Efeitos do extrato aquoso de Cistanche Tubulosa na microbiota intestinal de camundongos com distúrbios intestinais

1. Introdução

Os microrganismos intestinais colonizam principalmente o lúmen intestinal e a camada mucosa e se mutualizam com o hospedeiro por meio de troca de material e energia, transformação e outros processos [1]. Eles são centros de sinalização que integram mensagens ambientais, como dieta, com sinais genéticos e imunológicos, afetando consequentemente o metabolismo, a imunidade, o sistema nervoso e a resposta a infecções do hospedeiro [2]. Normalmente existe um equilíbrio dinâmico entre a flora intestinal e os hospedeiros; no entanto, a disbiose intestinal pode resultar em alterações no equilíbrio saúde/doença, distúrbios imunológicos e uma infinidade de doenças [3]. Alterações moderadas na microbiota intestinal são aceitáveis ​​para o hospedeiro; no entanto, isso ainda pode fornecer oportunidades para amplificar as alterações em outros fatores agravantes, como bacteriófagos, bacteriocinas e estresse oxidativo [4].

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Estudos anteriores mostraram queo extrato etanólico de Cistanche tubulosa(CT), uma fórmula fitoterápica tradicional chinesa, pode regular a composição microbiana intestinal em ratos [5], e os glicosídeos totais da CT ajustam a microbiota intestinal desordenada [6]. As espécies Cistanche, que parasitam principalmente as raízes das espécies Tamarix, também são chamadas de "ginseng do deserto", e um tônico composto pelos caules de Cistanche deserticola (CD) e Cistanche tubulosa (CT) é usado como remédio fitoterápico [7 ].ºDescobriu-se que os principais componentes químicos dos glicosídeos feniletanol CT (PHGs), que são substâncias antioxidantes [8, 9], melhoram a disfunção reprodutiva [10], suprimem a ativação de células estreladas hepáticas e bloqueiam a condução de vias de sinalização no TGF{{3} }/ SMAD [11] e prevenir a fibrose hepática induzida pela albumina sérica bovina em ratos [12]. Entre os mais de 100 componentes da CT, o polissacarídeo também é uma das substâncias importantes com conteúdo abundante [13, 14]. Estudos anteriores demonstraram que os polissacarídeos de C. deserticola induzem melanogênese em melanócitos, reduzem o estresse oxidativo [15], aliviam a disfunção cognitiva regulando processos antioxidantes e antiinflamatórios em ratos [16], protegem as células PC12 contra lesões induzidas por OGD/RP [17 ],aumentar a absorção de equinacosídeo in vivoe afetam a microbiota intestinal [18].

Os probióticos são microrganismos vivos não patogênicos que apresentam benefícios à saúde e conferem equilíbrio microbiano no trato gastrointestinal quando administrados em quantidades adequadas [19].ºEles podem aumentar as respostas imunes celulares inespecíficas, caracterizadas pela ativação de macrófagos, células natural killer (NK) e linfócitos T citotóxicos específicos do antígeno e pela liberação de várias citocinas de maneira específica da cepa e dependente da dose [20]. Cepas probióticas melhoram as propriedades do epitélio intestinal por meio da modulação TJ, e foi demonstrado que cepas probióticas específicas regulam a expressão de mucina, influenciando assim as propriedades da camada de muco e regulando indiretamente o sistema imunológico intestinal [21]. Cepas de bactérias do ácido láctico (LAB) e Bifidobacterium são os principais probióticos que têm sido usados ​​em muitos campos [22–26].ºSeus benefícios à saúde são numerosos, sendo sua capacidade antioxidante um fator importante em suas funções relacionadas à saúde [27]. Os probióticos podem quelar íons metálicos para evitar que catalisem a oxidação [28, 29]; eles também podem aumentar a expressão de enzimas antioxidantes [30, 31], produzir vários metabólitos com atividade antioxidante [32, 33], mediar vias de sinalização antioxidante [34–36] e regular as enzimas que produzem espécies reativas de oxigênio (ROS) e o resposta de microrganismos intestinais ao estresse oxidativo [37].

