Avanços na Identificação Molecular de Cistanche Ⅱ

3 Problemas existentes

3.1 A tecnologia de identificação molecular é única e não avançada o suficiente

A identificação molecular deCistanche deserticolalimita-se à tecnologia de código de barras de DNA, tecnologia de marcadores moleculares AFLP, RAPD e ISSR. Com o rápido desenvolvimento da tecnologia ômica, a pesquisa multi-ômica deCistancheplantas também alcançou certos resultados. Nas plantas, as sequências do genoma do cloroplasto estão mais prontamente disponíveis do que as sequências do genoma nuclear [48]. Yang Qiaoqiao [49] construiu uma árvore filogenética com base em um total de 15 sequências de proteínas do genoma do cloroplasto e descobriu queCistanche deserticolafoi bem diferente das outras quatro espécies do mesmo gênero, o que indicou que Cistanche deserticola teve maior probabilidade de se diferenciar durante a evolução. Mas atualmente.

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As pesquisas sobre classificação de espécies ainda não são muito claras, principalmente sobre a classificação deCistanchedeserticola eCistanchedeserticola em Lanzhou, ainda existem algumas diferenças e mais pesquisas são necessárias. Xu Wanqi [50] descobriu que uma pequena quantidade de genes de cloroplastos migrou para o genoma mitocondrial e especulou que alguns genes de cloroplastos podem ser transferidos para o genoma nuclear. Em estudos futuros, é possível analisar melhor se há comunicação bidirecional entre o genoma mitocondrial e o genoma nuclear deCistanche deserticola. Nos últimos anos, o rápido desenvolvimento de tecnologias multi-ômicas, como genoma completo, transcriptoma, proteoma e metaboloma, pode fornecer uma base para a mineração aprofundada de genes funcionais de Cistanche, a construção de informações genéticas e perfis de expressão gênica de Cistanche plantas e a identificação de vias metabólicas de substâncias funcionais em Cistanche. A análise fornece uma maneira eficaz e também fornece suporte para a proteção de recursos, avaliação e desenvolvimento de recursos de plantas Cistanche.

3.2 A profundidade do conteúdo da pesquisa não é suficiente e a praticabilidade não é forte

3.2.1 Pesquisa sobre autenticidade de Cistanche deserticola

Os materiais medicinais chineses produzidos por Wecistanche foram clinicamente comprovados como tendo melhor efeito curativo e melhor qualidade do que outras áreas produtoras. Chen Bo et al [51] descobriram que os conteúdos de equinacosídeo e verbascosídeo contidos em Cistanche deserticola de diferentes origens eram significativamente diferentes. Existem duas bases de Cistanche deserticola e Cistanche tubulosa[1]. O primeiro está distribuído principalmente na Mongólia Interior, norte de Xinjiang, Gansu, Qinghai e Ningxia; o último é distribuído apenas nos condados ao redor do deserto de Taklimakan, ao sul das montanhas Tianshan, em Xinjiang. , apenas a Cistanche deserticola precisa ser distinguida de sua origem[52]. A pesquisa de Huang Linfang et al. [53] mostraram que o 2'-acetil verbascosídeo pode ser usado como um componente de índice para distinguir as duas principais áreas produtoras de Cistanche. Por meio da análise de comparação de sequências, descobriu-se que havia diferenças nos loci de sequência entre diferentes áreas produtoras de Cistanche, e as duas áreas produtoras de Cistanche foram claramente divididas em dois ramos. ,Diferença significante. Os estudos acima fornecem uma certa referência para a identificação da autenticidade de Cistanche deserticola, mas o mecanismo de formação de sua autenticidade ainda não foi estudado. Xie Dongmei et al [54] estudaram o transcriptoma da casca da raiz de Fengdan cultivada em diferentes lugares,

Verificou-se que o enriquecimento de genes expressos entre amostras de diferentes origens mostrou diferenças significativas entre amostras de diferentes origens. [55] com base no método metabolômico descobriram que a altitude de crescimento tem um efeito mais óbvio no conteúdo de substâncias voláteis em Angelica sinensis, e a interação entre altitude e tipo de solo está relacionada aos compostos voláteis de Angelica sinensis de diferentes origens. Os resultados da pesquisa acima mostram que a aplicação da tecnologia ômica ao estudo do Cistanche pode explicar as principais razões para a formação da autenticidade do Cistanche, fornecendo assim orientação teórica para a proteção e melhoria da variedade do Cistanche.

3.2.2 Identificação dos produtos processados ​​Cistanche

Cistanche deserticola tem um valor medicinal extremamente alto e é um material medicinal tradicional chinês. Cistanche deserticola é dividida em diferentes especificações e tipos de produtos devido à sua autenticidade, espécies cultivadas e silvestres, ou a aparência de suas características, e também há diferenças óbvias de preços[43]. Alguns empresários sem escrúpulos costumam misturar variedades substitutas de Cistanche ou seus produtos falsificados para obter lucros enormes. Atualmente, existem muitas variedades confusas de Cistanche no mercado de materiais medicinais, como Cistanche deserticola, Salt Cistanche, Lanzhou Cistanche[3] e o produto falsificado Balanophora polyandra Griff. são todos usados ​​como Cistanche como remédio [56]. É relativamente simples identificar as plantas originais de Cistanche deserticola e suas variedades confusas, mas é difícil identificar a autenticidade de seus produtos processados ​​com base apenas em seus caracteres. Portanto, é particularmente importante identificar a autenticidade dos produtos processados ​​de Cistanche deserticola por tecnologia de identificação molecular.

