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Um Glicosídeo de Flavonol Acilado Exclusivo de Prunus Persica (L.) Var. Florida Prince: uma nova formulação cosmecêutica de nanopartículas lipídicas sólidas para cuidados com a pele, parte 3

Apr 14, 2023

3.5.3. Estimativa de Superóxido Dismutase (SOD)

De acordo com estudos relevantes,cistancheé uma erva comum conhecida como "a erva milagrosa que prolonga a vida". Seu componente principal écistanósido, que tem vários efeitos, comoantioxidante, anti-inflamatório, epromoção da função imunológica. O mecanismo entre cistanche eClareamento da pelereside no efeito antioxidante deglicosídeos cistanche. A melanina na pele humana é produzida pela oxidação da tirosina catalisada portirosinase, e a reação de oxidação requer a participação de oxigênio, de modo que os radicais livres de oxigênio no corpo se tornam um fator importante que afeta a produção de melanina. Cistanche contém cistanósido, que é um antioxidante e pode reduzir a geração de radicais livres no corpo, assiminibindo a produção de melanina.

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Para investigar os efeitos protetores das formulações de creme de PPEE-SLNs na atividade de SOD, os valores de atividade de SOD dos grupos normal (G1) e tratamento (G3–G5) foram comparados com os do G2 (grupo controle). O nível normal de atividade de SOD foi medido como 14,71 ± 1,58 U/mL, 184,79 por cento maior que o do grupo normal (7,96 ± 0,72 U/mL), o que significa que a atividade de SOD do grupo normal foi diminuída pela irradiação UV. As atividades de SOD de G5, G4 e G3 foram 142,21 por cento, 132,78 por cento e 114,57 por cento, respectivamente, do grupo normal, indicando que a atividade de SOD foi protegida pelas formulações de creme PPEE-SLNs. Embora não tenham sido encontradas diferenças estatísticas na atividade de SOD entre os grupos de tratamento (G3–G5), o efeito protetor de (G5 e G4) contra a redução de SOD por irradiação UV foi superior ao do produto comercial (G3) (Figura 10).

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4. Discussão

As doenças de pele representam uma preocupação de saúde significativa em todo o mundo. Eles variam muito em sintomas e gravidade e podem ser temporários ou crônicos. Entre as mais comuns está a acne, a inflamação crônica da pele mais comum [51], e as rugas da pele diretamente ligadas à degradação da MEC e à pigmentação da pele. Embora a patologia dessas doenças envolva muitos fatores, vários estudos indicam que o estresse oxidativo é um de seus principais fatores [52]. O estresse oxidativo pode iniciar a inflamação e causar danos às estruturas celulares. No entanto, deve-se notar que, na acne, o estresse oxidativo pode não ser a única causa. A infecção bacteriana e a colonização desempenham um papel significativo adicional em sua patogênese por meio da peroxidação lipídica [53]. Isso destaca o estresse oxidativo como um alvo potencial para o tratamento de doenças de pele pela administração de antioxidantes locais e sistêmicos.

Atualmente, embora muitas técnicas como rejuvenescimento a laser e produtos sintéticos estejam disponíveis para o tratamento do envelhecimento cutâneo, a indústria cosmética busca produtos alternativos de origem natural para evitar os malefícios dos sintéticos. Nesse contexto, os estudos têm focado nos antioxidantes naturais como ingredientes cosmecêuticos que suprimem as ROS induzidas por UV, inibem as enzimas relacionadas à pele e diminuem a formação de melanina como uma alternativa ao tratamento atual para o desenvolvimento de produtos antienvelhecimento para a pele.

Um dos fitoconstituintes mais importantes nas plantas medicinais são os polifenóis, em particular os flavonoides. Os flavonoides são uma classe de metabólitos secundários de plantas com grande potencial cosmético devido às suas excelentes atividades antioxidantes, anti-inflamatórias e antibacterianas. Além disso, os flavonoides têm sido sugeridos no tratamento dos sinais de envelhecimento por diferentes mecanismos, incluindo suas propriedades antioxidantes pela eliminação de radicais livres e quelação de metais com metaloenzimas, fornecendo atividades antiprotease [55], efeito protetor solar e restauração de danos ao DNA induzidos por UV [56] . Foi relatado que genisteína, miricetina, apigenina, que estão presentes em muitas frutas, ervas e vegetais, proantocianidinas, de sementes de uva, quercetina e kaempferol no chá verde atenuam os efeitos colaterais causados ​​pela radiação UV [56-58]. Catequina, hesperidina, miricetina, rutina e quercetina têm atividade antioxidante e antiprotease que é benéfica na prevenção do envelhecimento da pele [57].