Um estudo recente demonstrou que os polissacarídeos da CD poderiamestimular o crescimento de algumas bactérias do ácido láctico, o que poderia beneficiar a saúde humana [38]. No entanto, o conteúdo de polissacarídeos na CD é diferente daquele da CT [7, 39], e essa diferença pode levar a efeitos diferentes nos microrganismos intestinais. Além disso, embora os polissacarídeos CD possam reduzir o estresse oxidativo ativando a via NRF2/HO-1 [15], os efeitos de um único polissacarídeo podem diferir do efeito geral de múltiplas composições na CT.ºPortanto, é necessário definir com precisão os efeitos dos extratos aquosos de CT nos microrganismos intestinais. Além disso, os PHGs também podem resistir ao estresse oxidativo [40] e suprimir as respostas inflamatórias mediadas por lipopolissacarídeos, ativando a via Keap1/Nrf2/HO-1 [41].ºportanto, determinar o efeito do extrato aquoso CT é de grande valor. Além disso, os efeitos de certos constituintes do extrato aquoso de CD no estresse oxidativo e na flora intestinal sugerem que a resistência ao estresse oxidativo pode estar correlacionada com alterações na flora intestinal.

Para preencher as lacunas de conhecimento sobre os temas mencionados acima, investigamos os efeitos do extrato aquoso CT na microbiota intestinal de camundongos com distúrbios da flora intestinal.ºEstes resultados fornecerão informações valiosas sobre os possíveis mecanismos através dos quais a CT altera a flora intestinal e confere resistência intestinal ao estresse oxidativo.

2. Materiais e métodos

2.1. Animais Experimentais.

Um total de 18 camundongos C57BL / 6J machos da classe SPF, pesando 18-22 g, foram adquiridos no Centro de Animais Experimentais da Universidade Médica de Xinjiang com o número de licença SCXK (novo) 2018-0003.ºEles foram alojados em gaiolas sob condições padronizadas: fotoperíodo claro/escuro de 12 horas, temperatura de 23 ± 2 graus e umidade de 55 ± 5%.ºOs animais foram alimentados com dieta comercial (51% de extrato isento de nitrogênio, 25% de proteína bruta, 4,6% de gordura bruta, 6,5% de cinza bruta, 40% de fibra bruta e 8,9% de umidade) e água de torneira.ºOs animais foram tratados de acordo com as recomendações descritas no Guia para Cuidado e Uso de Animais de Laboratório do National Institutes of Health.

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2.2. Extração do Extrato Aquoso.

Fatias secas de C. tubulosa, fornecidas pela Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., foram moídas em pó e foram selecionados grânulos com tamanhos de partícula entre 20 e 40 mesh.ºAs condições de extração foram as seguintes: relação sólido-líquido de 1:19, temperatura de 80 graus, tempo de micro-ondas de 6 min, tempo ultrassônico de 16 min, potência de micro-ondas de 400 W e potência ultrassônica de 400 W.ºOs conteúdos dos principais componentes do extrato aquoso foram medidos por HPLC (Agilent 1260 Infinity II, Califórnia, EUA). Em resumo, as substâncias padrão de equinacosídeo (0,2 mg/mL) e acteosídeo (0,2 mg/mL) foram dissolvidas em metanol a 50% para servir como solução de substância de referência.ºEm seguida, 1 g do extrato aquoso CT foi dissolvido em 100 mL de metanol a 50% e deixado em repouso por 30 min.ºA solução do extrato foi tratada com ultrassom a 250 W e 35 kHz por 10 min e posteriormente centrifugada a 12,{4}} rpm/min.ºO sobrenadante foi filtrado por uma membrana de filtro microporosa 0,45 μm.ºA solução da substância de referência e o filtrado foram então detectados por HPLC nas seguintes condições: sílica gel ligada a octadecil silano como carga, metanol como fase móvel A e 0,1% de ácido fórmico como fase móvel B.ºA temperatura da coluna foi definida como 30 graus, o comprimento de onda de detecção foi definido como 330 nm e o volume de injeção foi de 10 μL.