Li Zhenhua et al [22] obtiveram primers específicos do local para a identificação de Cistanche, Cynomorium e Huanghua Liedang por meio de triagem e estabeleceram um método de PCR específico do local, que pode identificar corretamente materiais medicinais Cistanche e produtos falsificados, mas para Cistanche O a identificação de produtos falsificados não foi relatada até agora. Li Na et al [57] estabeleceram um método de extração de DNA para besouros terrestres e seus materiais medicinais falsificados com base na tecnologia de marcadores moleculares de DNA mitocondrial citocromo oxidase b (Cytb) e projetaram primers altamente específicos para besouros de madeira para identificar efetivamente besouros terrestres e seus produtos falsificados. Portanto, no futuro, primers com alta especificidade paraCistanchepodem ser projetados com base nas diferenças nas sequências de genes nucleares ou cloroplastos deCistanchefábricas para identificar efetivamente a autenticidade dos produtos processados ​​Cistanche.

3.2.3 Identificação de medicamentos patenteados chineses de Cistanche deserticola

Atualmente, a identificação molecular de Cistanche deserticola é baseada principalmente na sequência ITS2 como um código de barras de DNA, e a identificação das espécies é realizada estabelecendo os resultados da análise da árvore de agrupamento NJ e verificando se os resultados são consistentes com os resultados da comparação BLAST. Comparado com o genoma nuclear, todo o genoma do cloroplasto tem uma estrutura estável e uma baixa taxa de mutação.

Tem as vantagens de baixo peso molecular, pequena massa molecular relativa e genoma conservado [49]. A triagem das diferentes sequências de código de barras de DNA entre as espécies, usando todo o genoma do cloroplasto, é uma direção para a identificação e classificação precisas das plantas Cistanche.

O metabarcoding de DNA é um meio importante para identificar amostras mistas e é de grande importância para identificar a autenticidade de Cistanche deserticola em medicamentos prescritos ou amostras mistas. A equipe de Chen Shilin identificou os medicamentos patenteados chineses contendo Cistanche deserticola vendidos no mercado, e os resultados mostraram que havia adulteração neles, e alguns produtos falharam em detectar a Cistanche deserticola [58]. Isso pode ser devido a fatores como alta temperatura e vinagre no processo de fabricação de medicamentos de patente chinesa, que levarão à degradação do DNA na erva Cistanche. Portanto, realizar a identificação molecular de medicamentos patenteados chineses contendo Cistanche deserticola é de grande importância para garantir sua autenticidade e qualidade, e as perspectivas de aplicação são relativamente amplas.

3.2.4 Identificação de variedades silvestres e cultivadas de Cistanche

Em comparação com os produtos cultivados, o Cistanche selvagem tem um período de crescimento mais longo e não possui resíduos de pesticidas e metais pesados. É um produto livre de poluição e é mais favorecido pelas pessoas. Xu Rong et al[59] descobriram que o conteúdo de equinacosídeo em amostras cultivadas não era significativamente diferente daquele em amostras selvagens; mas o teor médio de verbascosídeo nas amostras silvestres foi significativamente maior do que nas amostras cultivadas. Portanto, procurar e analisar os produtos silvestres e cultivados de Cistanche

As características da sequência podem fornecer base de identificação para produtos silvestres e cultivados desta espécie. Luo Hongbin et al[60] sequenciou a sequência nrDNA-ITS da espécie selvagem e da espécie cultivada de Banqiao Codonopsis pilosula, e analisou os locais de variação para distinguir os dois. Da mesma forma, se a seqüência de nrDNA-ITS de Cistanche deserticola for sequenciada e analisada, os locais de variação genética entre variedades selvagens e cultivadas podem ser obtidos, e as variedades selvagens e cultivadas de Cistanche deserticola podem ser distinguidas.

4 Perspectivas

A tecnologia de identificação molecular tem feito algum progresso na aplicação deCistancheplantas. A tecnologia de identificação molecular foi usada para realizar a identificação da origem e autenticidade deCistancheplantas, e revelou a diversidade genética e a relação genética das populações de plantas Cistanche, o que forneceu uma importante referência para a proteção e utilização racional deCistancheplantas. No entanto, ainda existe o fenômeno do abuso de produtos falsificados mistos Cistanche deserticola no mercado, que precisa ser resolvido com urgência. A tecnologia de identificação molecular pode fornecer algum suporte técnico para a identificação de Cistanche deserticola e seus produtos falsificados e fornecer opiniões de referência para regular os preços de mercado e manter a ordem do mercado. Com o desenvolvimento contínuo da ciência e tecnologia modernas, o ambiente de vida humana continua a se expandir, o ambiente ecológico natural continua a encolher e o ambiente de crescimento da Cistanche deserticola está sendo constantemente destruído.

Embora alguns progressos tenham sido feitos na pesquisa sobre o plantio artificial de Cistanche, a proteção do habitat do Cistanche selvagem também é particularmente importante. Através do estudo da autenticidade deCistanche, esclarecendo seu mecanismo de autenticidade, pode fornecer uma base para a proteção e utilização racional das plantas Cistanche. E fornecer referência para criação de novas raças.

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