Efeitos da Cistanche Deserticola em Lesão Pulmonar Aguda em Ratos com Sepse

Contato: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

[Abstrato]Objetivo: Estudar o efeito deCistanche deserticolaem agudolesão pulmonar(ALI) em ratos com sepse. Métodos: O modelo de sepse foi feito por ligadura e punção cecal. Os exames histopatológicos foram realizados e os marcadores biológicos da LPA foram medidos. Resultados: Sob microscópio de luz no grupo salina, houve edema deinterespaço pulmonar, um grande número de eritrócitos e neutrófilos, e proteína plasmática nas cavidades alveolares. opulmãopeso úmido/seco, a taxa de neutrófilos e o teor de proteína no fluido de lavagem alveolar pulmonar permeabilidade vascular pulmonar e permeabilidade alveolar pulmonar e MDA, SOD, bem como MPO, foram significativamente aumentados. No grupo comCistanche deserticolatratamento, esses índices de ALI foram significativamente menores do que os do grupo com solução salina.

Conclusão: Cistanche deserticolatem grandes efeitos na ALI em ratos com sepse. O mecanismo terapêutico é possivelmente através da inibição de neutrófilos e radicais livres oxidativos.

【Palavras-chave】Sepse; Lesão pulmonar aguda; Cistanche deserticola

A sepse é uma emergência clínica e uma doença crítica, e a busca por medicamentos eficazes para o tratamento sempre foi um grande problema na pesquisa clínica e básica. A patogênese da sepse pela medicina tradicional chinesa é a deficiência da retidão e a exuberância do mal. A terapia de ataque à prosperidade maligna do corpo é uma das medidas de tratamento eficazes.Cistancheé um tônico tradicional da medicina chinesa. Estudos farmacológicos confirmaram que tem funções protetoras, como aumentar a taxa de síntese de DNA celular e resistir aos radicais livres de oxigênio. O autor observa experimentalmente o efeito deCistanche no dano do problema pulmonarna sepse, a fim de proporcionar uma exploração eficaz para o tratamento da sepse.

Cistanche Echinacoside tratar doença pulmonar

1 Material e métodos

1. 1 AnimalSaúde 40 ratos machos 5D, pesando 200~250g, fornecidos pelo Experimental Animal Center da Huazhong University of Science and Technology, número de inspeção de qualidade: TJLA—2008—1670 foram divididos aleatoriamente em 3 grupos: 8 grupo salino normal, Ig/ Houve 12 ratos no grupo de pasta de berinjela mL e 12 no grupo de 5g/mLCistanchegrupo. Os animais experimentais receberam as drogas correspondentes por gavagem de rotina por 15 dias, duas vezes ao dia (oCistanchedeserticola foi fornecido pela sala de preparo de medicina tradicional chinesa deste hospital), e a dosagem de 200mg/kg foi utilizada nos animais experimentais de acordo com o método da literatura U] 12 minutos após a ligadura e perfuração cecal. Coleta de exemplares.

1.2 Exame histológico de pulmão de rato.Pegue uma pequena quantidade do lobo esquerdo do animalpulmãode cada grupo, fixe-o com formaldeído a 10 por cento, embeba o corte em parafina e colore com HE, observe com um microscópio óptico comum e, com base nisso, tire opulmãoproblema para fazer 1mm3 para 25 Foi fixado em solução de glutaraldeído por cento, depois fixado em solução de tetróxido a 1 por cento, desidratado com etanol e acetona, embebido em Epon 81, preparados cortes ultrafinos, corados com urânio-chumbo e observados por transmissão eletrônica microscópio.

1.3 Determinação da razão de peso úmido/seco do problema de pulmão de rato, razão de contagem de células no fluido de lavagem alveolar e teor de proteína Razão em peso.Outro grupo de ratos foi submetido a lavagem alveolar após toracotomia, e o líquido de lavagem foi submetido à contagem e classificação celular ao microscópio. O método do azul brilhante de Coomassie é usado para determinar o teor de proteína e calcularpulmãoíndice de permeabilidade (proteína do líquido do lavado alveolar/proteína plasmática, LPI).