2.3. Experimentos.

Após uma semana de adaptação, os 18 camundongos foram divididos aleatoriamente em seis grupos: A (normal com adição de extrato aquoso de CT de dose média), B (normal sem extrato aquoso de CT), C (modelo sem extrato aquoso), D ( modelo com adição de extrato aquoso de CT de alta dose), E (modelo com adição de extrato aquoso de CT de dose média) e F (modelo com adição de extrato aquoso de CT de dose baixa).ºOs grupos foram tratados da seguinte forma: o grupo normal foi encharcado com solução salina normal, o grupo modelo foi encharcado com cefixima (30 mg/kg, Shiyao Group Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, China) e solução salina normal, alta O grupo de dose média foi encharcado com cefixima e 221,14 mg/kg do extrato aquoso CT, o grupo de dose média foi encharcado com cefixima e 165,54 mg/kg do extrato aquoso e o grupo de dose baixa foi encharcado com cefixima e 110,57 mg/kg. do extrato aquoso.ºe O grupo A foi encharcado com 165,54 mg/kg do extrato aquoso e nenhuma cefixima foi adicionada. A cefixima foi administrada diariamente ao meio-dia e as demais substâncias foram administradas diariamente às 15h. Durante os experimentos, os grupos C, D, E e F foram mantidos no estado modelo de distúrbios intestinais.ºAs fezes foram coletadas a cada sete dias em mesa operável estéril e armazenadas a -20 graus.

2.4. Observação Histopatológica do Cólon de Ratos.

No final do experimento, os camundongos foram mortos por deslocamento cervical e o conteúdo do cólon foi coletado em uma mesa operável estéril e armazenado a -80 graus C; ao mesmo tempo, amostras de tecido colônico foram fixadas em formalina neutra a 10%.ºEm seguida, as amostras foram desidratadas com gradiente de concentração de etanol, hialinizadas com xileno, embebidas em parafina, seccionadas e coradas com hematoxilina-eosina. Alterações morfológicas na mucosa colônica foram observadas e comparadas em microscópio óptico. O comprimento das vilosidades e a profundidade das criptas no cólon foram medidos e a razão entre o comprimento das vilosidades e a profundidade das criptas (valor V/C) foi calculada (51).

2.5. Extração de DNA e construção de biblioteca.

O DNA foi extraído das fezes utilizando o kit EZNA ®Soil DNA (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, EUA) de acordo com o protocolo do fabricante. A qualidade do DNA foi determinada utilizando um fluorômetro (QuantiFluor™ –ST, Promega Corporation, EUA). Iniciadores emparelhados na região V3-V4 do rDNA 16s foram projetados para amplificar a região e produzir fragmentos de DNA de 466 pb.ºO primer direto foi 341F (-5- CCTACGGGNGGCWGCAG-3-) e o primer reverso foi 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-). Cada volume de PCR foi de 25 μL, contendo 2,5 μL de tampão 10 × PCR, 2 μL de dNTPs, 1 μL de cada primer e 20–30 ng de DNA modelo.ºEm seguida, os adaptadores indexados foram anexados ao final dos amplicons para gerar bibliotecas de sequenciamento.ºAs bibliotecas foram validadas usando um fluorômetro QuantiFluor™ e quantificadas em 10 nmol.

2.6. Sequenciamento do gene 16s rRNA e análise da comunidade microbiana.

ºA plataforma Illumina (Illumina MiSeq) foi usada para obter dados emparelhados de 2 × 250 pb. Unidades taxonômicas operacionais (OTUs) foram obtidas utilizando o software Uparse por meio de agrupamento padrão com 97% de similaridade.ºO algoritmo ingênuo de atribuição Bayesiana do classificador RDP foi usado para alinhar as OTUs com o banco de dados Greengene Release 13.5 e realizar anotação de espécies.ºA diversidade alfa da microbiota intestinal foi calculada usando os índices de Shannon e Simpson, e as diferenças entre os grupos foram analisadas pela análise discriminante linear Effect Size (LEfSe).ºA diversidade beta foi analisada por análise de coordenadas principais (PCoA) das dissimilaridades de Bray-Curtis. PICRUSt2 foi usado para estimar a capacidade metabólica microbiana do microbioma intestinal [42].

2.7. Análise de dados estatísticos.

O SPSS 20 foi utilizado para ANOVA unidirecional e os dados experimentais foram expressos como X ± S; X indica o valor médio e S indica o desvio padrão.

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3. Resultados

3.1. 8e Efeito do extrato aquoso CT na morfologia do cólon.

