Análise da expressão de microRNA após intervenção com glutamina na lesão aguda de isquemia-reperfusão renal

4. Discussão

É de grande valor clínico evitar ou reduzirlesão de isquemia-reperfusão. A GLN tem efeitos antioxidantes e anti-inflamatórios e pode proteger o rim das graves consequências da lesão de isquemia-reperfusão [15]. Neste estudo, descobrimos que o tratamento com GLN diminuiu significativamente os níveis de SCr e BUN e atenuou a lesão tubular. Esses efeitos contribuíram para seus efeitos protetores contra LRA induzida por I/R. Mais importante ainda, revelamos um novo mecanismo de função GLN que estava envolvido na via de sinalização cGMP-PKG, regulando negativamente o miR-132-5p.

Os miRNAs geralmente atuam ligando-se às regiões 3 'não traduzidas dos mRNAs alvo, o que leva à degradação do mRNA e impede a tradução da proteína [16, 17]. Em estudos relacionados, descobriu-se que os miRNAs contribuem para o efeito terapêuticoalvo de IRA e rimreparar porregulando a inflamação, apoptose, proliferação, eangiogênese[18, 19]. Estudos sobre o efeito protetor da glutamina nos rins têm sido realizados nos últimos anos, mas há poucos estudos sobre o mecanismo deproteção do rim mediada por glutaminano nível do miRNA.

EXTRATO ORGÂNICO DE CISTANCHE COM 25% EQUINACOSÍDEO E 9% ACTEOSÍDEO PARA INFECÇÃO RENAL

Um total de 104 miRNAs com expressão diferencial significativa foram selecionados no grupo I/R e no grupo I/R + GLN. Entre os principais miRNAs que identificamos, o miR-132 desempenha um grande papel imunorregulador na imunidade, com células T CD4 + expressando níveis mais elevados de miR-132 e ativação de células T levando à regulação positiva de miR -132 [20]. O miR- 132-5p foi regulado positivamente no grupo I/R + GLN, sugerindo que o tratamento com Gln pode melhorar a atividade imunológica das células T CD4 +. O miR-205 foi significativamente diminuído em pacientes com LRA e foi correlacionado negativamente com SCr e BUN e foi um fator de risco independente para o prognóstico de pacientes com LRA [21].

O miR-205 é considerado um alvo para o tratamento de processos patológicos relacionados ao estresse oxidativo e à autofagia durante a LRA [22, 23]. +is implica que a GLN pode utilizar o miR-205 para regular o dano oxidativo na LRA. O miR -615 é regulado negativamente no transplante renal e na glomeruloesclerose segmentar e focal [24, 25]. No entanto, nenhum estudo foi encontrado para mostrar a relação entre miR-615 e I/R.

Figura 4: +e expressão de miRNAs chave no grupo sham, grupo I/R e grupo I/R + GLN detectado por qRT-PCR. ∗P < 0.05 e ∗∗P < 0,01.

Figura 5: análise de enriquecimento +e de genes alvo. (a) +e 10 principais termos GO de enriquecimento de genes alvo. Vermelho refere-se a processos biológicos, azul refere-se à composição celular e verde refere-se afunção molecular. (b) vias +e KEGG de genes alvo enriquecidas.

Investigamos ainda o mecanismo regulador alvo a jusante subjacente à expressão alterada de miRNAs pelo tratamento I/R com GLN. Nas vias KEGG, a ativação da sinalização Notch desempenha um papel promotor na inflamação e apoptose associadas à I/R [26]. A inibição da sinalização Notch pode ser uma estratégia antiinflamatória potencial para o tratamento de doenças renais [27]. A ativação da via de sinal PI3K-Akt pode desempenhar papéis positivos na antiapoptose e na proteção do rim contra lesões de I/R [28, 29]. Nos últimos anos, a ativação da via cGMP/PKG como método terapêutico para reduzir a lesão de I/R tem atraído muita atenção, e um dos seus importantes mecanismos de proteção é a participação no processo antiapoptótico [30–32]. Estes resultados indicaram que a GLN pode reduzir o grau de LRA induzida por I/R através da via cGMPPKG.