1.4 Alterações na Permeabilidade Vascular Pulmonar (PVP) em RatosDe acordo com o método introduzido por Zhou et al. (2), após a administração, os animais de cada grupo foram submetidos à ligadura e perfuração cecal, e a injeção na veia femoral de 50 mg/kg de lantânio foi utilizada para abrir o tórax e retirar os pulmões. Remova os problemas ao redor, mergulhe opulmõesna solução de formamida (a quantidade de formamida é 20mg/100g de peso corporal), incubada em 45-50incubadora T por 72h, esperar até que todos os pigmentos dos problemas sejam lixiviados, retirar os problemas, centrifugar e tirar o sobrenadante, use um espectrofotômetro ultravioleta para realizar a colorimetria em 620nm e calcule o teor de etanol de acordo com a curva padrão para determinar a mudança de PVP.

1.5 Determinação de malondialdeído (MDA) em problema pulmonar de ratoO método do ácido tiobarbitúrico (TBA) foi usado para determinar a atividade do MDA. Adicione 4 mL de ácido sulfúrico 1,67 mol/L. 0 0,541 por cento de ácido fosfônico para 50 mL de amostra de teste, misture bem, centrifugue a 3000 r/min por 10 minutos e processe a precipitação mais uma vez como acima, depois adicione 1 mL de água destilada dupla, 1 mL de solução de TBA, 95% de anidro banho por 60 minutos, extração com 5 mL de n-butanol, tetra etoxi propano como padrão, concentração final de lnmol/L, espectrofotômetro de fluorescência em 532nm para medição da absorbância.

1.6 Determinação de superóxido dismutase (SOD) em problemas de pulmão de ratoDe acordo com o método da literatura [4], a atividade da SOD foi determinada pelo método Huangpuyin oxidase (kit adquirido do Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.7 Determinação de mieloperoxidase (MPO) em ratopulmãoproblema.Pegue o problema pulmonar para lavar o sangue residual o máximo possível em solução salina isotônica e coloque-o em tampão fosfato contendo {{0}},5 por cento de cetil trimetil brometo (PH6. 0) Faça 5 por cento do homogenato, e opere de acordo com as instruções do kit.

1.8 Métodos estatísticosUse o software estatístico SPSS e meça os dados na forma (x±s), usando o teste t e o teste X2.

Cistanche

2 resultados

2.1 Comparação da proporção de peso úmido/seco depulmãoproblemas, proporção de contagem de células e teor de proteína no líquido de lavagem alveolar em cada grupo são mostrados na Tabela 1.pulmãorelação peso úmido/seco no grupo salina foi significativamente maior do que no grupoCistanchegrupo (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancheforam significativamente menores do que os do grupo salina (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Tabela 1 Comparação da razão de peso úmido/seco do problema pulmonar e a razão de contagem de células e teor de proteína no fluido de lavagem alveolar de ratos em cada grupo (X ± S)

Comparado com o grupo de solução salina normal, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Comparação das alterações morfológicas dos problemas pulmonares dos ratos em cada grupo. Observação geral: Apulmõesno grupo soro fisiológico estavam significativamente aumentados de tamanho e vermelho escuro, com graus variados de congestão e edema na superfície, e grande número de infartos pulmonares na borda; os pulmões noCistanchegrupo eram vermelho claro com uma superfície Congestão leve e edema, sem infarto pulmonar óbvio. A observação ao microscópio de luz mostrou que no grupo salina havia congestão e edema intersticial alveolar e pulmonar, grande número de infiltração difusa de neutrófilos na cavidade alveolar, alguma formação de abscesso e graus variados de atelectasia, necrose e enfisema compensatório. , Trombo e formação de membrana transparente semelhante. As lesões acima mencionadas no grupo Cistanche foram significativamente reduzidas. No grupo da solução salina, as células epiteliais alveolares incharam, os corpúsculos lamelares esvaziaram-se obviamente, formaram-se grandes vacúolos, as células endoteliais capilares incharam, as células endoteliais foram continuamente lesionadas, o espaço intercelular alargou-se, os capilares e as membranas basais alveolares estavam frouxos e alargados. Espessamento irregular, espessura irregular. No grupo Cistanche, as células epiteliais alveolares não estavam inchadas, o esvaziamento do corpúsculo lamelar estava reduzido, o número de vacúolos formados era pequeno, a conexão entre as células endoteliais capilares estava próxima do normal e a membrana basal estava levemente frouxa e irregularmente espessada. Comparado com o grupo de cistanche Ig/niL, o grupo de cistanche de 5g/mL teve uma gama menor de alterações morfológicas de problemas pulmonares e o grau de lesão pulmonar foi mais leve.