ºe compostos representativos (equinacosídeo e acteosídeo) e suas concentrações do extrato de CT foram validadas por HPLC (Figura S1). Para determinar o efeito do extrato aquoso no intestino, investigamos o comprimento das vilosidades do cólon e a profundidade dos recessos após o tratamento com o extrato aquoso CT.ºAs vilosidades do cólon nos grupos de dose normal e alta (A, B e D) eram mais longas e semelhantes a dedos, enquanto as vilosidades do cólon nos grupos modelo e de dose baixa (C e F) eram curtas e as pontas do cólon vilosidades estavam rompidas (Figura 1). Consequentemente, altas doses de extrato aquoso de CT aumentaram significativamente o comprimento das vilosidades do cólon e reduziram a profundidade do recesso em camundongos com distúrbios intestinais em comparação com os camundongos do grupo modelo (P <{4}}.01). Em contraste, a profundidade do recesso não foi significativamente diferente entre o grupo de alta dose e o grupo normal (P > 0,05) (Tabela S1).ºEsses resultados indicaram que a alta dose do extrato aquoso CT pode melhorar a morfologia no interior do cólon de camundongos com distúrbios intestinais.

3.2. 8e Efeito do extrato aquoso CT na diversidade da microbiota intestinal.

Realizamos o sequenciamento do gene 16s rRNA para investigar a causa potencial das alterações morfológicas dentro do cólon e investigar as alterações na microbiota intestinal após o tratamento com o extrato aquoso de CT. Uma média de 100.553 tags efetivas, variando de 77.734 a 125.144, foi obtida a partir dos dados brutos (Tabela S2).ºEssas tags foram agrupadas em 4.932 OTUs (Tabela S3). Em seguida, analisamos a diversidade da microbiota intestinal com base nessas OTUs.ºOs índices de Shannon e Simpson não mostraram diferença entre o grupo A (normal com extrato aquoso CT) e o grupo B (normal sem extrato aquoso CT) (Figura 2 (a)).ºestá indicado que, nos camundongos sem tratamento com cefixima, o extrato aquoso CT pode não ter tido efeitos benéficos ou prejudiciais adicionais na diversidade da microbiota intestinal. No entanto, a diversidade no grupo modelo (C) apresentou uma tendência decrescente em comparação com a dos grupos normais.ºOs camundongos tratados com extratos aquosos de CT em doses altas e médias mostraram sinais de recuperação da diversidade, enquanto tal fenômeno não foi observado em camundongos tratados com extrato aquoso de CT em doses baixas (Figura 2 (a)). Enquanto isso, o PCoA revelou que os grupos normais (A e B) e grupos de distúrbios intestinais aos quais foram administrados extratos aquosos CT de dose alta (D) e dose média (E) tenderam a ter distâncias entre amostras mais curtas do que aqueles no grupo modelo e no grupo modelo. grupo de suplemento de extrato aquoso CT de baixa dose (F) (Figura 2 (b)).ºEsses resultados indicaram que o extrato aquoso CT poderia ajudarmelhorar a diversidade da microbiota intestinalem ratos com distúrbios intestinais.

3.3. Mudanças na composição da microbiota intestinal tratada com extrato aquoso CT.

ºOs perfis de composição da microbiota foram comparados entre diferentes grupos. Ao nível do filo, a abundância relativa de Proteobacteria no grupo modelo foi maior do que nos outros grupos (Figura 3 (a)).ºO aumento de Proteobactérias sugeriu que o microbioma de camundongos modelo foi alterado pela cefixima e que o extrato aquoso CT pode beneficiar a microbiota intestinal, já que o aumento da prevalência de Proteobactérias é um marcador central de flora intestinal desordenada [43–45]. Além disso, ao nível do género, a abundância relativa de Lactobacillus no grupo modelo diminuiu em comparação com a dos grupos normais e de dose elevada; no entanto, aumentou em comparação com o grupo de dose média e baixa (Figura 3 (b)).ºEsses resultados indicaram que o extrato aquoso de CT em altas doses pode promover o crescimento de algumas bactérias do gênero Lactobacillus.

