Efeito do extrato de Cistanches Deserticola na lesão de Ｒabbit ＲTECs por H2O2

ZHANG Jianfei, GUAN Jing, ZHAO Dan, YANG Xiaoqin, ZHOU Ying, FENG Tingting

1. Escola de Ciências Farmacêuticas, Universidade de Guizhou, Guiyang, Guizhou 550025 China;

2． Faculdade de Medicina, Universidade de Guizhou, Guiyang, Guizhou 550025 China;

3． Faculdade de Ciências da Vida, Universidade de Guizhou, Guiy- a Guizhou 550025 China;

4． Escola de Engenharia de Bebidas e Alimentos, Universidade de Guizhou, Guiyang, Guizhou 550025 China;

5． ＲCentro de Pesquisa e Desenvolvimento de Plantas Medicinais e Comestíveis Ｒesources de Guizhou, Guiyang, Guizhou 550025 China;

6． Plantas Medicinais e Comestíveis Ｒesources Laboratório de Engenharia de Aplicação e Desenvolvimento de Guizhou, Guiyang, Guizhou 550025 China)

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Abstrato

Coelhorenaltubularcélulas epiteliais foram cultivadas in vitro para estudar o efeito de H2O2 na proliferação celular eCistanchedeserticolaextrato nas células epiteliais tubulares lesadas por H2O2． A morfologia celular foi utilizada para observar o efeito de H2O2 na proliferação de células epiteliais tubulares renais de coelho pelo método MTT e o efeito protetor de 2,20 e 200 mg·L － 1 C ． extrato de água deserticola e extrato de álcool foi estudado pela liberação de LDH． Os resultados mostraram que o número de alterações morfológicas das células foi gradualmente aumentado． O número de células anexadas foi gradualmente reduzido． A taxa de inibição da proliferação celular e liberação de LDH foi aumentada juntamente com o aumento da concentração de H2O2． Uma alta dose de C． O extrato de deserticola pode diminuir significativamente o efeito inibidor da proliferação de RTECS por H2O2 ( P ＜ 0． 01)． A extração de água e extrato alcoólico de C． deserticola pode diminuir significativamente a liberação de LDH( P ＜ 0． 01)． H2O2 teve alguns efeitos na reação de proliferação de RTECS de coelhos, enquanto C． extrato de deserticola tem um efeito protetor na lesão RTECS por H2O2．

Palavras-chave:Cistanchesdeserticola; renaltubularcelula epitelial; dano celular.

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Cistanchedeserticola, também conhecida como Jiangyin, Canyon,Cistanchedeserticola, Chagangaoya, é o caule carnoso e escamoso seco deCistanchedeserticolaYC Ma ou Cistanche tubulosa (Schenk) Wight [1]. Tem os efeitos de nutrir o yang do rim, nutrir a essência e o sangue e hidratar o intestino. É tradicionalmente usado para deficiência de yang do rim, deficiência de essência e sangue, impotência e infertilidade, fraqueza da cintura e joelhos, fraqueza dos músculos e ossos, intestinos secos e constipação. É o yang do rim mais usado no passado. medicamento. Como forma de espécies reativas de oxigênio, o H2O2 tem um forte efeito de indução de peroxidação lipídica e pode reagir com quase qualquer componente celular, causando peroxidação lipídica em cadeia e causando disfunção da apoptose celular [2,3]. O experimento estudou principalmente o efeito deCistancheextrato sobre a inibição da proliferação e danos de coelhorenaltubularcélulas epiteliais induzidas por H2O2 e explorou preliminarmente seu efeito protetor nas células epiteliais tubulares renais.

Discussão

Cistanchecistache, conhecido como "ginseng do deserto", tem valor medicinal extremamente alto e é um medicamento chinês bem conhecido para tônico. "A Matéria Médica de Shen Nong" [7] descreve o medicamento de primeira qualidade como: "O medicamento de primeira qualidade... O principal alimento é responder ao céu, não tóxico, tomar mais, o uso a longo prazo não faz mal pessoas..."Cistancheé listado como o remédio de primeira linha, de sabor doce, morno. "Médicos famosos" [8] apontaram que Cistanche "tem gosto azedo, salgado e não tóxico". Depois disso, os registros da natureza e sabor do Cistanche nas gerações passadas da Matéria Médica são basicamente os mesmos. É ligeiramente quente por natureza, doce, azedo e salgado, e retorna ao meridiano dos rins e do intestino grosso. Tradicionalmente usado para deficiência de yang do rim, fraqueza de cintura e joelhos, fraqueza de músculos e ossos, etc., seus efeitos e mecanismos farmacológicos sempre foram foco de pesquisas. A pesquisa farmacológica moderna mostra queCistanchetem anti-envelhecimento, melhora a capacidade de aprendizagem e memória e regula a função imunológica. É amplamente utilizado na prescrição clínica da medicina chinesa, medicina de patente chinesa e produtos de saúde.

