Determinação do conteúdo total de saponinas em Boschniakia Rossica e Herba Cistanches por espectrofotometria Ⅰ

Abstrato:

Objetivo Este método quantitativo é estabelecido para saponinas totais em Boschniakia rossica eCistanques de ervase o conteúdo dosaponinas totais são determinadas． Métodos Salidroside foi selecionado como substância de referência, reação de cor foi usada com vanilina e ácido perclórico. Em seguida, o conteúdo de saponinas totais em Boschniakia rossica e Herba cistanches foi determinado a 523 nm por espectrofotometria. Ｒresultados A curva do salidrosídeo foi linear no intervalo de 0． 05133 - 0． 2567mg·ml－ 1com a correlação de 0． 9992, e a equação de regressão linear foi Y=1． 611X + 0． 0573． Para Boschniakia rossica, a recuperação média do salidroside foi de 99．. 68% com ＲSD de 1． 68% ( n=6); e para distâncias de Herba, a recuperação média de salidroside foi de 101．. 18% com um ＲSD de 0． 94% ( n=6)． Conclusão O método é preciso, simples e confiável. Portanto, pode ser usado para determinar o conteúdo de saponinas totais em Boschniakia rossica e Herba cistanches.

Palavras-chave:Boschniakia rossica;Cistanques de ervas; Saponinas totais; Determinação; Espectrofotometria; Salidrosídeo

QUANTO TEMPO DEMORA PARA O CISTANCHE FUNCIONAR?

Cistanche deserticola Y． C. Ma e Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov são plantas medicinais parasitas pertencentes à família Orobanchiaceae. Cistanche deserticola é uma planta parasita que vive nas raízes de Haloxylon ammodendron, uma árvore do deserto. É produzido principalmente em Xinjiang e na Liga Alxa, na Mongólia Interior. É conhecido como “ginseng do deserto” devido ao seu baixo rendimento e alto valor medicinal. O gafanhoto [1] é produzido no Nordeste do meu país [2]. Segundo o folclore, tem o efeito da imortalidade, por isso é chamada de “Grama da Era Eterna” do Nordeste. É usado para impotência devido à deficiência renal, dores frias na cintura e nos joelhos, secura dos intestinos e prisão de ventre. Pode nutrir e fortalecer o corpo, retardar o envelhecimento e é um autêntico recurso medicinal no Nordeste [3]. Os dois têm efeitos semelhantes e ambos têm efeitos de tonificar os rins, fortalecer o yang, umedecer os intestinos e laxar [4]. De acordo com os registros sobre Cistanche deserticola no "Compêndio de Matéria Médica" de Li Shizhen da Dinastia Ming, "Esta substância é tônica, mas não agressiva, por isso é chamada de calma. É raro obtê-la de Congrong, por isso é preenchida com Cistanche deserticola." Ou seja, a Cistanche deserticola já foi usada como material medicinal alternativo à Cistanche deserticola. , A pesquisa moderna mostrou que tanto Cistanche deserticola quanto Estuary deserticola têm efeitos farmacológicos como anti-envelhecimento [5, 6], anti-fadiga [7, 8], melhorando a função imunológica [9, 10] e melhorando a memória [{{ 12}}].

O conteúdo de glicosídeos totais em Grasshopper e Cistanche deserticola tem o valor de um estudo aprofundado. Ambos contêm saponinas, óleos voláteis, açúcares, aminoácidos e outros componentes. Os estudiosos relataram estudos comparativos sobre os componentes de óleos voláteis, açúcares, aminoácidos e outros componentes dos dois [4, 14, 15], mas a determinação do conteúdo total de glicosídeos dos dois Não houve relatos na literatura . Os principais componentes da Cistanche deserticola são glicosídeos fenilpropanóides (série de glicosídeos A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], e Cistanche deserticola são glicosídeos feniletanóides (série de Cistanche deserticola )[17,18], as saponinas dos dois são semelhantes e compartilham um componente semelhante, o salidrosídeo. Acreditamos que os glicosídeos são ingredientes ativos importantes de ambos e exploramos o uso da espectrofotometria para determinar o conteúdo de glicosídeos totais. , para fornecer uma base teórica para o futuro desenvolvimento e utilização dos recursos de Echinacea deserticola e Cistanche deserticola.

1 Materiais e instrumentos

1. 1 Material e reagentes: Amaranth officinale, coletado no entorno da montanha Changbai, identificado como uma planta da família Orobanaceae

A planta inteira seca de Orobanche coerulescens, lave a amostra e drene a água

Separar, colocar em caixa de secagem com temperatura constante a 40 graus, secar até peso constante, esmagar, passar por peneira de malha 40 e preparar

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., identificada como listada

Cistanche deserticola Y． C. Carne seca da Ma

Caules, lavados, secos ao ar, secos até peso constante, triturados, passados ​​por peneira 40-de malha, reservados; vermelho

Substância de referência Crassusida (fornecida pelo Instituto Chinês de Produtos Farmacêuticos e Biológicos, número de lote 110818

- 200404, para determinação de conteúdo); todos os reagentes experimentais utilizados são de grau analítico doméstico.