Algumas limitações do nosso estudo devem ser levadas em consideração. Primeiro, não realizamos sequenciamento de alto rendimento da expressão de miRNA no grupo sham, o que pode afetar a identificação de genes envolvidos no tratamento com GLN. No modelo celular, não realizamos o tratamento da GLN para verificar a alteração das vias de sinalização provocada pelo seu tratamento. Estudos futuros serão necessários para avaliar prospectivamente os principais miRNAs comomecanismos reguladores moleculares para tratamento de GLN.

5. Conclusões

Em conclusão, utilizando a técnica de sequenciamento de alto rendimento, este experimento descobriu que, após a intervenção com glutamina, houve uma expressão diferencial significativa de miRNA em histócitos renais comlesão de isquemia-reperfusãoin vitro, o que pode estar relacionado aos miRNAs-chave regulados positivamente. +e A via cGMP-PKG influenciada pelo miR-132- 5p pode estar envolvida no tratamento de I/R por GLN. No entanto, mais estudos são necessários para esclarecer o mecanismo regulatório específico.

Referências

[1] C. Vázquez-Carballo, M. Guerrero-Hue, C. Garcia-Caballeroet al., "Receptores Toll-like em lesão renal aguda", InternationalRevista de Ciências Moleculares, vol. 22, 2021.

[2] YL Wu, HF Li, HH Chen e H. Lin, "MicroRNAs comobiomarcadores e alvos terapêuticos na inflamação eLesão renal aguda relacionada à isquemia-reperfusão", InternationalRevista de Ciências Moleculares, vol. 21, 2020.

[3] AA Sharfuddin e BA Molitoris, "Patofisiologia delesão renal aguda isquêmica",Nature Reviews Nefrologia, vol. 7, não. 4, pp. 189–200, 2011.[4] Y. Yan, Z. Ma, J. Zhu, M. Zeng, H. Liu e Z. Dong, "miR-214reprime a mitofusina-2 para promover a apoptose tubular renal emlesão renal aguda isquêmica",Jornal Americano de Fisiologi-Fisiologia Renal, vol. 318, não. 4, pp. F878–F887, 2020.

[5] Y. Yang, M. Song, Y. Liu et al., "Abordagens renoprotetorase estratégias na lesão renal aguda",Farmacologia eterapêutica, vol. 163, pp. 58–73, 2016.

[6] BA Molitoris, "+tradução terapêutica em rim agudolesão: o eixo epitelial/endotelial",Jornal de ClínicaInvestigação, vol. 124, não. 6, pp. 2355–2363, 2014.

[7] N. Petejova, A. Martinek, J. Zadrazil et al., "Rim agudolesão em pacientes sépticos tratados com medicamentos nefrotóxicos selecionadosagentes tibióticos - fisiopatologia e biomarcadores - uma revisão",Revista Internacional de Ciências Moleculares, vol. 21, 2020.

[8] H.‑J. Kim, DJ Park, JH Kim et al., "A glutamina protegecontra a nefrotoxicidade induzida pela cisplatina, diminuindo o cisacúmulo de platina",Revista de Ciências Farmacológicas, vol. 127, não. 1, pp. 117–126, 2015.

[9] F. Zhan, X. Wang, J. Zhang, S. Yi e P. He, "Glutaminaalivia a disfunção renal associada à indução de gentamicinalesão renal aguda em ratos Sprague-Dawley", Biotechnologye Bioquímica Aplicada, 2021. 

[10] KC Liboni, N. Li, PO Scumpia e J. Neu, "Glutaminamodula a produção de IL-8 induzida por LPS através de IκB/NF-κB no epitélio intestinal humano fetal e adulto",Diário deNutrição, vol. 135, não. 2, pp. 245–251, 2005.

Serviço de apoio da Wecistanche - o maior exportador de cistanche da China:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Compre para obter mais detalhes de especificações:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

OBTENHA EXTRATO DE CISTANCHE ORGÂNICO NATURAL COM 25% EQUINACOSÍDEO E 9% ACTEOSÍDEO PARA INFECÇÃO RENAL