O Egito ocupa a décima posição global na produção de pêssegos e nectarinas, produzindo cerca de 358.012 toneladas em 2019 [59]. Prunus persica (L.) var. Florida Prince é uma das variedades de pêssego mais comuns cultivadas amplamente no Egito. Um estudo anterior sobre outras variedades de subprodutos de folhas de PP apresenta seu uso em produtos alimentícios, suplementos nutracêuticos e como ingrediente cosmético e enfatiza seu alto teor de flavonoides [33]. Por outro lado, dado o potencial cosmético encontrado nos flavonoides e as potentes atividades antioxidantes relatadas das folhas de PP devido ao seu alto teor de flavonoides. Assim, as folhas de PP foram escolhidas para avaliar seu potencial cosmético anti-rugas e clareador da pele como subprodutos agrícolas. Nenhum estudo anterior foi relatado sobre os antioxidantes in vitro e as atividades das enzimas relacionadas à pele do PPEE e, até o momento, nenhuma preparação antienvelhecimento para a pele baseada em subprodutos de folhas de PP var. O Florida Prince usando SLNs carregados existe até onde sabemos.

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No presente estudo, o perfil fenólico do PPEE resultou no isolamento de um glicosídeo flavonol acilado com uma estrutura rara, kaempferol 3-O- - 4C1-(600 -O{{ 4}},4- dihidroxifenilacetil glucopiranósido) KDPAG com alto teor de fenólicos totais e flavonóides. Existem vários estudos comprovando que os extratos das folhas possuem maior concentração de compostos fenólicos do que outras partes da mesma planta [14]. A avaliação da citotoxicidade in vitro mostrou a não toxicidade do PPEE, e PPEE-SLNs devido ao alto percentual de viabilidade celular. Os SLNs sem extrato mostraram a maior porcentagem de viabilidade celular, pois os SLNs são compostos de lipídios fisiologicamente biocompatíveis e biodegradáveis ​​semelhantes às moléculas lipídicas da pele e, portanto, são transportadores seguros com alto efeito de oclusão alcançado sem o uso de parafina e outros óleos gordurosos [60 ].

Poderosas propriedades antioxidantes dos polifenóis foram observadas devido à sua atividade redox, permitindo que eles sirvam como doadores de hidrogênio, eliminando radicais livres, bem como sua capacidade de quelar metais [55]. Portanto, muitos métodos foram usados ​​para estimar as propriedades antioxidantes neste estudo. Capacidades antioxidantes significativas de PPEE contra ensaios de DPPH, ABTS e -caroteno em comparação com seus respectivos padrões. Potentes atividades antioxidantes foram mostradas por KDPAG usando os mesmos ensaios. O ensaio de -caroteno em folhas de PP foi o primeiro a ser relatado. Muitos estudos relataram que a atividade de branqueamento do -caroteno está ligada a flavonóides que podem inibir a oxidação do ácido linoleico e a formação de hidroperóxidos [14]. Os flavonóides acilados, a classe de KDPAG, foram previamente relatados como tendo fortes atividades antioxidantes [36]. Em geral, os valores de antioxidantes encontrados são superiores aos relatados na literatura. As diferenças entre os protocolos de extração usados ​​podem explicar esse ponto. Este estudo foi realizado usando um extrato etanólico de folhas de PP nos trabalhos citados, a extração foi feita usando acetona ou metanol [20,61].

Na literatura, TPC e TFC foram significativamente correlacionados com a atividade antioxidante do PPEE, confirmando que os polifenóis presentes no PPEE foram um potente agente antioxidante e que a atividade de eliminação de radicais do PPEE é altamente dependente do conteúdo de flavonóides, principalmente flavonóis no extrato que é o núcleo do novo isolado. TPC (p < {{0}}.001) (r=0.93, 0.96, 0. 95, para DPPH, ABTS, teste de branqueamento de -caroteno, respectivamente) e TFC (p < 0,001) (r=0,98, 0,99, 0,98, para DPPH, ABTS, teste de branqueamento de -caroteno, respectivamente). Os resultados estão de acordo com estudos anteriores [20].

Colagenase, elastase e tirosinase são enzimas cruciais envolvidas no envelhecimento da pele. A inibição das três enzimas aumentará a força da pele, melhorará a elasticidade, evitará o desenvolvimento de manchas escuras e, assim, prevenirá a formação de rugas. O efeito inibitório das enzimas se deve ao princípio ativo ou ao efeito sinérgico dos diferentes componentes do PPEE. Os achados in vitro de inibição enzimática mostraram que PPEE, PPEE-SLNs e KDPAG possuíam atividade promissora antienvelhecimento e clareamento da pele, no que diz respeito à inibição das enzimas elastase, colagenase e tirosinase, e todos foram os primeiros a serem relatados. Foi relatado que frutas, sementes, flores e outras espécies de PP mostraram inibição de elastase, colagenase e tirosinase [28,30-32]. Além disso, a atividade anti-tirosinase foi relatada para flavonóides acilados, da classe KDPAG [62].