1. Espectrofotômetro UV-visível de 2 instrumentos 752N (Shanghai Jingke); Seu-1901 par

Espectrofotômetro UV de feixe (Beijing Puxi General Co., Ltd.); balança analítica eletrônica

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); AV-80

Triturador universal de alta velocidade (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 métodos

2.1 Preparação da solução de referência

Use uma balança analítica para pesar com precisão o salidrosídeo 15,40mg, dissolva em metanol, transfira para um balão volumétrico 25-e ajuste o volume até a marca. Prepare-se para conter 0,0% de salidrosídeo por ml. A solução de 616 mg é utilizada como solução de referência e é lacrada na geladeira para uso posterior.

2.2 Preparação da solução de teste

Use uma balança analítica para pesar com precisão os pós medicinais de Grasshopper e Cistanche deserticola. 2. 0g, coloque em um frasco de fundo redondo, adicione 40ml de etanol 90%, calor e extração por refluxo de Grasshopper uma vez, e calor e refluxo Cistanche deserticola duas vezes, cada tempo de extração é de 1,5h, após filtração por sucção, combine o filtrado, concentre até a secura em banho-maria, adicione 25ml de água para dissolver, extraia 3 vezes com éter de petróleo, 25ml de cada vez, descarte o líquido de éter de petróleo na camada superior e continue a extrair 3 vezes com n-butanol saturado em água. 25ml de cada vez, combinar três extratos de n-butanol, evaporar o líquido de n-butanol em banho-maria em capela, diluir com metanol em um balão volumétrico de 10ml, misturar bem, medir com precisão 1ml da solução e diluir com metanol para um volume de 25 ml. frasco, misture bem e use-o como solução de teste para uso posterior.

2. 3. Seleção do comprimento de onda de medição

irá 1. Coloque 25ml da solução de referência e da solução de teste em tubos de ensaio graduados com rolhas, evapore o solvente metanol em banho-maria com temperatura constante a 60 graus e adicione 0. 2 ml de solução de vanilina-ácido acético glacial a 5% e 0,8 ml de solução de ácido perclórico foram reagidos em banho-maria a 60 graus por 15 min. Retire o tubo de ensaio e resfrie-o imediatamente com água gelada por 5 min. Adicione 5 ml de ácido acético glacial e agite bem [20]. Prepare a solução de referência usando metanol da mesma maneira. A solução após o desenvolvimento da cor foi submetida à varredura de comprimento de onda, e o comprimento de onda máximo de absorção de 523 nm após a reação de cor do salidrosídeo foi selecionado entre 400 e 800 nm como o comprimento de onda de medição dos glicosídeos totais de Escherichia coli e Cistanche deserticola. Os padrões de varredura da substância de controle e da substância de teste são mostrados na Figura 1.

2. 4. Investigação da relação linear: Use uma pipeta para desenhar com precisão a solução de referência 0. 5,1. 0,

1.5,2. 0,2． Foram colocados 5 ml em tubos de ensaio tapados numerados de 1 a 5, e a reacção de cor foi realizada de acordo com os passos em "2.3". Uma experiência em branco foi realizada com metanol em condições paralelas e a absorvância foi medida a um comprimento de onda de 523 nm. A absorbância A (Y ) é a ordenada, concentração mg·ml-1

(X) é a abcissa, a regressão linear é realizada e a equação de regressão é Y {{0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992), o resultado mostra que a concentração de massa de salidroside está em 0. A relação linear é boa dentro da faixa de 05133-0.2567mg·ml-1. Os resultados são mostrados na Figura 2.

2.5 Teste de estabilidade

Meça com precisão uma quantidade apropriada da solução de teste de Grasshopper e Cistanche deserticola, desenvolva a cor de acordo com o método "2.3" e meça o valor de absorbância uniformemente em 6 vezes em 30 minutos. Isto mostra que dentro de 30 minutos após o desenvolvimento da cor, Grasshopper e Cistanche deserticola irão. A estabilidade da solução de teste é relativamente boa. Os resultados são mostrados na Tabela 1.

2. 6 Teste de precisão

Meça com precisão uma quantidade apropriada da solução de referência, desenvolva a cor de acordo com o método "2.3" acima e meça a absorbância 6 vezes continuamente. Os resultados são mostrados na Tabela 2. Os resultados mostram que a precisão deste instrumento experimental é boa.

Figura 1 Padrões de varredura em camada fina da substância de referência salidroside (A), solução de teste de gafanhoto (B) e solução de teste de cistanche deserticola (C)

2. 7. Teste de repetibilidade.

Pese com precisão 6 porções de pó de gafanhoto e cistanche deserticola, cada porção contém 2, 0g, após aquecimento e extração por refluxo usando o processo de extração ideal que foi determinado, siga as etapas em "2,3" e meça o absorbância em um comprimento de onda de 523 nm. Os resultados da medição são mostrados na Tabela 3 e Tabela 4.

2. 8. Teste de taxa de recuperação de amostra.

Pese com precisão 6 amostras de Grasshopper e Cistanche deserticola com porcentagem de massa conhecida de glicosídeos totais. Cada amostra tem 12 mg. Adicione com precisão 2 ml de solução de referência de salidroside. Siga "2. 2" Extraia a amostra do item, determine o conteúdo total de glicosídeos após o desenvolvimento da cor de acordo com o item "2.3" e calcule a taxa de recuperação da amostra. Os resultados são mostrados na Tabela 5 e Tabela 6.