2.3 A comparação de LPI e PVP de ratos em cada grupo é mostrada na Tabela 2. O LPI e PVP do grupo salina foram significativamente maiores do que os do grupo Cistanche (PV0.05 ou 0,01 ). O LPI e PVP do grupo Cistanche foram menores, o que teve uma relação dose-efeito significativa.

2.4 A comparação da atividade de MDA.SOD.MPO nopulmãoproblemas de ratos em cada grupo é mostrado na Tabela 3. O conteúdo de MDA nopulmãoproblema do grupo salina foi significativamente maior do que o do grupoCistanchegrupo, enquanto a atividade SOD e atividade MPO no problema pulmonar do grupo Cistanche foram significativamente aumentadas (F<0.05 or="">

3 Discussão

A falência de múltiplos órgãos é a causa raiz da condição irreversível e alta taxa de mortalidade na fase tardia da sepse (5). A proteção da função do órgão é de grande importância na redução da alta taxa de mortalidade clínica da sepse. O pulmão é o primeiro órgão de falência múltipla de órgãos. 1/3 dos pacientes com sepse morrem de lesão pulmonar aguda (LPA) e síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA). O principal mecanismo fisiopatológico da LPA é o acúmulo de um grande número de neutrófilos no problema pulmonar e ativa e adere às células endoteliais vasculares. Ao mesmo tempo, a concentração da coenzima II oxidase reduzida que transfere elétrons únicos aumenta, causando explosões respiratórias, gerando uma grande quantidade de radicais livres de oxigênio e causando danos e função das membranas celulares e estruturas de membrana por meio de forte oxidação. Obstáculos⑹. O peróxido lipídico reflete a alteração dos radicais livres de oxigênio no problema e está diretamente relacionado ao grau de lesão pulmonar (7). No sistema de oxidação anti-radical enzimática e não enzimática do corpo, a atividade da SOD mantém uma boa correlação com o grau de dano do problema ⑺. Comparado com o grupo de soro fisiológico, as atividades de MDA e SOD do grupo Cistanche apresentaram diferenças estatisticamente significativas. Cistanche tem as funções de melhorar a função imunológica, anti-envelhecimento e aumentar a taxa de síntese de DNA celular. Os resultados experimentais mostraram que o coeficiente pulmonar, PLT, proporção de neutrófilos do lavado alveolar e permeabilidade vascular pulmonar do grupo Cistanche foram significativamente diminuídos, a atividade de MDA do problema pulmonar diminuiu, a SOD aumentou significativamente e a atividade de MPO diminuiu. Ao mesmo tempo, a observação morfológica mostrou que o grau de dano do problema pulmonar foi significativamente reduzido, a infiltração de neutrófilos foi reduzida e o grupo 5g/mL Cistanche teve menos lesão pulmonar do que o grupo Ig/mL Cistanche, e houve uma boa relação dose-efeito. Isso sugere que Cistanche tem um efeito protetor significativo na ALI. O mecanismo pode ser: (1) Inibir a migração de células inflamatórias nopulmões, reduzir os radicais livres de oxigênio produzidos pelos neutrófilos e outras células ativadas para que o biofilme fique protegido; (2) Promover a síntese de ácidos nucleicos e proteínas e proteger contra o efeito de lesão pulmonar; (3) Melhorar a função imunológica dos fagócitos e reduzirpulmãodano problema causado pela endotoxina. Os resultados experimentais fornecem uma base experimental para o tratamento da lesão pulmonar aguda na sepse clínica, fortalecendo o corpo e fortalecendo a deficiência.

referências

[1] Jin Huiming. Modelo de sepse após ligadura e perfuração cecal [J]. Revista Chinesa de Fisiopatologia "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. Papel do fator ativador de plaquetas na lesão pulmonar aguda associada à pancreatite no rato [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Métodos experimentais da medicina moderna [M]. Pequim: Editora Médica do Povo, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Ciência de laboratório bioquímico clínico moderno [M]. Pequim: Imprensa Médica Militar do Povo, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Estudos de choque [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, Hall JB. Samuel RW. Endotoxina na doença humana, parte 2Efeito biológico e avaliação clínica das teorias anti-endotoxina[J]