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KDPAG apresentou o maior percentual de inibição contra as três enzimas seguido por PPEE-SLNs. PPEE, PPEE-SLNs e KDPAG exibiram atividade de inibição anti-elastase muito boa de 86.12 ± 1,42, 89.02 ± 2,31 por cento e 89,15 ± 1,26 por cento, o que foi estatisticamente inferior a N -(Metoxissuccinil)-Ala-Ala-Pro-Val-clorometil cetona (91,12 ± 2,45 por cento) (p < {{30}},01). Em comparação, PPEE-SLNs e KDPAG mostraram atividades de inibição anti-colagenase e anti-tirosinase que foram estatisticamente maiores (p < 0,01) do que seus controles positivos (EDTA e ácido kójico, respectivamente). Por outro lado, o PPEE apresentou inibição da colagenase semelhante (p > 0,05) ao EDTA.
Além disso, fortes correlações positivas significativas foram observadas entre TPC, conteúdo de TFC de PPEE e inibição de elastase, colagenase e tirosinase (p <{0}}.001) (r {{2 }},841 e r=0,893, respectivamente) para inibição de elastase, (p < 0,001) (r=0,985 er=0,987, respectivamente) para inibição de colagenase e (p < 0,001) (r=0,959 er=0,968, respectivamente) para inibição da tirosinase. Isso sugere que fenólicos e flavonoides podem ser os principais componentes responsáveis ​​pela atividade inibitória do PPEE.

Neste estudo, a atividade anti-colagenase pode ser devida à interação dos grupos hidroxila do polifenol com o esqueleto ou outras cadeias laterais do grupo funcional da colagenase ou à interação hidrofóbica entre o anel benzênico do polifenol e a colagenase. Essas interações resultam em mudanças conformacionais na enzima [63]. Além disso, os flavonoides, a classe do composto recém-isolado, são conhecidos por serem quelantes de metais por sua estrutura 3-hidroxi flavona e se ligam a um íon Zn no sítio ativo da colagenase [64]. Além disso, a atividade anti-tirosinase pode ser explicada pela ligação dos grupos hidroxila dos polifenóis por pontes de hidrogênio no sítio ativo da enzima tirosinase, levando à sua inibição [65]. Em relação à elastase, os grupos hidroxila do polifenol e flavonóides formando ligações com os grupos carboxila da serina no sítio ativo da elastase resultam em uma enzima não funcional [66]. Em geral, complexos flavonóides-metal com metaloenzimas têm mostrado potencial para serem miméticos de SOD [67]. Crisina, naringina, quercetina e kaempferol, o núcleo do KDPAG, mostraram efeitos inibitórios da tirosinase [68]. Os flavonóis, a classe do nosso novo isolado, kaempferol, quercetina e miricetina, foram relatados como possuidores de atividade antielastase e anticolagenase [67,69]. Além disso, um estudo anterior mostrou que os flavonóis são inibidores mais fortes da colagenase do que as flavonas e isoflavonas, indicando que o grupo C-3-hidroxila é crítico para uma maior atividade inibitória [69].

O potencial de compostos biologicamente ativos para penetrar na pele é altamente crítico para garantir a entrega ao local alvo. As técnicas de encapsulamento são usadas principalmente para estabilizar os polifenólicos facilmente redutíveis durante o armazenamento e processamento, permitindo assim seus usos cosméticos e tópicos com efeitos antioxidantes aprimorados, absorção dérmica e penetração [70]. Os SLNs foram preparados, caracterizados e avaliados quanto à permeabilidade da pele in vitro e, em seguida, formulados em creme antienvelhecimento usando duas concentrações diferentes (2 por cento e 5 por cento). Ambas as fórmulas de creme apresentaram liberação prolongada de PPEE ao longo de 24 h. Os testes de avaliação realizados para o creme antienvelhecimento formulado de PPEE-SLNs (2 por cento e 5 por cento) mostraram que os subprodutos das folhas de PP são seguros para serem usados ​​na preparação tópica da pele para proteger do envelhecimento intrínseco e extrínseco. O mecanismo hipotético da atividade antirrugas do creme PPEE-SLNs pode ser explicado da seguinte forma; a nano-fórmula atinge a camada dérmica onde os constituintes antioxidantes devem ser entregues e a penetração é potencializada pelo efeito hidratante na superfície da pele.