A microbiota diferencial entre os grupos estudados foi determinada de acordo com a análise LEfSe.ºEsta análise mostrou que, após o tratamento com cefixima, as abundâncias relativas de Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales e Chloroflexi aumentaram significativamente, enquanto as abundâncias relativas de Lactobacillus, Eubacterium_nodatum_grupo, Pseudonocardiales e o grupo Christensenellaceae_R-7_diminuiu significativamente em comparação com aqueles do grupo normal (Figura 4 (a)). Surpreendentemente, quando o grupo modelo foi suplementado com extrato aquoso de CT em altas doses, as abundâncias relativas de Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, grupo Eubacterium nodatum e Pedobacter aumentaram significativamente em comparação com aquelas do grupo modelo. Enquanto isso, as abundâncias relativas de Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 e Candidatus Stoquefichus diminuíram significativamente em comparação com aquelas do grupo modelo (Figura 4 (b)).

3.4. Funções da Microbiota Intestinal Relacionadas ao Tratamento com Extrato Aquoso de CT.

Utilizamos o software PICRUSt2 para prever as vias metabólicas da microbiota intestinal, e o grupo normal foi usado como referência para analisar as alterações em outros grupos. Sob o tratamento com cefixima, a abundância relativa da degradação do etilbenzeno, a biossíntese de peptídeos não ribossômicos do grupo sideróforo e o metabolismo de xenobióticos pelas vias do citocromo P450 aumentaram; após o tratamento com extratos aquosos de CT em doses altas e médias, sua abundância relativa retornou aos níveis normais. Entretanto, a abundância relativa da via do metabolismo dos cianoaminoácidos diminuiu sob o tratamento com cefixima; no entanto, aumentou após o tratamento com extrato aquoso de CT em altas doses. Além disso, em geral, as alterações nas diferentes vias metabólicas após o tratamento com cefixima foram significativas em comparação com as do grupo normal; entretanto, a adição do extrato aquoso CT foi capaz de evitar alterações excessivas (Figura 5).

4. Discussão

A morfologia do cólon pode ser alterada pelo crescimento, digestão e absorção, regulação imunológica e reparação de lesões intestinais [46–50].ºA relação V/C pode refletir de forma abrangente o estado digestivo do trato intestinal e é diretamente proporcional à capacidade digestiva e de absorção do trato intestinal [51, 52]. No presente estudo, a biópsia de vilosidades e recessos e dados estatísticos mostraram que o extrato aquoso em altas doses poderia melhorar parcialmente a morfologia defeituosa dentro do cólon.

Para investigar como o extrato aquoso altera a morfologia intestinal e afeta a microbiota intestinal, trabalhamos retroativamente a partir das alterações na flora intestinal. Descobrimos que a abundância relativa de Proteobacteria, um marcador central da flora intestinal desordenada, aumentou sob o tratamento com cefixima em comparação com aquele sem tratamento com cefixima.ºAs abundâncias relativas de outros marcadores centrais, Bacteroidetes e Firmicutes, não tiveram alterações significativas, embora estes

grupos são predominantes no intestino humano; descobriu-se que a proporção de Bacteroidetes / Firmicutes diminui em pessoas obesas em comparação com pessoas magras, e descobriu-se que essa proporção aumenta com a perda de peso em pessoas com dois tipos de dieta de baixa caloria [38, 41, 43-45, 48, 53, 54]. Enquanto isso, o Turicibacter, que está associado à obesidade [55], foi significativamente elevado no grupo modelo em comparação com os outros grupos. Notavelmente, a diversidade da microbiota intestinal nos ratos modelo foi melhorada pela adição do extrato aquoso CT. Observamos algumas bactérias intestinais específicas em camundongos sob diferentes tratamentos; por exemplo, Lactobacillus e Muribaculaceae foram os dois principais gêneros bacterianos que aumentaram no grupo tratado com extrato aquoso de CT em altas doses em comparação com aqueles do grupo modelo (Figura 4). Estudos recentes indicaram que os polissacarídeos dos extratos aquosos de CT possuem

