados a preencher o Ocular Surface Disease Index (OSDI) Allergan, Inc., Irvine, CA, EUA. Questionário [11]. Resumidamente, os pacientes marcam a intensidade de seus sintomas em uma escala de 0–4 (0: nenhuma vez, 1: algumas vezes, 2: metade das vezes, 3: a maioria do tempo, 4: o tempo todo). A pontuação final foi medida e variou de 0 a 100 (pontuação de 0 a 12: normal, 13 a 22: olho seco leve, 23 a 32: olho seco moderado, maior que 33 : doença grave do olho seco). O exame biomicroscópico do segmento anterior ocorreu e a margem palpebral foi analisada quanto à presença de telangiectasia, anormalidades da margem palpebral, orifícios MGs ocluídos e deslocamento anterior/posterior da junção mucocutânea. Este último foi avaliado segundo Yamaguchi et al. [12]. Uma pontuação da linha de Marx (ML) é relatada na Tabela 1.

O tempo de ruptura do filme lacrimal (TFBUT) foi determinado da seguinte forma: os indivíduos foram solicitados a piscar 3 a 4 vezes após a instilação de fluoresceína no fórnice inferior. O TFBUT foi avaliado pelo tempo entre a última piscada e o aparecimento da primeira mancha preta; os resultados de três medições foram registrados. [13] A coloração da superfície ocular usando verde de lissamina foi usada para determinar a pontuação de Van Bijsterveld (vBS): a superfície ocular é dividida em três áreas; conjuntiva bulbar nasal, conjuntiva bulbar temporal e córnea. Cada área é avaliada em uma escala de 0 a 3, com 0 indicando ausência de coloração e 3 indicando coloração confluente; a pontuação máxima alcançável com este sistema é 9 [13].

O teste de Schirmer avalia a produção lacrimal aquosa e é realizado com tiras de papel estéril aplicadas no lado temporal inferior do saco conjuntival de ambos os olhos. O comprimento molhado, em milímetros, é medido após 5 min. Existem duas versões do teste: sem anestesia tópica para avaliar a secreção lacrimal total, que é a soma do fluxo lacrimal reflexo e basal (teste de Schirmer I), e com anestesia tópica para quantificar a secreção lacrimal basal (teste de Schirmer II) [14 ]. Apenas os dados do mesmo olho onde a meibografia foi realizada foram incluídos nos resultados. A meibografia foi realizada em um olho selecionado aleatoriamente de cada indivíduo usando o Sirius® Topographer (CSO, Costruzione Strumenti Oftalmici, Florença, Itália) [15].

Only upper eyelids were analyzed. Three images for each eye were recorded. The device determines the dropout area semi-automatically by percentage and assesses meiboscore as follows: grade 0, no loss at all; grade 11 4, ≤25%; grade 2, 26–50%; grade 3, 51–75%; and grade 4, >75% (Figura 1).

2.1. Análise de imagem

As três imagens representativas de melhor foco de um olho aleatório, com bom brilho e contraste de imagem, foram selecionadas para análise de comprimento, largura e área de MGs. Dois observadores mascarados (AF e FA) realizaram a análise das imagens mamográficas. Resumidamente, o comprimento MG foi quantificado usando o Neuron, um plug-in do ImageJ (http://www.imagescience. org/Beijing/software, (acessado em 10 de outubro de 2022)) que foi usado anteriormente para rastreamento semiautomático do nervo corneano [16] mas também pode ser útil para quantificar o comprimento e a largura do MG (Figura 2).

Os principais MGs foram definidos como o número total de MGs em uma imagem; Os comprimentos MG eram comprimento MG/área do quadro convertidos para mm/mm2. A largura MG foi calculada na parte superior, central e inferior de cada sobreposta e relatada como largura MG/área da estrutura convertida em mm/mm2. O número total de MG e comprimento e largura de MG foram calculados pela soma dos principais MGs, comprimento e largura, respectivamente. A área de MG foi analisada usando o método anterior relatado [15,17], mas diferente desse método, definimos a imagem exterior como branca e o interior como preto para gerar uma máscara de verdade binária. Uma borda de polígono ao redor das glândulas foi criada e salva. O valor foi informado como uma área em mm2 (Figura 3).

Foi coletada amostra de sangue em jejum para análise dos níveis de glicose, hemoglobina glicada (HbA1c), triglicerídeos, colesterol total, colesterol HDL (lipoproteína de alta densidade), LDL (lipoproteína de baixa densidade), sulfato de desidroepiandrosterona (DHEA-S), androstenediona (ASD). , nível de cortisol e testosterona.

2.2. Análise estatística

As variáveis ​​contínuas foram expressas como média ± erro padrão da média. Em termos do teste de Kolmogorov-Smirnov e do teste de Shapiro-Wilk, nossos dados foram distribuídos aproximadamente normalmente. Os valores de p estavam acima de 0.05 para todas as variáveis, exceto para o nível de testosterona. A correlação de Spearman foi realizada para medir a intensidade e a direção da associação entre duas variáveis. O teste ANOVA one-way foi utilizado para a comparação de mais amostras. A análise de regressão linear foi realizada para analisar os biomarcadores de acordo com as variáveis ​​de MG obtidas por meio da meibografia. A análise de regressão usando um método de seleção pairwise foi realizada para identificar a variável mais importante associada ao MGD. O coeficiente de correlação intraclasse (ICC) foi calculado entre dois observadores mascarados para comprimento, largura e área dos MGs. A análise estatística foi realizada com o SPSS versão 22 (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA), e um valor de p menor que 0,05 foi considerado significativo.

O mecanismo de Cistanche potencializa o efeito da testosterona

Descobriu-se que Cistanche aumenta os níveis de testosterona de várias maneiras. Em primeiro lugar, contém compostos conhecidos como echinacoside e acteoside, que demonstraram aumentar a produção do hormônio luteinizante (LH) na glândula pituitária. O LH estimula as células de Leydig nos testículos a produzir testosterona. Cistanche também contém polissacarídeos e glicosídeos feniletanóides, que demonstraram ter propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias. Isso pode ajudar a reduzir o estresse oxidativo e a inflamação nos testículos, o que pode prejudicar a produção de testosterona. Além disso, descobriu-se que Cistanche aumenta a expressão de genes envolvidos na síntese de testosterona e reduz a atividade de enzimas que quebram a testosterona, como {{1} }alfa-redutase. No geral, acredita-se que a combinação desses mecanismos contribua para os efeitos de aumento de testosterona de Cistanche.

Continua...

Alessandro Abbouda 1,* , Antonio Florido 1,2 , Filippo Avogaro 1,2 , John Bladen 3 e Enzo Maria Vingolo 1,2

1 Departamento de Oftalmologia, Hospital Alfredo Fiorini, 04019 Terracina, Itália

2 Departamento de Biotecnologia e Ciências Médico-Cirúrgicas, Universidade "Sapienza" de Roma, 04100 Latina, Itália

3 Oculoplastic Department King's College Hospital NHS Foundation Trust, Denmark Hill, London SE5 9RS, Reino Unido