As atividades antirrugas in vivo de PPEE-SLNs aplicados topicamente (2 por cento e 5 por cento) foram avaliadas contra o fotoenvelhecimento induzido por UV em um modelo de camundongo usando um método de pontuação de rugas, biomarcadores de tecido (SOD) e histopatologia. O creme de PPEE-SLNs de alta ou baixa dose melhora a aparência das rugas, diminui a espessura da derme e da epiderme, aumenta o conteúdo de colágeno e evita a degradação das fibras elásticas, oferecendo um efeito protetor altamente significativo contra os raios UV. Além disso, a elevação da atividade antioxidante detectada reflete a capacidade do creme de PPEE-SLNs em elevar significativamente a SOD, o que vai na mesma linha com diferentes estudos que sugeriram a mesma proteção contra a radiação UV [3]. Os subprodutos das folhas de PP são um potente antioxidante natural para combater o envelhecimento da pele.

Além disso, dependendo das propriedades mencionadas dos polifenóis, constituem os principais mecanismos potenciais de ação contra várias doenças da pele. Considerando o aumento da resistência bacteriana durante o tratamento de algumas doenças da pele, como a acne, os fitoconstituintes das plantas com alta atividade antioxidante e antimicrobiana podem ser cada vez mais utilizados como ingredientes terapêuticos cosméticos [51,71]. Nesse contexto, os compostos fenólicos e outros antioxidantes das folhas de PPEE são valiosos ingredientes terapêuticos com propriedades antioxidantes e antimicrobianas em preparações aplicadas na pele.

5. Conclusões

Este é o primeiro estudo a investigar os subprodutos da folha de PP var. Florida Prince por seu potencial como cosmecêutico. Verificou-se que o PPEE possui atividades antienvelhecimento promissoras por suas capacidades de inibir DPPH, ABST, oxidação de -caroteno, elastase, colagenase e tirosinase, que podem estar correlacionadas com seu alto teor de fenólicos e flavonoides. Além disso, o isolamento e a elucidação estrutural do único glicosídeo flavonol acilado, KDPAG, não foram relatados anteriormente. Este composto é de grande interesse porque representa a primeira acilação com o ácido 3,4-hidroxifenil acético em associação com a química dos flavonoides. A avaliação da citotoxicidade in vitro mostrou a não toxicidade do PPEE e dos PPEE-SLNs otimizados. A expressão in vivo da elastina e os resultados da atividade da SOD mostraram que as formulações de PPEE-SLNs protegeram significativamente a formação de rugas pela irradiação UV. Com base nos resultados obtidos, este estudo recomendou SLNs como novos carreadores para a entrega dérmica de PPEE, pois provou seu potencial para incorporar um extrato antioxidante natural com alta estabilidade sem efeito irritante na pele e, portanto, melhorar o desempenho como ingrediente cosmético contra a pele envelhecimento e recomendou ainda o estudo do uso potencial de polifenólicos incorporados em SLNs para superar problemas de resistência bacteriana, como na acne, por meio de sua capacidade de fornecer tais compostos. Finalmente, todas as descobertas evidenciaram que as folhas de PP representam uma boa fonte de antioxidantes naturais e podem levar ao desenvolvimento de um cosmecêutico natural inovador com efeitos de clareamento da pele e anti-rugas usando subprodutos agrícolas como matéria-prima inicial, bem como usando um novo sistema de entrega. Além disso, pode representar uma solução de gestão de resíduos para o setor agroalimentar. Em conclusão, as novas formulações de PPEE-SLNs contendo subprodutos de folhas de PPEE são boas candidatas para administração tópica de PPEE e úteis para o desenvolvimento de preparações anti-rugas.

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Contribuições do autor:Conceituação, ESM e NS; Curadoria de dados, ESM e NS; Análise formal, ESM, AM e NS; Investigação, ESM e NS; Metodologia, ESM, DAM, AM, SSG e NS; Supervisão, MAMN; Validação, ESM e NS; Redação—rascunho original, ESM, DAM, SSG e NS; Redação—revisão e edição, ESM, AM e NS Todos os autores leram e concordaram com a versão publicada do manuscrito.
Financiamento: Esta pesquisa não recebeu nenhum subsídio específico de agências de financiamento nos setores público, comercial ou sem fins lucrativos.
Declaração do Conselho de Revisão Institucional:O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade de Ciências e Artes Modernas de Outubro (MSA), o protocolo número (PG1/EC1/2020PD).
Declaração de Consentimento Informado:Não aplicável.
Declaração de Disponibilidade de Dados: Os dados estão contidos no artigo.
Conflitos de interesse: Os autores declaram não haver conflito de interesses.

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Para mais informações: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

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