crescimento de algumas bactérias do ácido láctico, o que poderia beneficiar a saúde do hospedeiro [43]. Paralelamente, Muribaculaceae são organismos probióticos ligados à longevidade [57].ºEstes sugeriram que o mecanismo pelo qual o extrato aquoso CT melhora a microbiota intestinal pode ser a promoção ou proteção do crescimento de organismos probióticos. Outra bactéria digna de nota foi a bactéria YE57. Embora o extrato aquoso de CT em altas doses tenha promovido a abundância relativa da bactéria YE57 no presente estudo (Figura 4), estudos anteriores descobriram que sua abundância era maior no intestino normal do que no intestino tratado com resíduo de chá de ervas em alta concentração [58] e que sua abundância foi reduzida após a intervenção com Bacillus licheniformis combinado com XOS (xilooligossacarídeos) [59].ºAssim, o papel desta bactéria na microbiota intestinal merece um estudo mais aprofundado. Além disso, o número relativamente pequeno de amostra neste estudo pode causar uma medida de falso positivo e falso negativo, e sugere-se estudo futuro em amostras maiores para validar os marcadores bacterianos identificados.

A composição do extrato aquoso CT pode ser importante por seus efeitos na composição e alterações funcionais na microbiota intestinal de camundongos com distúrbios intestinais. Os PHGs são componentes ativos comuns encontrados na DC e na CT, e o equinacosídeo foi identificado como o principal PHG na CT [60]. Nas últimas décadas, o equinacosídeo demonstrou possuir muitas atividades farmacológicas, como efeitos antienvelhecimento e neuroprotetores, melhora da função cardíaca, redução da hiperlipidemia e hiperglicemia e prevenção do diabetes induzido pela obesidade e da síndrome metabólica [53, 61-65] . Detectamos alterações nas vias metabólicas da microbiota intestinal.ºO tratamento com cefixima levou ao enriquecimento de bactérias relacionadas à degradação do etilbenzeno e à biossíntese de peptídeos não ribossômicos do grupo sideróforo, enquanto os tratamentos com extrato aquoso de CT em doses altas e médias puderam aliviar essas alterações, indicando que este extrato moderou a comunidade bacteriana relacionada a essas funções. Além disso, o aumento do enriquecimento bacteriano relacionado à via do metabolismo dos cianoaminoácidos sob o tratamento com extrato aquoso em altas doses e seu enriquecimento diminuído em camundongos modelo indicaram que o extrato aquoso CT pode promover o metabolismo do cianoaminoácido.ºAs alterações nos metabólitos relevantes podem fornecer atividades farmacológicas a este extrato aquoso.

Embora o mecanismo pelo qual o extrato aquoso CT altera a composição e a função da microbiota intestinal seja complexo, existem algumas pistas para especular sobre o mecanismo potencial. Foi relatado que tanto as bactérias lácticas quanto os extratos aquosos de CT podem antagonizar o estresse oxidativo. O estresse oxidativo que ocorre durante a inflamação é um fator comum que agrava os distúrbios intestinais, reduzindo fortemente a diversidade microbiana intestinal e promovendo o surgimento de bactérias específicas (4). Pelo contrário, as espécies reativas de oxigênio também promovem o crescimento seletivo de grupos bacterianos através da respiração de nitrato e tetrationato [66–68]; por exemplo, bactérias da família Enterobacteriaceae podem crescer rapidamente como consequência de alterações na composição da flora intestinal sob condições oxidativas durante a inflamação [69, 70]. A maioria dos organismos vivos desenvolve defesas enzimáticas, defesas antioxidantes não enzimáticas e mecanismos de reparo para eliminar radicais de oxigênio [71]. No entanto, estes sistemas antioxidantes nativos geralmente não são suficientes para prevenir danos oxidativos em organismos vivos. Vários antioxidantes sintéticos adicionais, incluindo hidroxianisol butilado e hidroxitolueno butilado, têm sido amplamente utilizados para diminuir a oxidação, mas sua segurança tem sido questionada [72, 73]. Portanto, os pesquisadores se voltaram para encontrar antioxidantes mais seguros e naturais obtidos de substâncias naturais. Devido à capacidade dos polissacarídeos e das bactérias do ácido láctico em eliminar o estresse oxidativo, a determinação do mecanismo antioxidante preciso dos extratos aquosos de CT na microbiota intestinal requer uma investigação mais aprofundada no futuro.

Concluindo, descobrimos que o extrato aquoso CT foi capaz demelhorar a microbiota intestinalem camundongos com distúrbios intestinais, promovendo a diversidade,moderando as alterações metabólicase remodelação da estrutura da microbiota intestinal, e estes resultados podem fornecer uma referência para o desenvolvimento de medicamentos relacionados no futuro.

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