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O estresse oxidativo é uma das principais causas de algumas doenças importantes. Ela se deve ao desequilíbrio entre a formação e a remoção de espécies reativas de oxigênio no organismo, fazendo com que as células dos tecidos enfrentem certo grau de dano oxidativo. Portanto, pesquisas aprofundadas sobre o mecanismo da resposta ao estresse podem explorar maneiras razoáveis ​​de prevenir, melhorar ou até eliminar completamente as doenças do estresse. O estresse oxidativo pode levar à peroxidação de uma variedade de células e proteínas no corpo [9], a pesquisa selecionou o H2O2 como uma das substâncias exógenas danificadas. Tem um forte efeito de induzir a peroxidação lipídica, causando peroxidação lipídica em cadeia, causando apoptose e disfunção celular. Atualmente, a pesquisa sobre a nefrotoxicidade e antagonismo dessa substância exógena se dá principalmente por meio do estabelecimento de modelos animais, havendo relativamente poucos relatos na literatura sobre o estabelecimento de modelos in vitro para pesquisas relacionadas. Comparado com modelos animais de nefrotoxicidade, o modelo de células nefrotóxicas in vitro tem as vantagens de alvos claros, um ciclo de medicação curto e menos medicação.

O modelo celular nefrotóxico in vitro induzido por substâncias exógenas foi estudado através das alterações da morfologia celular, do efeito inibitório das substâncias exógenas na proliferação celular e das alterações na liberação de LDH celular. Diferentes concentrações de H2O2 têm efeitos óbvios nas mudanças morfológicas das células. À medida que a concentração de substâncias estranhas aumenta, o número de deformações celulares aumenta. O experimento MTT é um método comum para detectar o número de células vivas. No experimento de diferentes concentraes deCistanchepara proteger as células epiteliais tubulares renais de coelho de danos por H2O2, diferentes concentrações deCistanchereduziu significativamente a taxa inibitória de H2O2 em células epiteliais tubulares renais de coelho, e teve uma concentração Dependente, quando a membrana celular é danificada, a LDH intracelular será liberada no meio de cultura. O teor de LDH no meio de cultura celular é um indicador importante para detectar a morte celular. Este estudo constatou que o nível de LDH no meio de cultura de células do grupo modelo de lesão de células epiteliais tubulares renais de coelho causada por H2O2 foi significativamente aumentado, enquanto o nível de LDH no meio de cultura de células do grupo experimental tratado com diferentes concentrações de Cistanche foi significativamente reduzido, e houve uma concentração-dependente. Os resultados da pesquisa sugerem que, ao estabelecer um modelo de dano celular epitelial tubular renal de coelho induzido por H2O2, a exploração preliminar do efeito protetor do extrato de Cistanche em células epiteliais tubulares renais não é apenas uma base para pesquisas sobre danos celulares causados ​​por estresse oxidativo. A fundação também fornece dados básicos para o desenvolvimento e utilização do Cistanche.

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Referência

[1] Cap. P(2015) Vol Ⅰ (Edição da Farmacopeia Chinesa 2015. Parte Um) [S]. 2015: 135.

［2］ Kim JH, Choi W, Lee JH, et al. A astaxantina inibe a morte celular apoptótica mediada por H2O2-em células progenitoras neurais de camundongo via modulação das vias de sinalização de p38 e MEK［J］. Microbiol Biotechnol, 2009, 19(11): 1355-1363.

[3] Siu PM, Wang Y, Sempre SE. Sinalização apoptótica induzida por estresse oxidativo mediado por H2O2-em miotubos C2Cl2 diferenciados [J]. Life Sci, 2009, 84(13): 468-481.

[4] Zhao Dan, Zhang Xue, Guan Jing, etc. Pesquisa sobre os efeitos de vários fitoterápicos chineses na proliferação de células epiteliais tubulares renais primárias de coelho [J]. Journal of Mountain Agricultural Biology, 2017, 36(4): 76-79.

[5] Chen Lizhen, Feng Tingting, Huang Junfei e outros. Estudo sobre os efeitos das isoflavonas na atividade dos osteoclastos e proliferação e diferenciação dos osteoblastos［J］. Journal of Mountain Agriculture and Biology, 2015, 34(3): 042-047.

[6] Chen Meng, Li Huatao, Li Xiang e outros. Método de coloração dupla AO/EB para detectar apoptose induzida por paclitaxel de células tumorais de mama canina in vitro [J]. Guangdong Pecuária e Ciência Veterinária e Tecnologia, 2011, 36(1): 39-42.

[7] Gu GG, Yang P J. Shen Nong Ben Cao Jing [M]. Pequim: Xueyuan Press, 2013: 73.

［8］ Tao HJ, Shang Z J. Ming Yi Bie Lu［M］. Pequim: People's Medical Publishing House, 1986: 51.

[9] CashTP, Pan Y, Simon M C. Espécies reativas de oxigênio e detecção de oxigênio celular［J］. Free Radic Biol Med, 2007, 43(9):1219-1225.